本文關(guān)鍵詞：聯(lián)合調(diào)節(jié)CDH1和KSP基因表達(dá)抑制肺癌A549細(xì)胞的增殖和侵襲

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【摘要】：目的:探討聯(lián)合下調(diào)紡錘體驅(qū)動(dòng)蛋白基因(KSP)和上調(diào)CDH1基因的表達(dá)對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖和侵襲的影響。方法:通過轉(zhuǎn)染試劑,將靶向KSP基因的si RNA和靶向CDH1基因啟動(dòng)子的sa RNA轉(zhuǎn)染到A549細(xì)胞中。按照轉(zhuǎn)染混合物的不同和對(duì)比對(duì)照組將細(xì)胞劃分為五組,分別是A組、B組、C組、D組和E組。MTT法檢測細(xì)胞增殖能力。熒光定量PCR法檢測KSP和CDH1基因m RNA的表達(dá)變化情況。通過免疫印跡(Western Blot)法檢測細(xì)胞內(nèi)KSP和E-鈣黏蛋白的表達(dá)情況,通過Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)進(jìn)行A549細(xì)胞侵襲能力的檢測。結(jié)果:si RNA和sa RNA處理A549細(xì)胞后,細(xì)胞增殖能力和穿過基底膜的A549細(xì)胞個(gè)數(shù)顯著減少(p0.05),熒光定量PCR結(jié)果顯示,si RNA顯著下調(diào)KSP的m RNA的表達(dá)(p0.05);sa RNA顯著上調(diào)CDH1基因m RNA的表達(dá)(p0.05)。蛋白質(zhì)免疫印跡檢測結(jié)果顯示,KSP蛋白表達(dá)量顯著降低(p0.05);E-鈣黏蛋白的表達(dá)量顯著升高(p0.05)。并且聯(lián)合轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞的增殖和侵襲的抑制效果更明顯(p0.05)。結(jié)論:si RNA能夠顯著下調(diào)KSP基因的表達(dá),sa RNA能夠顯著的上調(diào)CDH1基因的表達(dá);而si RNA和sa RNA聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的效果明顯優(yōu)于si RNA或sa RNA單基因調(diào)控的效果,這也表明KSP和CDH1兩種基因可能在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中存在聯(lián)系。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2

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本文編號(hào)：1182090