本文關(guān)鍵詞：姜黃素通過上調(diào)miR-7抑制人胰腺癌細(xì)胞生長的機(jī)制研究

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【摘要】：背景和目的:越來越多的證據(jù)顯示,天然化合物姜黃素(curcumin)在腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移中起著至關(guān)重要的作用,并參與調(diào)節(jié)多種細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑。大量研究已證實(shí),mi RNA能夠負(fù)向調(diào)控靶基因的表達(dá),在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著抑癌基因和癌基因的功能。在本項(xiàng)研究中,我們將探討姜黃素作用胰腺癌細(xì)胞后,對(duì)其生長、遷移和侵襲影響的作用和可能的分子機(jī)制。方法:1.以人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3細(xì)胞為試驗(yàn)對(duì)象,分別采用MTT增殖,Transwell試驗(yàn),Annexin V-FITC/PI雙染等試驗(yàn)檢測(cè)姜黃素抑制細(xì)胞的增殖、遷移侵襲及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。2.應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)姜黃素對(duì)兩株細(xì)胞中mi R-7表達(dá)的影響。3.通過轉(zhuǎn)染mi R-7 mimics上調(diào)細(xì)胞內(nèi)mi R-7的表達(dá),或者轉(zhuǎn)染mi R-7inhibitor下調(diào)細(xì)胞內(nèi)mi R-7表達(dá),并結(jié)合姜黃素處理細(xì)胞,檢測(cè)姜黃素通過上調(diào)mi R-7抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和誘導(dǎo)凋亡的作用。其中上調(diào)mi R-7的實(shí)驗(yàn)分組分別為對(duì)照組、姜黃素處理組、mi R-7 mimics轉(zhuǎn)染組、姜黃素與mi R-7 mimics兩者共同處理組。下調(diào)mi R-7表達(dá)的實(shí)驗(yàn)分組分別為:對(duì)照組、姜黃素處理組、mi R-7 inhibitor轉(zhuǎn)染組、姜黃素與mi R-7 inhibitor共同處理組。4.通過轉(zhuǎn)染mi R-7mimics以及mi R-7 inhibitor,結(jié)合姜黃素處理細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分組同上,檢測(cè)姜黃素通過上調(diào)mi R-7影響細(xì)胞內(nèi)下游靶蛋白SET8的表達(dá)。結(jié)果:1.不同濃度姜黃素分別作用人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3細(xì)胞后,與對(duì)照組相比,細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力明顯降低(P0.05),且呈現(xiàn)濃度依賴性。提示姜黃素能夠抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力。2.不同濃度姜黃素分別作用人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3細(xì)胞后,細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組,呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系,說明姜黃素具有誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡的作用。3.姜黃素作用胰腺癌細(xì)胞48小時(shí)后,q RT-PCR結(jié)果表明,姜黃素處理組細(xì)胞內(nèi)mi R-7表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P0.05),并呈現(xiàn)濃度依賴關(guān)系提示姜黃素具有上調(diào)胰腺癌細(xì)胞中mi R-7表達(dá)的作用。4.上調(diào)mi R-7表達(dá)的實(shí)驗(yàn)分組結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,姜黃素處理組和mi R-7mimics轉(zhuǎn)染組均能抑制胰腺癌細(xì)胞增殖和侵襲,誘導(dǎo)凋亡,且兩者共同處理組效果更加明顯(P0.05)。同樣,下調(diào)mi R-7表達(dá)的實(shí)驗(yàn)分組結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,mi R-7 inhibitor轉(zhuǎn)染組促進(jìn)了胰腺癌細(xì)胞增殖和侵襲能力,并且抑制凋亡,兩者共同處理組結(jié)果介于姜黃素組和mi R-7 inhibitor組之間。以上結(jié)果說明了姜黃素通過上調(diào)mi R-7的表達(dá)抑制胰腺癌細(xì)胞增殖和侵襲能力,促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。5.上調(diào)mi R-7表達(dá)的實(shí)驗(yàn)分組結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,姜黃素處理組和mi R-7mimics轉(zhuǎn)染組均下調(diào)了胰腺癌細(xì)胞內(nèi)mi R-7下游靶蛋白SET8的表達(dá),且兩者共同處理組效果更加顯著。同樣,下調(diào)mi R-7表達(dá)的實(shí)驗(yàn)分組結(jié)果顯示:mi R-7inhibitor轉(zhuǎn)染組則上調(diào)了胰腺癌細(xì)胞內(nèi)SET8蛋白的表達(dá),姜黃素處理組下調(diào)了SET8蛋白的表達(dá),兩者共同處理組則介于兩者之間。以上結(jié)果說明姜黃素通過上調(diào)胰腺癌細(xì)胞中mi R-7的表達(dá)下調(diào)SET8蛋白的表達(dá)。結(jié)論:1.姜黃素能夠抑制人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。2.姜黃素能夠通過上調(diào)mi R-7的表達(dá)抑制人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3細(xì)胞增殖和侵襲能力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,并下調(diào)下游靶蛋白SET8的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.9

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郭佳倩;馬仕昆;鄭英;;SET8在細(xì)胞周期中的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2015年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 倪琦;姜黃素對(duì)肝癌Hep1細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子-1α及血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2010年

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本文編號(hào)：1275229