本文關(guān)鍵詞：miR-363-3p對人胃癌細胞生物學(xué)行為影響的研究

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【摘要】：目的研究miR-363-3p對人胃癌細胞SGC-7901,MKN-45,MGC-803細胞的增殖、凋亡、侵襲和遷移的調(diào)控作用。方法通過慢病毒載體將帶有熒光標記物的化學(xué)合成的miR-363-3p序列和其反義序列轉(zhuǎn)染入人胃癌細胞SGC-7901,MKN-45,MGC-803,使用熒光倒置鏡觀察細胞內(nèi)熒光的數(shù)量,同時應(yīng)用實時熒光定量PCR(RT-PCR)技術(shù)檢測上調(diào)或下調(diào)組與相應(yīng)陰性對照中miR-363-3p的表達水平。使用CCK-8實驗檢測miR-363-3p對3株胃癌細胞增殖的影響,用細胞流式技術(shù)實驗檢測miR-363-3p對3株胃癌細胞凋亡和周期的影響,用劃痕實驗、transwell實驗檢測miR-363-3p對3株胃癌細胞侵襲、遷移能力的影響。結(jié)果①慢病毒穩(wěn)定干擾SGC-7901、MGC-803和MKN-45細胞后miR-363-3p表達量相對于陰性對照組分別下調(diào)了0.62,0.68,0.63倍(p值均0.05),而過表達SGC-7901、MGC-803和MKN-45細胞后miR-363-3p表達量相對于陰性對照組分別上調(diào)了58.2,78.6,84.2倍(p值均0.05)。②CCK-8實驗和細胞流式實驗結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后miR-363-3p上調(diào)轉(zhuǎn)染組各株胃癌細胞增殖活性、凋亡率以及細胞周期與相應(yīng)陰性對照組相比并無明顯差異(p0.05);轉(zhuǎn)染后miR-363-3p下調(diào)轉(zhuǎn)染組各株胃癌細胞增殖活性、凋亡率以及細胞周期與相應(yīng)陰性對照組相比并無明顯差異(p0.05)③劃痕實驗結(jié)果顯示劃痕后miR-363-3p下調(diào)組在同一時間愈合程度與其陰性對照組有明顯的差異(p0.05),mi R-363-3p下調(diào)組愈合程度強于其陰性對照組,尤其在48h時兩組愈合程度差異最明顯;同時發(fā)現(xiàn)miR-363-3p上調(diào)組在同一時間愈合程度與其陰性對照組也有明顯的差異(p0.05),miR-363-3p上調(diào)組愈合程度低于其陰性對照組,尤其在48h時兩組愈合程度差異最明顯。④transwell遷移和侵襲實驗結(jié)果顯示miR-363-3p下調(diào)組在48h時穿過小室的細胞數(shù)目與其陰性對照組穿過小室的細胞數(shù)目有明顯的差異(p0.05),miR-363-3p下調(diào)組穿過小室的細胞數(shù)目明顯多于其陰性對照組;同時發(fā)現(xiàn)miR-363-3p上調(diào)組在48h時穿過小室的細胞數(shù)目與其陰性對照組穿過小室的細胞數(shù)目有明顯的差異(p0.05),mi R-363-3p上調(diào)組穿過小室的細胞數(shù)目少于其陰性對照組穿過小室的細胞數(shù)目。結(jié)論miR-363-3p可能作為癌基因參與了胃癌的侵襲和遷移過程。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2

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本文編號：1216274