敲低PES1基因抑制舌癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:在Tca8113、SCC6、SCC15三種舌癌細(xì)胞中構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)PES1 sh RNA的穩(wěn)定細(xì)胞系,研究敲低PES1基因?qū)ι喟┘?xì)胞生長(zhǎng)的影響,并進(jìn)一步研究PES1基因?qū)ι喟┘?xì)胞周期的調(diào)控以及對(duì)舌癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力的影響。方法:利用病毒包裝質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞以獲得敲低PES1基因的病毒,將該病毒感染舌癌細(xì)胞并篩選能夠穩(wěn)定表達(dá)敲低PES1基因的舌癌細(xì)胞的穩(wěn)定克隆,利用Western Blot印記法檢測(cè)PES1蛋白的表達(dá)水平;細(xì)胞生長(zhǎng)曲線檢測(cè)PES1基因?qū)ι喟┘?xì)胞生長(zhǎng)的影響;細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PES1基因?qū)ι喟┘?xì)胞周期的影響;細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PES1基因?qū)ι喟┘?xì)胞遷移能力的影響;transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PES1基因?qū)ι喟┘?xì)胞侵襲能力的影響。結(jié)果:(1)本實(shí)驗(yàn)成功獲得穩(wěn)定表達(dá)PES1 sh RNA基因的舌癌細(xì)胞系;(2)敲低PES1基因后的舌癌細(xì)胞生長(zhǎng)速度低于對(duì)照組(P0.05);(3)敲低PES1基因,能夠使舌癌細(xì)胞的生長(zhǎng)周期阻滯在G1期,并抑制cyclin D1在舌癌細(xì)胞中的表達(dá)水平;(4)敲低PES1基因的舌癌細(xì)胞的遷移速度低于對(duì)照組;(5)敲低PES1基因的舌癌細(xì)胞的侵襲速度低于對(duì)照組。結(jié)論:在舌癌細(xì)胞系中敲低PES1基因,能夠抑制舌癌細(xì)胞的生長(zhǎng),使舌癌細(xì)胞周期阻滯在G1期,并且抑制cyclin D1的表達(dá);敲低PES1基因能夠抑制舌癌細(xì)胞的遷移及侵襲能力,PES1可能成為舌癌基因治療的靶標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.8
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1233255
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