發(fā)布時(shí)間：2017-11-16 17:27

  本文關(guān)鍵詞：DNA甲基化調(diào)控TRAIL受體基因的表達(dá)及滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)凋亡的敏感性

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【摘要】：本研究探討了DR4、DR5、DcRl和DcR2四種TRAIL受體在三種絨毛膜癌細(xì)胞系(JAR、JEG-3、BeWo)和兩種滋養(yǎng)層細(xì)胞系(HTR-8/SVneo、HPT-8)中的DNA甲基化水平和基因表達(dá)的關(guān)系。通過對(duì)四種TRAIL受體的mRNA檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),DR4在JAR、JEG-3、BeWo和HTR-8/SVneo這四種細(xì)胞中均無表達(dá),僅在HPT-8中表達(dá),而DR5在以上五中細(xì)胞中都有表達(dá)。DcRl在JAR、JEG-3和BeWo中有表達(dá),而DcR2的表達(dá)則是出現(xiàn)于HTR-8/SVneo和HPT-8細(xì)胞中。通過對(duì)這四種TRAIL受體DNA啟動(dòng)子區(qū)甲基化的測(cè)序結(jié)果顯示,JAR、JEG-3、 BeWo、HTR-8/SVneo這四種細(xì)胞中DR4的啟動(dòng)子區(qū)處去超甲基化狀態(tài)；DcRl啟動(dòng)子區(qū)在HTR-8/SVneo和HPT-8中被檢測(cè)到是超甲基化的,同時(shí)DcR2的啟動(dòng)子區(qū)在JAR、JEG-3和BeWo中也被發(fā)現(xiàn)是處于超甲基化狀態(tài)。接著,我們?cè)谶@幾種滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)中使用DNA去甲基化藥物5-aza,通過降低DR4, DcR1和DcR2基因的甲基化水平后觀察到這些基因均恢復(fù)了表達(dá),而DR5的表達(dá)沒有發(fā)生改變,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示這幾種受體基因的表達(dá)和DNA甲基化水平呈明顯的負(fù)相關(guān)性。在進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)中,我們分析了所研究的五種細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)凋亡的敏感性,發(fā)現(xiàn)在正常狀態(tài)下只有HPT-8表現(xiàn)出對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的凋亡的高敏感性。而在對(duì)細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用5-aza-CdR后再檢測(cè)各自對(duì)TRAIL的敏感性發(fā)現(xiàn),JAR, JEG-3, BeWo和HTR-8/SVneo細(xì)胞對(duì)凋亡的反應(yīng)均較正常狀態(tài)下增強(qiáng),而在HPT-8中這種效應(yīng)并沒有顯著改變。我們的這些結(jié)果說明了滋養(yǎng)細(xì)胞中不同TRAIL受體基因的表達(dá)受到DNA甲基化的調(diào)控,而正是由于TRAIL受體在不同細(xì)胞中的差異表達(dá)導(dǎo)致了不同細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)凋亡的敏感性不同。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R730.2

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本文編號(hào)：1193152