發(fā)布時間：2017-11-17 13:10

  本文關鍵詞：噻嗎洛爾對多發(fā)性骨髓瘤細胞RPMI 8226增殖的影響及機制探討

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【摘要】：目的:本研究旨在探討噻嗎洛爾對人多發(fā)性骨髓瘤細胞RPMI 8226增殖與凋亡的影響,并探索其可能作用的分子機制,從而為多發(fā)性骨髓瘤的臨床治療提供實驗依據。方法:培養(yǎng)人多發(fā)性骨髓瘤細胞株RPMI 8226,在培養(yǎng)的細胞中加入不同濃度噻嗎洛爾,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法檢測噻嗎洛爾對人多發(fā)性骨髓瘤細胞的抑制率并篩選研究濃度用于后續(xù)實驗;采用流式細胞術檢測不同濃度噻嗎洛爾誘導骨髓瘤細胞的凋亡情況;同時利用qRT-PCR和蛋白印跡技術分別檢測噻嗎洛爾作用后RPMI 8226細胞中caspase-3、caspase-9、Bax和Bcl-2基因在mRNA和蛋白水平的表達情況,并對檢測結果進行統計學分析。結果:MTT顯示,噻嗎洛爾作用RPMI 8226細胞后,該細胞活力呈抑制效應,且在相同藥物作用時間前提下,抑制率隨藥物濃度的升高而增加,具有明顯的濃度依賴性(r=0.548,P=0.019);同時,在相同藥物濃度作用前提下,抑制率隨藥物作用時間的延長而升高,具有明顯的時間依賴性(r=0.659,P=0.003);綜上,噻嗎洛爾對RPMI 8226細胞呈抑制作用,且抑制率呈濃度—時間依賴性。流式細胞術顯示,噻嗎洛爾作用RPMI 8226細胞72h后,2.5μmol/L、20μmol/L、50μmol/L噻嗎洛爾作用組細胞凋亡率分別為(7.17±0.06)%、(10.56±0.65)%、(15.27±0.86)%,與對照組(3.93±0.25)%相比均明顯升高(P0.01),差異具有統計學意義,且細胞凋亡率隨藥物作用濃度增加而升高,具有濃度依賴性(r=0.953,P=0.047)。qRT-PCR示,噻嗎洛爾作用RPMI 8226細胞72h后能夠顯著上調Bax、caspase-3、caspase-9的mRNA表達,顯著下調Bcl-2的mRNA表達(P0.05)。Western Blot結果顯示,與對照組相比20μmol/L噻嗎洛爾作用于RPMI 8226細胞72h后,Bax蛋白表達水平顯著升高(P0.05),差異具有統計學意義,Bcl-2蛋白表達水平明顯下降;而caspase-3、caspase-9的蛋白表達水平與對照組相比則未見明顯變化。結論:噻嗎洛爾對多發(fā)性骨髓瘤RPMI 8226細胞具有增殖抑制及凋亡誘導作用,并且其作用機制可能是通過上調Bax表達、下調Bcl-2表達從而誘導細胞凋亡實現。
【學位授予單位】：貴州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R733.3

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本文編號：1196124