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共培養(yǎng)系統(tǒng)中血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)乳腺癌細(xì)胞影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-11-11 21:29

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【摘要】:腫瘤組織的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間存在一系列的相互作用。腫瘤細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)的研究焦點(diǎn)在于腫瘤細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞血管生成過(guò)程中的作用,很少有研究關(guān)注內(nèi)皮細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用過(guò)程中,內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞惡性的影響,而且大部分的相互作用研究停留在二維培養(yǎng)水平。共培養(yǎng)體系的構(gòu)建需要考慮多種因素,為了構(gòu)建適合于乳腺癌細(xì)胞4T1和血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVECs共培養(yǎng)的系統(tǒng),本研究利用海藻酸鈉、明膠、殼聚糖、透明質(zhì)酸等生物材料制備水凝膠,用于包裹4T1和HUVECs。從細(xì)胞來(lái)源、細(xì)胞比例及總數(shù)、生存環(huán)境、相互作用方式等方面設(shè)置不同的共培養(yǎng)組,從腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)情況進(jìn)行分析,在三維環(huán)境中構(gòu)建了適合4T1與HUVECs相互作用的共培養(yǎng)體系。本研究主要對(duì)與HUVECs共培養(yǎng)后的4T1基質(zhì)金屬蛋白酶MMP9,多藥耐藥蛋白MDR1,乳腺癌干細(xì)胞標(biāo)志物CD44和CD24蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)共培養(yǎng)后的4T1細(xì)胞的MMP9、MDR1、CD44的表達(dá)量升高,而CD24的表達(dá)降低。相關(guān)mRNA的表達(dá)結(jié)果與蛋白檢測(cè)結(jié)果一致,證明與HUVECs共培養(yǎng)促進(jìn)4T1惡性相關(guān)分子標(biāo)志物的表達(dá)。利用共培養(yǎng)系統(tǒng)將HUVECs與乳腺癌干細(xì)胞4T1-CSC共培養(yǎng),免疫熒光檢測(cè)MMP9、MDR1、CD44和CD24蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)MMP9、MDR1、CD44、CD24、,乳腺癌干細(xì)胞標(biāo)志物Sca1、干細(xì)胞分子標(biāo)志物Nestin、Tert、Nanong和Sox2的m RNA的表達(dá),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明共培養(yǎng)后的4T1-CSC惡性相關(guān)標(biāo)志物及干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物表達(dá)上調(diào)。與HUVECs共培養(yǎng)促進(jìn)4T1及4T1-CSC的惡性相關(guān)標(biāo)志物表達(dá),說(shuō)明HUVECs對(duì)腫瘤細(xì)胞的促進(jìn)支持作用,這可能可以作為腫瘤治療的靶點(diǎn),為腫瘤治療的研究提供研究思路。
【學(xué)位授予單位】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R737.9

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 繆黃泰;聶紹平;;去分化用于細(xì)胞治療的前景與展望[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2014年02期

5 項(xiàng)峰;任利萍;劉克勤;王曉云;張凡;陳江平;舒麗莎;;子宮頸癌腫瘤干細(xì)胞篩選及體外敏感藥物試驗(yàn)的臨床對(duì)比研究[J];河北醫(yī)藥;2014年02期

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8 張百紅;岳紅云;;腫瘤生長(zhǎng)的信號(hào)[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2014年01期

9 劉秋華;胡錫琮;;貝伐單抗治療腦膠質(zhì)瘤的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J];實(shí)用癌癥雜志;2014年08期

10 吳兆利;李華棟;楊光;劉懷壘;申忱;鄧一帆;彭飛;高大登;尹飛;趙博賢;趙世光;;腫瘤干細(xì)胞及其模型的研究現(xiàn)狀及臨床治療最新進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年01期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊浪;胃癌干細(xì)胞的分離鑒定及其在胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用與分子機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

2 李三中;Notch信號(hào)途徑在膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 苗凱;小鼠體內(nèi)外胚胎附植前后基因表達(dá)變化的表觀調(diào)控研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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5 饒冠華;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞調(diào)控結(jié)腸癌干細(xì)胞生物學(xué)功能的分子機(jī)制[D];南開(kāi)大學(xué);2013年

6 李三中;Notch信號(hào)途徑在膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 王啟明;基于聚谷氨酸構(gòu)象轉(zhuǎn)變構(gòu)建納米靶向復(fù)合膠束及其抗黑色素瘤研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

8 王海龍;PSMA在肺癌表達(dá)及免疫治療臨床應(yīng)用價(jià)值的初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

9 丁景弦;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用及其相關(guān)機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

10 賈慶安;中藥小復(fù)方“松友飲”通過(guò)下調(diào)分化抑制因子1(ID1)抑制肝癌“干性”提高肝癌對(duì)化療敏感性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 范志豪;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞及奧沙利鉑對(duì)肝癌細(xì)胞株HepG2生長(zhǎng)影響[D];暨南大學(xué);2014年

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本文編號(hào):1172976

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