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CD44v6、Vimentin與紫杉醇、多柔比星治療后三陰性乳腺癌細(xì)胞系化療敏感性變化的關(guān)系研究

發(fā)布時(shí)間:2017-11-21 23:00

  本文關(guān)鍵詞:CD44v6、Vimentin與紫杉醇、多柔比星治療后三陰性乳腺癌細(xì)胞系化療敏感性變化的關(guān)系研究


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【摘要】:背景:乳腺癌是女性惡性腫瘤中發(fā)生率最高、死亡率最高的癌癥之一。三陰性乳腺癌(Triple-negative breast cancer,TNBC)是乳腺癌中的一個(gè)臨床預(yù)后很差、高異質(zhì)性的特殊亞型。細(xì)胞毒性化療是目前唯一有效的治療選擇。然而,盡管最初的化療具有很高的敏感性,TNBC患者出現(xiàn)藥物敏感性降低,進(jìn)而發(fā)生復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移仍然是TNBC最終治療失敗的主要原因。因此,了解其具體的耐藥機(jī)制,降低化療的耐藥率是我們急需解決的問題。目的:本研究以三陰性乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231為研究對(duì)象,比較PTX、ADM單獨(dú)處理乳腺癌細(xì)胞后,腫瘤細(xì)胞干性、EMT標(biāo)志物以及乳腺癌細(xì)胞對(duì)化療敏感性的變化。分析細(xì)胞出現(xiàn)化療藥物敏感性降低的原因和可能機(jī)制,并尋找有價(jià)值的分子治療靶點(diǎn)。方法:采用CCK-8法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇(Paclitaxel,PTX)、多柔比星(Doxorubicin,ADM)藥物的敏感性,計(jì)算IC50值;采用Western blotting檢測(cè)化療藥物處理細(xì)胞后CD44v6和Vimentin的蛋白表達(dá)情況。采用球體形成實(shí)驗(yàn)比較藥物處理后細(xì)胞球體形成能力的差異,并使用顯微鏡觀察球體形態(tài)學(xué)上的差異。所有的數(shù)據(jù)均使用GraphPad Prism 6.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果:采用不同濃度梯度的PTX和ADM作用細(xì)胞后,MDA-MB-231細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的生長(zhǎng)抑制,呈劑量依賴性表現(xiàn),細(xì)胞對(duì)不同的藥物也產(chǎn)生了不同的反應(yīng)。此外,相應(yīng)藥物濃度對(duì)初次處理后存活下來(lái)的細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用均較初次減弱,其IC50值相應(yīng)增高。用Western blotting的方法檢測(cè)PTX和ADM單藥處理細(xì)胞后CD44v6與Vimentin蛋白的表達(dá),結(jié)果提示化療藥物作用乳腺癌細(xì)胞后引起CD44v6與Vimentin蛋白的表達(dá)均顯著升高。球體形成實(shí)驗(yàn)中PTX組、ADM組比對(duì)照組的成球能力明顯增強(qiáng),然而PTX組與ADM組并無(wú)明顯差異。球體形態(tài)上,與PTX組、ADM組相比,對(duì)照組形成的球體普遍較小,細(xì)胞連接更為疏松。結(jié)論:1.PTX、ADM藥物處理三陰性乳腺癌細(xì)胞系后可引起其腫瘤干細(xì)胞及EMT標(biāo)記蛋白的表達(dá)增高,隨之腫瘤細(xì)胞的化療敏感性降低。這可能是導(dǎo)致PTX、ADM藥物處理三陰性乳腺癌細(xì)胞系后其對(duì)化療耐受性增加的原因。2.PTX、ADM藥物具有富集三陰性乳腺癌干細(xì)胞的作用,PTX、ADM藥物處理后存活細(xì)胞的干細(xì)胞性增強(qiáng),可能是三陰性乳腺癌化學(xué)治療失敗的原因。3.CD44v6、Vimentin非常有潛力作為三陰性乳腺癌更加有效的治療靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.9

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本文編號(hào):1212560


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