發(fā)布時(shí)間：2017-11-24 08:35

  本文關(guān)鍵詞：順鉑聯(lián)合環(huán)靶明對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖和凋亡的影響

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【摘要】：目的:研究順鉑(cisplatin)聯(lián)合Hedgehog通路特異性阻斷藥物環(huán)靶明(cyclopamine)對(duì)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞系增殖和凋亡的影響。方法:骨肉瘤MG-63細(xì)胞株在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行細(xì)胞傳代,細(xì)胞培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分組:空白組(骨肉瘤MG-63細(xì)胞,含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液),對(duì)照組(骨肉瘤MG-63細(xì)胞,含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,等體積的無(wú)水乙醇),環(huán)靶明組(骨肉瘤MG-63細(xì)胞,含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,2.5/5/10/20μmol/L環(huán)靶明),順鉑聯(lián)合環(huán)靶明組(骨肉瘤MG-63細(xì)胞,含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,10μmol/L環(huán)靶明,2/4/8μmol/L順鉑)。MTT法檢測(cè)藥物對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的抑制作用,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,q RT-PCR檢測(cè)環(huán)靶明處理前后骨肉瘤MG-63細(xì)胞中Gli1、PTCH1 m RNA的表達(dá)量的變化。結(jié)果:(1)MTT法檢測(cè)不同濃度環(huán)靶明對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:環(huán)靶明對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞有明顯的抑制增殖的作用(p0.01),并有一定的濃度依賴性,其中在5~20μmol/l處抑制明顯。10μmol/l環(huán)靶明作用MG-63細(xì)胞觀察細(xì)胞生長(zhǎng),結(jié)果表明,隨著環(huán)靶明作用時(shí)間的延長(zhǎng),MG-63細(xì)胞的增殖能力明顯下降(p0.01),呈時(shí)間依賴性。順鉑聯(lián)合環(huán)靶明組,隨著順鉑濃度的增加,骨肉瘤細(xì)胞增殖抑制率升高(p0.05)。(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:經(jīng)5、10、20μmol/l的環(huán)靶明處理48h后,骨肉瘤MG-63細(xì)胞的凋亡率逐漸增高,明顯高于對(duì)照組(p0.01),順鉑聯(lián)合環(huán)靶明組骨肉瘤MG-63細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組及單純環(huán)靶明組(p0.05)。(3)q RT-PCR結(jié)果顯示:骨肉瘤MG-63細(xì)胞中Gli1、PTCH1均有表達(dá),并且在環(huán)靶明濃度5μmol/l和10μmol/l組中Gli1和PTCH1的m RNA表達(dá)均有下調(diào)。結(jié)論:Hedgehog通路特異性阻斷藥物環(huán)靶明能夠抑制骨肉瘤MG-63細(xì)胞的增殖,促進(jìn)其凋亡,順鉑聯(lián)合環(huán)靶明能夠更加有效的抑制骨肉瘤MG-63細(xì)胞的增殖,促進(jìn)其凋亡。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R738.1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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本文編號(hào)：1221671