本文關(guān)鍵詞：miR-139在結(jié)直腸癌組織中的表達及其對癌細胞生長的影響

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【摘要】：背景最近研究發(fā)現(xiàn)miRNA是一組堿基數(shù)目大約在22左右的單鏈RNA,通過不同的方式在疾病的病理和生理方面起到調(diào)節(jié)作用,比如腫瘤就是其中之一。調(diào)節(jié)基因的表達通過調(diào)節(jié)靶基因,大多通過減少靶miRNA的蛋白質(zhì)產(chǎn)量。隨著對miR-139的研究深入,發(fā)現(xiàn)miR-139在不同腫瘤的起始、進展和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮不同的作用。目的探討miR-139在結(jié)直腸癌組織中的表達,以及上調(diào)miR-139表達對結(jié)直腸癌細胞生長的影響。方法1. 收集2013年4月-6月安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院普外科20例新鮮大腸癌組織及癌遠端5cm正常大腸黏膜組織。2. 應(yīng)用實時定量PCR法檢測miR-139在20例大腸癌組織及癌旁組織中的表達。3.HT29細胞轉(zhuǎn)染miR-139 mimics后,通過MTT、Softagar方法檢測miR-139對大腸癌細胞增殖的影響。4. Transwell實驗檢測miR-139對大腸癌細胞遷移和侵襲的影響。5. 實驗結(jié)果均用x±s表示。統(tǒng)計分析運用GraphPad Prism軟件。利用t檢驗分析各組數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果1. miR-139在20例大腸癌組織及其癌旁組織中的表達水平分別為6.21019E-05±6.08506E-09和0.000269444±0.000166458,大腸癌組織中miR-139表達水平低于對應(yīng)的癌旁組織,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.41,P0.01)。2. 在HT29結(jié)腸癌細胞株中轉(zhuǎn)染miR-139 mimics后的第1天至第5天,通過MTT比色分析法檢測OD值發(fā)現(xiàn)HT29細胞中miR-139的含量影響細胞的增殖的顯著變化,對照組與實驗組結(jié)果分別為,第一天：(0.0565、0.031)；第二天：(0.218、0.11825)；第三天：(0.46225、0.25975)；第四天：(0.92011、0.45)；第五天：(1.87425、0.97375),并且隨著時間的推移,有擴大趨勢,表明轉(zhuǎn)染miR-139 mimics的HT29細胞增殖明顯受限。3.HT29轉(zhuǎn)染miR-139后在Softagar實驗中計數(shù)對照組每個視野41.33333±5.338539,miR-139組每個視野72.1111 1±12.03583,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.79,P0.01),表明miR-139抑制大腸癌細胞非錨定生長的能力。4. Transwell小室實驗顯示,與陰性對照相比,轉(zhuǎn)染miR-139 mimics后,在遷移實驗和侵襲實驗中,實驗組穿過半透膜的數(shù)量低于對照組,表明HT29細胞轉(zhuǎn)染miR-139后的遷移及侵襲能力明顯下降。結(jié)論miR-139在結(jié)直腸癌組織中低表達,miR-139表達上調(diào)可抑制HT29生長、遷移及侵襲能力,miR-139有潛在抑癌作用。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.34

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本文編號：1270271