本文關(guān)鍵詞：巖黃連總堿對人肺癌細胞的作用及其可能的作用機制

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【摘要】：目的：巖黃連總堿對人肺癌細胞的作用及其可能作用機制。方法：在無菌條件下培養(yǎng)人A549細胞,用四甲基偶氮唑藍比色(MTT)法檢測單用巖黃連總堿在不同濃度(0.1 g/L.0.05 g/L、0.01 g/L、0.005 g/L)分別作用24 h、48 h、72 h后,對人肺腺癌A549細胞的生長抑制情況,用MTT法檢測對人肺腺癌A549細胞的生長抑制情況,流式細胞儀檢測不同巖黃連總堿藥物濃度對A549細胞誘導(dǎo)凋亡的作用及分析各組細胞周期的分布。在體外培養(yǎng)人肺癌A549細胞株至對數(shù)生長期,將其分為3組：陰性對照組、巖黃連總堿(0.01g/L)、巖黃連總堿(0.02g/L)組。采用細胞劃痕法,將A549細胞接種于12孔板,分別在0時和48時拍照,運用倒置顯微鏡拍照,并測量細胞劃痕的寬度(S),每組設(shè)三個復(fù)孔,最后計算各組細胞在不同藥物處理下的細胞遷移率。RT-PCR法檢測藥物作用后人肺腺癌A549細胞中snail、E-cadherin mRNA的表達影響變化情況。Western-blot法檢測藥物作用后人肺腺癌A549細胞中snail、E-cadherin蛋白的表達變化。結(jié)果：巖黃連總堿處48h后測得A549細胞被阻滯在G1期,從而導(dǎo)致A549細胞增殖抑制。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示巖黃連總堿誘導(dǎo)A549細胞凋亡作用隨著藥物濃度的增加,凋亡率升高。細胞劃痕實驗證實巖黃連總堿組抑制肺癌A549細胞的遷移。RT-PCR結(jié)果提示巖黃連總堿組上調(diào)了E-cadherin mRNA的表達,下調(diào)snail mRNA的表達(P0.05)。Western-blot結(jié)果顯示：巖黃連總堿組E-cadherin蛋白表達增加,snail蛋白表達減少(P0.05)。結(jié)論：巖黃連總堿能抑制人肺癌A549細胞增殖并阻滯在G1期,阻滯作用呈劑量依賴性,能誘導(dǎo)A549細胞發(fā)生細胞凋亡,抑制細胞的遷移；Western的結(jié)果提示抑制細胞遷移的機制可能與下調(diào)snail 1的表達,和上調(diào)E-cadherin勺表達有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號：1148645