本文關(guān)鍵詞：5’-Aza-CdR對Raji裸鼠移植瘤的抑制作用及對瘤細(xì)胞CHFR表達(dá)和甲基化的影響

  更多相關(guān)文章： 淋巴瘤 Raji細(xì)胞 CHFR基因 5-氮雜-2’-脫氧胞苷 DNA甲基化

【摘要】：目的 探討5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5’-Aza-Cd R)對人伯基特淋巴瘤Raji裸鼠移植瘤生長的抑制作用,以及對腫瘤組織中CHFR基因表達(dá)和甲基化狀態(tài)的影響。方法 ①采用細(xì)胞接種皮下成瘤的方法,將Raji細(xì)胞懸液以3×107/200ul的活細(xì)胞濃度接種于4-6周齡雄性裸鼠的右側(cè)腋下,共接種18只裸鼠,構(gòu)建荷瘤裸鼠模型。腫瘤短徑大于0.40cm大小時,提示建模成功。②建模成功后,18只裸鼠隨機(jī)分為實驗組和對照組。實驗組荷瘤裸鼠腹腔內(nèi)注射5’-Aza-Cd R(1ug/g),對照組給予腹腔內(nèi)注射等體積的生理鹽水。每2天注射1次,每3天測量腫瘤長短徑,共24天。計算腫瘤體積大小,繪制腫瘤生長曲線。第24天,處死所有裸鼠,解剖移植瘤,比較兩組移植瘤體積大小和重量。③從移植瘤組織中提取DNA,應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)方法(MSP)檢測兩組移植瘤組織CHFR基因甲基化。④從移植瘤組織中提取RNA,應(yīng)用實時熒光定量PCR方法檢測移植瘤組織中CHFR m RNA的表達(dá)情況。結(jié)果 ①Raji細(xì)胞皮下接種1周時,肉眼可觀察到局部小米粒大小的結(jié)節(jié),2周時移植瘤短徑大于0.40cm。此時實驗組移植瘤體積是(44.11±4.01)mm3,對照組移植瘤體積是(47.11±2.71)mm3,兩組體積大小比較,差異無顯著性(p0.05)。②觀察至給藥后第7天,實驗組的移植瘤體積小于對照組,從繪制的移植瘤曲線上也可觀察到兩組移植瘤體積的差異逐漸增大,實驗組中的移植瘤生長緩慢。24天觀察結(jié)束時,實驗組的移植瘤體積為(290.11±23.86)mm3,對照組是(674.56±25.25)mm3,實驗組的移植瘤體積與對照組相比明顯縮小,差異有顯著性(p0.01)。③24天時,實驗組移植瘤重量(762.00±87.87)mg,對照組是(1058.00±104.62)mg,實驗組移植瘤重量與對照組相比明顯減小,差異有顯著性(p0.01),同時計算抑瘤率為27.98%。④實驗組中的甲基化條帶與對照組相比明顯變暗,同時出現(xiàn)非甲基化條帶,對照組中CHFR基因啟動子只有甲基化條帶被擴(kuò)增。⑤與對照組(1.04±0.30)相比,實驗組移植瘤組織中CHFR m RNA的表達(dá)水平(3.69±1.20)明顯升高,差異有顯著性(t=3.94,P=0.001)。結(jié)論 5’-Aza-Cd R可抑制裸鼠人伯基特淋巴瘤的體內(nèi)生長,誘導(dǎo)移植瘤組織CHFR m RNA表達(dá)增加。其機(jī)制可能為5’-Aza-Cd R使甲基化的CHFR啟動子發(fā)生去甲基化,使CHFR基因重新激活而表達(dá)增加,從而發(fā)揮其抑癌基因功能,起到抑制細(xì)胞增殖的作用,為惡性淋巴瘤的去甲基化基因靶向治療提供了理論和實驗依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R73-36

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Ru Liu;Xiao-Huan Zhang;Kun Zhang;Wei Li;Wen-Jun Wang;Di-Xian Luo;Ling Gao;;5-Aza-2'-deoxycytidine inhibits retinoblastoma cell by reactivating epigenetically silenced RASSF1A gene[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2014年01期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張宏亮;5-雜氮-2’-脫氧胞苷干預(yù)在腹腔注射香煙提取物所致小鼠肺氣腫模型中的作用及機(jī)制[D];中南大學(xué);2013年

2 王海琴;DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1在結(jié)直腸癌DNA甲基化中作用機(jī)制的研究[D];中南大學(xué);2013年

3 鄭蕓;RUNX3基因甲基化修飾及其下游AKT信號通路在人肺腺癌化療耐藥表型中的作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王紅芳;B細(xì)胞型非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞株中CHFR基因表達(dá)及甲基化的研究[D];青島大學(xué);2014年

2 陳小雙;B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤患者血漿p16、shp1基因甲基化檢測及意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

3 李曼蓉;EGCG對慢性低劑量X線輻射誘導(dǎo)的細(xì)胞DNA甲基化影響的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2014年

4 龔喜云;結(jié)直腸癌DAPK、FHIT基因啟動子區(qū)的甲基化研究[D];鄭州大學(xué);2014年

，

本文編號：1161414