LncRNA-HOTAIR對大腸癌CCL244細胞增殖侵襲及輻射敏感性的影響
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【摘要】:目的:探究長鏈非編碼RNA HOTAIR對大腸癌CCL244細胞增殖侵襲及輻射敏感性的影響。方法:應(yīng)用實時熒光定量PCR方法檢測53例大腸癌腫瘤組織、53例對應(yīng)癌旁正常組織、四株大腸癌細胞(HCT116、CCL244、SW480、DLD-1)及正常腸粘膜細胞(FHC)中HOTAIR的相對表達量。通過瞬時轉(zhuǎn)染將化學(xué)合成的人HOTAIR siRNA及陰性對照轉(zhuǎn)染至大腸癌細胞CCL244中,實時熒光定量PCR驗證下調(diào)效果。MTT法、克隆形成實驗及細胞周期實驗檢測下調(diào)HOTAIR對細胞增殖的影響。細胞劃痕實驗及Transwell小室侵襲實驗檢測下調(diào)HOTAIR對細胞侵襲遷移的影響。克隆形成聯(lián)合輻照檢測下調(diào)HOTAIR對細胞輻射敏感性的影響。流式細胞術(shù)檢測下調(diào)HOTAIR對輻射誘導(dǎo)的細胞凋亡的影響。Western blot檢測下調(diào)HOTAIR對細胞凋亡及遷移相關(guān)蛋白表達的影響。結(jié)果:相較于53例對應(yīng)癌旁正常組織及正常腸粘膜細胞,在53例腫瘤組織及四株腫瘤細胞中HOTAIR高表達。瞬時轉(zhuǎn)染siRNA顯著降低CCL244細胞中HOTAIR表達量。下調(diào)HOTAIR抑制CCL244細胞生長增殖,抑制CCL244細胞侵襲遷移,促進輻射誘導(dǎo)的CCL244細胞凋亡,增強CCL244細胞的輻射敏感性,抑制遷移相關(guān)蛋白MMP2、MMP9的表達,抑制抗凋亡基因Bax的蛋白表達而促進促凋亡基因Bcl-2的蛋白表達。結(jié)論:HOTAIR在大腸癌腫瘤組織及細胞中高表達,下調(diào)HOTAIR可抑制大腸癌CCL244細胞的增殖侵襲并促進細胞的凋亡及輻射敏感性。
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.34
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,本文編號:1253294
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