本文關(guān)鍵詞：順鉑聯(lián)合碘伏對體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖的影響

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【摘要】：目的:順鉑(DDP)作用機(jī)制特殊,對于多種惡性實(shí)體瘤的治療療效顯著且價(jià)格低廉,因而在臨床的應(yīng)用得到極大推廣。然部分患者先天或后天在腫瘤治療過程中呈現(xiàn)出對順鉑的耐藥性以及交叉耐藥性,加之劑量相關(guān)性毒性不良反應(yīng)等問題阻礙了順鉑在臨床的發(fā)展應(yīng)用。而碘伏從進(jìn)入臨床應(yīng)用以來,多以消毒準(zhǔn)備工作為主,其應(yīng)用價(jià)值有待開發(fā)。為進(jìn)一步探索碘伏的臨床價(jià)值,并進(jìn)一步使順鉑的應(yīng)用能帶來更好效益,該實(shí)驗(yàn)通過對比研究順鉑單藥及與碘伏聯(lián)合對體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖抑制作用,并對其可能的作用機(jī)制進(jìn)行探討。方法:以人胃癌SGC-7901細(xì)胞為研究對象展開本實(shí)驗(yàn),MTT比色法用于檢測濃度梯度的順鉑、碘伏單藥及聯(lián)合應(yīng)用不同時(shí)間后藥物對胃癌細(xì)胞SGC-7901的增殖抑制率;倒置相差顯微鏡用于初步觀察藥物作用后人胃癌細(xì)胞SGC-7901形態(tài)的改變;熒光顯微鏡對于經(jīng)藥物作用且AO/EB染色后的人胃癌細(xì)胞SGC-7901凋亡的形態(tài)學(xué)變化進(jìn)行觀察;流式細(xì)胞儀用來檢測人胃癌SGC-7901細(xì)胞周期分布的改變及凋亡率的變化;Western blot檢測Caspase-3蛋白的表達(dá);ELISA試驗(yàn)用于定量測定人胃癌細(xì)胞SGC-7901培養(yǎng)上清中IL-8的含量。結(jié)果:1、MTT測定結(jié)果顯示:碘伏對人胃癌細(xì)胞SGC-7901體外增殖的抑制作用表現(xiàn)為在一定濃度范圍內(nèi)隨藥物濃度(1、3、6、9?g/ml)的增高及作用時(shí)間的延長(24、48、72 h)抑制效果越明顯,其抑制作用與藥物濃度和作用時(shí)間具有相關(guān)性(P0.05);順鉑對人胃癌SGC-7901細(xì)胞的抑制作用亦與藥物濃度和作用時(shí)間具有相關(guān)性(P0.05);以1、2、4?g/ml的順鉑聯(lián)合3?g/ml碘伏分別作用相應(yīng)時(shí)間(24、48、72 h)后抑制作用較兩單藥分別作用的效果更顯著(P0.05),結(jié)果提示碘伏可以提高胃癌細(xì)胞順鉑化療的敏感性。2、倒置顯微鏡及熒光顯微鏡下均可觀察到胃癌細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變。3、流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期分布的結(jié)果顯示,順鉑和碘伏兩單藥分別以及聯(lián)合作用48小時(shí)后細(xì)胞周期有S期阻滯,1、2、4?g/ml順鉑阻滯細(xì)胞于S期的比例分別為28.32%、37.12%、45.06%,3?g/ml碘伏阻滯細(xì)胞于S期的比例為25.63%,與同步進(jìn)行對照組的21.01%比較差異具有顯著性(P0.05)。2?g/ml順鉑聯(lián)合3?g/ml碘伏作用48h后S期的比例為43.89%,明顯高于兩藥單獨(dú)作用,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性意義(P0.05)。4、流式細(xì)胞儀對細(xì)胞凋亡進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,1、2、4?g/ml順鉑孵育細(xì)胞48h后,凋亡率分別為8.25%、16.51%、29.02%,3?g/ml碘伏組為7.62%,與同步進(jìn)行對照組的3.22%比較差異顯著均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。聯(lián)合用藥組細(xì)胞凋亡率為27.28%,顯著高于兩藥單獨(dú)作用,差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性意義(P0.05)。5、Western blot檢測結(jié)果顯示,順鉑、碘伏單獨(dú)及聯(lián)合作用均能上調(diào)Caspase-3的表達(dá),且聯(lián)合用藥組Caspase-3的表達(dá)水平更高。6、Elisa試驗(yàn)檢測結(jié)果顯示,順鉑和碘伏兩單藥分別作用胃癌細(xì)胞48 h后上清液IL-8的表達(dá)量為274.54 pg/ml、190.92 pg/ml、115.20 pg/ml、293.48 pg/ml,較同步進(jìn)行對照組的331.34 pg/ml明顯降低(P0.05)。聯(lián)合用藥組表達(dá)水平更低為138.72pg/ml,與對照組及兩藥單獨(dú)作用相比,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性意義(P0.05)。結(jié)論:1、順鉑、碘伏單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用均可以抑制胃癌細(xì)胞的體外生長增殖,其作用隨藥物濃度的增大及作用時(shí)間的延長抑制效果越明顯。2、順鉑、碘伏單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用均可以下調(diào)細(xì)胞因子IL-8的表達(dá),作用機(jī)制可能與藥物抑制細(xì)胞的增殖有關(guān)。3、順鉑、碘伏單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用均可以誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞SGC-7901凋亡,作用機(jī)制可能與上調(diào)胃癌細(xì)胞SGC-7901內(nèi)Caspase-3蛋白的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：延安大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2

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本文編號：1265020