本文關(guān)鍵詞：T-bet和Eomes在射頻消融激活的抗腫瘤免疫應(yīng)答中的作用

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【摘要】：目的探討轉(zhuǎn)錄因子T-bet(T-box expressed in T cells)和Eomes(Eomesodermin)在射頻消融(Radiofrequency ablation,RFA)激發(fā)的抗腫瘤免疫應(yīng)答中的作用。方法在C57BL/6小鼠雙側(cè)背部對(duì)稱(chēng)的種植B16黑色素瘤細(xì)胞株,對(duì)右側(cè)腫瘤進(jìn)行RFA治療,3天后取右側(cè)腫瘤組織行免疫組織化學(xué)染色觀(guān)察分析;流式細(xì)胞術(shù)分析左側(cè)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞亞群比例與數(shù)量;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)檢測(cè)細(xì)胞因子及轉(zhuǎn)錄因子的m RNA表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T-bet和Eomes在T細(xì)胞與自然殺傷細(xì)胞(Natural killer cell NK細(xì)胞)中的表達(dá);其后分別建立T-bet-/-(TKO)、Eomes-/-(EKO)與野生型C57BL/6小鼠RFA治療模型,比較各組小鼠左側(cè)腫瘤生長(zhǎng)曲線(xiàn)與小鼠生存時(shí)間。結(jié)果RFA治療抑制消融區(qū)外腫瘤生長(zhǎng),治療組小鼠腫瘤生長(zhǎng)較對(duì)照組慢,小鼠生存時(shí)間較對(duì)照組延長(zhǎng);RFA治療組小鼠左側(cè)腫瘤內(nèi)CD45+免疫細(xì)胞總數(shù),以及CD4+、CD8+、NK 與 CD4+Fox P3-細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)量顯著增加,CD4+Fox P3+數(shù)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;RFA組白細(xì)胞介素2(Interleukin-2 IL-2)、干擾素-γ(Interferon-γIFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-αTNF-α)等細(xì)胞因子以及轉(zhuǎn)錄因子T-bet、Eomes m RNA表達(dá)水平上調(diào);RFA組腫瘤浸潤(rùn)與脾臟T細(xì)胞、NK細(xì)胞中T-bet和Eomes表達(dá)水平上調(diào);對(duì)右側(cè)腫瘤進(jìn)行RFA治療能抑制左側(cè)腫瘤生長(zhǎng)并延長(zhǎng)小鼠生存時(shí)間,T-bet與Eomes基因敲除顯著減弱RFA激發(fā)的抗腫瘤免疫效應(yīng)。結(jié)論轉(zhuǎn)錄因子T-bet和Eomes在RFA治療激發(fā)的Th1型抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R730.5

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本文編號(hào)：1173307