本文關鍵詞：PSMA在肝細胞性肝癌中的作用機制研究

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【摘要】：研究目的：前列腺特異性膜抗原(PSMA)是一種前列腺上皮細胞Ⅱ型跨膜糖蛋白,高度表達于前列腺上皮。既往研究表明,PSMA高度表達于前列腺癌、胰腺癌、腎癌、乳腺癌、胃腸道腺癌等。本研究初步研究PSMA在肝細胞性肝癌組織及正常肝組織中的表達情況,研究PSMA在肝細胞性肝癌組織血管及肝正常組織血管中的表達情況,并分析其相關性；進一步統計分析PSMA在肝癌組織及腫瘤血管中的表達情況與各臨床參數間的關系(如患者的年齡、性別、腫瘤大小、臨床分期及AFP數值等)。在此基礎上進一步選取肝細胞性肝癌細胞系HepG2為研究對象,細胞功能學實驗研究PSMA在肝細胞性肝癌惡性增殖中的作用。研究方法：1.選取云南省腫瘤醫(yī)院病理標本庫2011-2014年肝細胞性肝癌石蠟標本76例,昆明醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院2011-2014年正常肝組織石蠟標本40例。標本使用ABCAM公司的PSMA抗體進行免疫組化檢測,并統計分析其與臨床病理參數的關系。2.復蘇并培養(yǎng)肝癌細胞系HepG2和肝正常系QSG-7701, Western blotting檢測兩株細胞中PSMA基礎表達情況。3. 以HepG2細胞系作為研究對象,siRNA轉染HepG2細胞系,敲除HepG2中的內源性PSMA, Western blotting驗證敲減后PSMA的蛋白表達水平。4.敲減HepG2細胞內源性PSMA,采用MTS法檢測肝癌細胞的增殖,細胞計數繪制生長曲線,流式細胞術檢測細胞周期變化情況,以研究PSMA與肝癌細胞系HepG2惡性增殖的關系。研究結果：1.免疫組化結果統計顯示：PSMA在肝細胞性肝癌石蠟標本組織中肝癌細胞的陽性表達率為93.4%(71/76),在肝正常組織肝細胞中僅為20%(8/40),兩者表達存在顯著差異(P0.01)；且PSMA在肝細胞性肝癌組織血管中的陽性表達率為67.1%(51/76),在肝正常組織血管中的陽性表達率為5%(2/40),兩者表達存在顯著差異(P0.01);PSMA在肝細胞性肝癌肝癌細胞及肝癌血管中共表達率為61.8%(47/76),但在肝細胞性肝癌組織肝癌細胞和血管中的表達無統計學意義。進一步與臨床病理參數統計分析,PSMA與肝細胞性肝癌患者的年齡、性別、組織分化程度及分期均無統計學意義,但與患者AFP (400U/ML,400U/ML)及HbsAb水平之間存在差異(P0.05)。2. Western blotting結果顯示：PSMA在人肝細胞性肝癌細胞系HepG2中高表達；3. PSMA-siRNA轉染HepG2細胞系后,Western blotting檢測結果顯示肝細胞性肝癌細胞系HepG2中內源性PSMA的表達被抑制；4.阻斷內源性PSMA表達后,MTT細胞增殖實驗及細胞計數生長曲線結果顯示HepG2細胞增殖能力被抑制(P0.05)；流式細胞術檢測周期結果顯示阻斷內源性PSMA表達后,肝癌細胞出現了G0/G1期阻滯(P0.05)。結論：PSMA的異常表達可能與HCC的惡性增殖密切相關。
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

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