WNT5B過表達(dá)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖及凋亡的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-11-22 05:10
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【摘要】:目的:本文旨在將WNT5B的過表達(dá)載體pcDNA3.1/WNT5B和空白對(duì)照載體pcDNA3.1分別同時(shí)轉(zhuǎn)染人乳腺癌細(xì)胞MCF-7,通過Real-time PCR、Western blot、CKK8檢測(cè)、流式細(xì)胞術(shù)等方法,分別在mRNA水平、蛋白水平、細(xì)胞的增殖、凋亡能力、周期分布情況等方面進(jìn)行驗(yàn)證。得到WNT5B在人正常乳腺上皮細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況,及過表達(dá)WNT5B后對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖及凋亡的影響。探討WNT5B在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用,并為乳腺癌靶向藥物治療提供新的研究思路。方法:將細(xì)胞分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,采用CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)來檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞的增殖、凋亡能力及周期分布情況;采用Real-time PCR法檢測(cè)WNT5B mRNA表達(dá)水平;Western blot法檢測(cè)WNT5B蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:與正常乳腺上皮細(xì)胞相比,WNT5B在乳腺癌細(xì)胞中低表達(dá);在乳腺癌細(xì)胞MCF-7中轉(zhuǎn)染W(wǎng)NT5B表達(dá)質(zhì)粒后,WNT5B表達(dá)上調(diào),差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與對(duì)照組相比,過表達(dá)WNT5B后,過表達(dá)WNT5B的MCF7細(xì)胞生長明顯慢于對(duì)照組細(xì)胞,表明細(xì)胞生長受到抑制,故MCF7細(xì)胞中WNT5B過表達(dá),對(duì)細(xì)胞增殖具有抑制作用。且處于S期細(xì)胞的量明顯增加,G1、G2/M期細(xì)胞的量明顯減少,細(xì)胞凋亡比例明顯增加,與對(duì)照組有明顯差異,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:WNT5B在乳腺癌細(xì)胞中低表達(dá);WNT5B過表達(dá)可使人乳腺癌細(xì)胞MCF-7阻滯在S期,抑制MCF-7的增殖,促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.9
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
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,本文編號(hào):1213572
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