本文關(guān)鍵詞：IL-17F在胃癌組織中的表達(dá)及其對胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響

  更多相關(guān)文章： 胃癌 IL-17F IL-17R STAT3 侵襲 遷移

【摘要】：目的:檢測IL-17F在胃癌中的表達(dá),探討IL-17F促進(jìn)胃癌進(jìn)展的作用機(jī)制。方法:1采用RT-PCR和western-blot方法分別檢測IL-17Fm RNA和蛋白在胃癌患者癌組織和癌旁對照組織中的表達(dá),分析其與胃癌患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。2采用MTT法,檢測不同濃度外源性IL-17F(1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)對SGC7901細(xì)胞的增殖活性的影響。3用RT-PCR和western-blot方法檢測IL-17F si RNA基因沉默后SGC-7901細(xì)胞中IL-17F的m RNA和蛋白表達(dá)情況。4采用western-blot分別檢測:沉默IL-17R基因后,IL-17F作用SGC7901細(xì)胞后空載體轉(zhuǎn)染組、轉(zhuǎn)染組中細(xì)胞STAT3的表達(dá)情況;阻斷TPL2活性后,IL-17F作用SGC7901細(xì)胞后,細(xì)胞STAT3表達(dá)的情況。5采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測,IL-17R基因沉默前后和TPL2抑制劑TKI處理前后,IL-17F對SGC7901細(xì)胞遷移能力和侵襲能力的影響。6采用ELISA法檢測,IL-17R基因沉默前后和TPL2抑制劑TKI處理前后,IL-17F對SGC7901細(xì)胞分泌IL-6、IL-8和VEGF的影響。結(jié)果:1 RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與癌旁對照組織相比,胃癌組織內(nèi)IL-17F、VEGF和IL-6 m RNA表達(dá)顯著增高(0.6286±0.2448 vs 0.1553±0.0286、0.2965±0.0527vs 0.1438±0.0295、0.4555±0.1897 vs 0.2357±0.0695)并且IL-17F m RNA表達(dá)水平與VEGF和IL-6 m RNA表達(dá)水平明顯相關(guān)(P0.01)。2 Western-blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與癌旁對照組織相比,胃癌組織內(nèi)IL-17F蛋白表達(dá)顯著增高(0.3861±0.1978 vs 0.1347±0.0563)(P0.05)。3直線相關(guān)分析結(jié)果顯示,胃癌組織內(nèi)IL-17F m RNA和蛋白表達(dá)水平與患者TNM分期明顯相關(guān),而與患者的性別、年齡和腫瘤大小無相關(guān)性。4 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,不同濃度(1ng/ml,10ng/ml,100ng/ml,200ng/ml)IL-17F作用24h,對SGC7901細(xì)胞的體外增殖活性無明顯影響,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5 IL-17R si RNA基因轉(zhuǎn)染后,SGC7901細(xì)胞IL-17R表達(dá)將IL-17R si RNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞后,檢測IL-17R表達(dá),結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染空載體組相比,轉(zhuǎn)染IL-17R si RNA質(zhì)粒的SGC7901細(xì)胞中表達(dá)水平明顯降低6沉默IL-17R基因后IL-17F對SGC7901細(xì)胞遷移能力的影響將IL-17R si RNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞后,檢測IL-17F對細(xì)胞遷移能力的影響,結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染空載體組相比,轉(zhuǎn)染IL-17R si RNA的SGC7901細(xì)胞經(jīng)IL-17F處理后,向劃痕中間遷移的距離明顯縮小,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。7沉默IL-17R基因后IL-17F對SGC7901細(xì)胞侵襲能力的影響將IL-17R si RNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞后,檢測IL-17F對細(xì)胞侵襲能力的影響,結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染空載體組相比,轉(zhuǎn)染IL-17R si RNA的SGC7901細(xì)胞經(jīng)IL-17F處理后,穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。8沉默IL-17R基因后IL-17F對SGC7901細(xì)胞STAT3表達(dá)的影響將IL-17R si RNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞后,檢測IL-17F對細(xì)胞STAT3表達(dá)的影響,結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染空載體組相比,轉(zhuǎn)染IL-17R si RNA的SGC7901細(xì)胞經(jīng)IL-17F處理后,磷酸化STAT3蛋白表達(dá)水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。9沉默IL-17R基因后IL-17F對SGC7901細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響將IL-17R si RNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SGC7901細(xì)胞后,檢測IL-17F對SGC7901細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響,結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染空載體組相比,轉(zhuǎn)染IL-17R si RNA的SGC7901細(xì)胞經(jīng)IL-17F處理后,SGC7901細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6、IL-8、VEGF的分泌水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。10阻斷TPL2活性后,IL-17F對SGC7901細(xì)胞遷移能力的影響。采用10μmol/LTKI處理SGC7901細(xì)胞后,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測IL-17F對SGC7901細(xì)胞遷移能力的影響,結(jié)果顯示,與對照組相比,TKI處理組細(xì)胞經(jīng)IL-17F作用后向劃痕中央遷移的距離明顯縮小。(560.8±13.274vs836±12.227),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。11阻斷TPL2活性后IL-17F對SGC7901細(xì)胞侵襲能力的影響采用10μmol/LTKI處理SGC7901細(xì)胞后,transwell實(shí)驗(yàn)檢測IL-17F對SGC7901細(xì)胞侵襲能力的影響,結(jié)果顯示,與對照組相比,TKI處理組細(xì)胞經(jīng)IL-17F作用后SGC7901細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少(117±11.8321vs222.4±28.8756),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。12阻斷TPL2活性后IL-17F對SGC7901細(xì)胞STAT3表達(dá)的影響采用10μmol/LTKI處理SGC7901細(xì)胞后,western-blot實(shí)驗(yàn)檢測IL-17F對SGC7901細(xì)胞STAT3表達(dá)的影響,結(jié)果顯示,與對照組相比,TKI處理組細(xì)胞經(jīng)IL-17F作用后,磷酸化STAT3表達(dá)水平明顯降低。13阻斷TPL2活性后IL-17F對SGC7901細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響采用10μmol/LTKI處理SGC7901細(xì)胞后,ELISA實(shí)驗(yàn)檢測IL-17F對SGC7901細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響,結(jié)果顯示,與對照組相比,TKI處理組細(xì)胞經(jīng)IL-17F作用后,SGC7901細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-6、IL-8和VEGF的分泌水平(分別為171.9±9.5vs129.8±9.35,324.5±11.82vs301.3±12.37,448.1±13.55vs400±9.63pg/ml)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1胃癌組織內(nèi)IL-17F表達(dá)量增高并與患者TNM分期相關(guān),提示IL-17F可能促進(jìn)胃癌的進(jìn)展。2胃癌組織中IL-17F表達(dá)量增高與VEGF和IL-6表達(dá)量增高明顯相關(guān),提示IL-17F可能通過上調(diào)IL-6和VEGF的表達(dá)促進(jìn)胃癌的進(jìn)展。3外源性IL-17F可能通過細(xì)胞表面的IL-17R作用于TPL2-STAT3信號(hào)通路,誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞遷移、侵襲和分泌IL-6、IL-8和VEGF,促進(jìn)胃癌的進(jìn)展。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 IL-17F IL-17R STAT3 侵襲 遷移
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 英文縮寫12-13
• 引言13-15
• 第一部分IL-17F在胃癌組織中的表達(dá)15-33
• 前言15
• 材料與方法15-21
• 結(jié)果21-22
• 附圖22-25
• 附表25-27
• 討論27-28
• 小結(jié)28
• 參考文獻(xiàn)28-33
• 第二部分IL-17F對胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制研究33-61
• 前言33
• 材料與方法33-42
• 結(jié)果42-45
• 附圖45-55
• 附表55-57
• 討論57-59
• 小結(jié)59
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 結(jié)論61-62
• 綜述IL-17F的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制及其與疾病的關(guān)系62-71
• 參考文獻(xiàn)66-71
• 致謝71-72
• 個(gè)人簡歷72

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 彭波;李華;王育斌;;結(jié)直腸癌患者癌組織中IL-17A和IL-17F的表達(dá)及意義[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年03期

2 張平;張蓉;周小勇;;IL-17F在銀屑病皮損中的表達(dá)及意義[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2010年01期

，

本文編號(hào)：1129329