本文關(guān)鍵詞：p,p’-DDE對(duì)大腸癌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究

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【摘要】：p,p'-DDE(p,p'-Dichlorodiphenyldichloroethylene),是一種持續(xù)性存在在環(huán)境中的有機(jī)污染物。p,p'-DDE是DDT在體內(nèi)最主要的代謝產(chǎn)物,在體內(nèi)的積累較高。大腸癌是常見(jiàn)危害人類健康的惡性腫瘤,根據(jù)發(fā)生部位的不同,可分為結(jié)腸癌和直腸癌。相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)p,p'-DDE可能與大腸癌的發(fā)病有關(guān),但其具體作用機(jī)制并不清楚。本研究旨在從氧化應(yīng)激、Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信號(hào)通路,探究p,p'-DDE促人大腸癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制,從而為評(píng)價(jià)p,p'-DDE與大腸癌發(fā)生、發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性提供理論依據(jù)。研究?jī)?nèi)容包括以下幾部分：第一部分：用10-12～10-4Mp,p'-DDE分別處理大腸癌DLDl和SW620細(xì)胞96 h后,采用MTT法和細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)大腸細(xì)胞的存活和增殖情況。結(jié)果表明,10-12～10-7Mp,p'-DDE處理DLDl和SW620細(xì)胞96h后,明顯促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的增殖。其中,在p,p'-DDE濃度為10-9M時(shí),細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用最強(qiáng)。利用10-10,10-9和10-8Mp,p'-DDE處理DLDl和SW620細(xì)胞96 h,Westem印跡和熒光定量PCR法,檢鋇p,p'-DDE對(duì)大腸癌細(xì)胞中Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信號(hào)通路的影響。結(jié)果顯示p,p'-DDE處理細(xì)胞后導(dǎo)致Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信號(hào)通路的激活。進(jìn)一步利用RNA干擾技術(shù)分別敲減β-catenin和Gli1從而抑制Wnt/β-catenin和 Hedgehog/Gli1信號(hào)通路,然后檢測(cè)p,p'-DDE對(duì)大腸癌細(xì)胞存活和增殖的影響。結(jié)果表明β-catenin或Gli1敲減,導(dǎo)致其下游的c-Myc和cyclinD1的表達(dá)水平降低,同時(shí)也明顯抑制由p.p'-DDE所誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖。第二部分：用10-10,10-9和10-8Mp,p'-DDE處理D LD1和SW620細(xì)胞96 h后,分別檢測(cè)p,p'-DDE對(duì)大腸癌細(xì)胞氧化應(yīng)激水平的影響。結(jié)果表明p,p'-DDE暴露提高ROS水平,降低SOD活性、GSH的含量和CAT的活性。NADPH氧化酶參與調(diào)節(jié)p,p'-DDE誘導(dǎo)的活性氧(ROS)的產(chǎn)生。進(jìn)一步利用氧化應(yīng)激抑制劑處理,檢測(cè)氧化應(yīng)激在p,p'-D DE誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖中的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗氧化劑處理抑制了p,p'-DDE誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖。第三部分：利用抗氧化試劑處理細(xì)胞抑制P,P’-DDE誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激后,用Western印跡法和熒光定量PCR法檢測(cè)其對(duì)p,p'-DDE誘導(dǎo)的Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信號(hào)通路的影響。結(jié)果顯示,抗氧化劑處理后抑制了由p,p'-DDE誘導(dǎo)的Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1訂信號(hào)通路激活。綜上所述,p,p'-DDE通過(guò)氧化應(yīng)激介導(dǎo)的Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信號(hào)通路的激活促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的增殖。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.34

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 魏峰;董元華;;DDT引發(fā)的爭(zhēng)論及啟示[J];土壤;2011年05期

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本文編號(hào)：1262644