幽門螺桿菌裂解液誘導(dǎo)人胃癌SGC7901細(xì)胞多藥耐藥的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-11-02 04:07
本文關(guān)鍵詞:幽門螺桿菌裂解液誘導(dǎo)人胃癌SGC7901細(xì)胞多藥耐藥的研究
【摘要】:目的:明確幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori,H.p)能否誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞對化療藥物產(chǎn)生多藥耐藥(multi drug resistance,MDR)。方法:本實(shí)驗(yàn)分為兩部分,第一部分:選取合適濃度H.p裂解液和測定紫杉醇、順鉑、5-氟尿嘧啶三種化療藥物的IC50濃度(half maximal inhibitory concentration)。第二部分:探究將H.p裂解液與SGC7901細(xì)胞多藥耐藥的關(guān)系。對饑餓處理的SGC7901細(xì)胞加入不同濃度的H.p裂解液,用MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,噻唑藍(lán))比色法測得不同時(shí)間點(diǎn)的OD570(570nm optical density,570nm波長的吸光度值)值。繪制出SGC7901細(xì)胞生長曲線,篩選出與未加H.p裂解液的SGC7901細(xì)胞生長趨勢相近的一組H.p裂解液濃度用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。根據(jù)紫杉醇、順鉑、5氟尿嘧啶的最佳血藥濃度,將6個(gè)濃度的各化療藥分別與饑餓處理后的SGC7901細(xì)胞共同培養(yǎng)。于饑餓后第48h,測得上述各組的OD570值,計(jì)算三種化療藥物在不同濃度時(shí)對細(xì)胞的抑制率,用SPSS回歸分析得出紫杉醇、順鉑、5氟尿嘧啶的IC50濃度(half maximal inhibitory concentration,半數(shù)抑制濃度)。探究將H.p裂解液與SGC7901細(xì)胞多藥耐藥的關(guān)系:實(shí)驗(yàn)分為空白組:SGC7901;對照組:SGC7901+IC50紫杉醇、SGC7901+IC50順鉑、SGC7901+IC505-氟尿嘧啶;H.p組:SGC7901+H.p裂解液+IC50紫杉醇、SGC7901+H.p裂解液+IC50順鉑、SGC7901+H.p裂解液+IC505-氟尿嘧啶。各藥物及H.p裂解液均于饑餓處理SGC7901細(xì)胞后同時(shí)加入。于饑餓處理后第24h、第48h、第72h 3個(gè)時(shí)間點(diǎn),用MTT法測得空白組、對照組和H.p組的細(xì)胞OD570值,比較對照組與H.p組間同種化療藥物對SGC7901細(xì)胞的抑制率變化。在饑餓處理后第72h時(shí),檢測三組SGC7901細(xì)胞中多藥耐藥相關(guān)蛋白P-gp(P-glycoprotein,P-糖蛋白)表達(dá)量。比較同種化療藥物在對照組、H.p組中P-gp蛋白表達(dá)相對灰度值改變。結(jié)果:1.隨著H.p裂解液濃度降低,SGC7901細(xì)胞增殖能力升高,在5ug/ml H.p裂解液刺激下,SGC7901細(xì)胞生長曲線與未加SGC7901細(xì)胞生長曲線相似,故選取5ug/ml H.p裂解液體用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.隨著藥物濃度梯度升高,各化療藥物對SGC7901細(xì)胞抑制率升高,經(jīng)回歸曲線分析得出紫杉醇、順鉑、5-氟尿嘧啶的IC50濃度分別為6.591ug/ml、10.691ug/ml、39.683ug/ml。3.在IC50濃度下,紫杉醇、順鉑、5-氟尿嘧啶對各組SGC7901細(xì)胞的抑制率均隨時(shí)間延長而升高;H.p組的三種化療藥物對SGC7901細(xì)胞抑制率分別與對照組比較明顯降低,P0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.饑餓處理SGC7901細(xì)胞后第72h,三種化療藥物的對照組SGC7901細(xì)胞P-gp表達(dá)量分別與空白組比較均無明顯差別,p0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;同種化療藥物的H.p組SGC7901細(xì)胞P-gp表達(dá)量分別與對照組比較均明顯升高,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:幽門螺桿菌裂解液可以誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥蛋白,降低胃癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性。
【關(guān)鍵詞】:幽門螺桿菌 胃癌 多藥耐藥
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R735.2
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-11
- 主要英文縮略語索引11-12
- 前言12-14
- 實(shí)驗(yàn)材料與方法14-26
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-36
- 討論36-40
- 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-45
- 綜述45-54
- 參考文獻(xiàn)50-54
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果54-55
- 致謝55
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 郭崇勇;柯衛(wèi)鋒;宋科瑛;王建豐;周凌;李克;;PI3K/AKT通路參與調(diào)控乳腺癌多藥耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移的研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年25期
2 帥曉明;韓高雄;陳俊華;王國斌;;胃癌體外藥敏試驗(yàn)與多藥耐藥基因、多藥耐藥相關(guān)蛋白表達(dá)的關(guān)系[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2006年10期
,本文編號(hào):1129892
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