發(fā)布時(shí)間：2017-10-31 23:24

  本文關(guān)鍵詞：羽扇豆醇對(duì)人肝癌細(xì)胞系SMMC-7721中肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

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【摘要】：目的:體外探討羽扇豆醇對(duì)人肝癌細(xì)胞系SMMC-7721中肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法:1收集采用普通培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞,然后使用無血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)得到所需人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞。2使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度羽扇豆醇(0、20、40、60μmol/L)作用下人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期的分布。3使用不同濃度羽扇豆醇(0、20、40、60μmol/L)作用于人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞,分別于24h、48h、72h,用MTS法檢測(cè)羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞增殖的影響。4使用不同濃度羽扇豆醇(0、20、40、60μmol/L)作用于人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞,使用Transwell小室,于24h觀察羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞侵襲、遷移能力的影響。5將SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞置于含不同濃度羽扇豆醇(0、20、40、60μmol/L)的懸浮培養(yǎng)基中,于5-7天觀察羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞成球能力的影響。6將SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞置于含不同濃度羽扇豆醇(0、20、40、60μmol/L)的無血清培養(yǎng)基中,分別于20min、40min、60min時(shí)觀察羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721干細(xì)胞樣細(xì)胞的細(xì)胞-基質(zhì)粘附性的影響。結(jié)果:1.肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞周期的流式檢測(cè)結(jié)果FCM結(jié)果顯示羽扇豆醇作用于SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞48小時(shí)后,0、20、40、60μmol/L濃度組,細(xì)胞凋亡率分別為2.24±0.42%、16.27±2.4%、3.96±2.42%、27.37±1.93%,用藥組與對(duì)照組比較凋亡率增加(P0.05)。細(xì)胞周期結(jié)果顯示羽扇豆醇作用于SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞48h后,細(xì)胞周期的分布與藥物濃度無明顯相關(guān),G0/G1期變化不明顯,0、20、40、60μmol/L濃度組分別為36.78±0.68、36.36±0.86、36.52±0.70、36.66±0.38,用藥組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);S期變化不明顯,0、20、40、60μmol/L濃度組分別為27.58±1.81、27.82±1.33、27.50±0.90、28±0.32,用藥組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);G2/M期無明顯變化,0、20、40、60μmol/L濃度組分別為35.26±1.27、35.42±0.93、35.58±0.89、35.34±0.35,用藥組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.不同濃度羽扇豆醇處理后細(xì)胞增殖能力比較MTS結(jié)果顯示在濃度為20、40、60μmol/L的羽扇豆醇作用24h后,SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞抑制率分別為12.05%、23.37%、30.46%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);48h后細(xì)胞抑制率分別為17.09%、26.74%、35.08%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);72h后細(xì)胞抑制率分別為22.13%、33.23%、44.83%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);同一濃度不同時(shí)間比較,隨時(shí)間延長(zhǎng),抑制率增加,三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.不同濃度羽扇豆醇處理后細(xì)胞侵襲能力比較顯微鏡觀察結(jié)果顯示羽扇豆醇作用于SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞24小時(shí)后,20、40、60μmol/L濃度組,細(xì)胞侵襲抑制率分別為22.48%、27.54%、41.00%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.不同濃度羽扇豆醇處理后細(xì)胞遷移能力比較顯微鏡觀察結(jié)果顯示羽扇豆醇作用于SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞24小時(shí)后,20、40、60μmol/L濃度組,細(xì)胞遷移抑制率分別為18.81%、31.93%、45.05%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.不同濃度羽扇豆醇處理后細(xì)胞成球數(shù)量比較顯微鏡觀察結(jié)果顯示羽扇豆醇作用于SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞5-7天后,20、40、60μmol/L濃度組,細(xì)胞成球抑制率分別為27.03%、36.49%、58.11%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.不同濃度羽扇豆醇處理后的細(xì)胞-基質(zhì)粘附性比較顯微鏡觀察結(jié)果結(jié)果顯示濃度為20、40、60μmol/L的羽扇豆醇作用20min后,SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞粘附抑制率分別為5.07%、20.96%、40.96%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);40min后粘附抑制率分別為6.53%、27.50%、40.17%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);60min后粘附抑制率分別為16.85%、29.15%、46.94%,用藥組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);同一濃度不同時(shí)間比較,隨時(shí)間延長(zhǎng),抑制率增加,三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞具有促凋亡作用,促凋亡作用具有濃度依賴性。但其對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的細(xì)胞周期無明顯影響。2.羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用,抑制作用具有濃度依賴性和時(shí)間依賴性。3.羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的侵襲能力具有抑制作用,抑制作用具有濃度依賴性。同時(shí)對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的遷移能力具有抑制作用,抑制作用具有濃度依賴性。4.羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的成球能力具有抑制作用,抑制作用具有濃度依賴性。5.羽扇豆醇對(duì)SMMC-7721肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的粘附能力具有抑制作用,抑制作用具有濃度依賴性和時(shí)間依賴性。
【關(guān)鍵詞】：肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞 羽扇豆醇 SMMC-7721 凋亡 侵襲 遷移 粘附
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-25
• 附表25-28
• 討論28-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 綜述 原發(fā)性肝癌干細(xì)胞及羽扇豆醇研究進(jìn)展38-60
• 參考文獻(xiàn)52-60
• 致謝60-61
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷61

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