本文關(guān)鍵詞：糖基轉(zhuǎn)移酶ppGalNAc-T1和-T2對(duì)三陰性乳腺癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及藥物敏感性的影響

  更多相關(guān)文章： 三陰性乳腺癌 ppGalNAc-Ts α2 3唾液酸 MMP14 藥物敏感性

【摘要】：目的三陰性乳腺癌由于雌激素受體(Estrogen receptor,ER)或孕激素受體(Progesterone receptor,PR)及人表皮生長(zhǎng)因子受體2(Human epidermal growth factor receptor 2,HER2)均表達(dá)陰性而使臨床使用的靶向治療方案和內(nèi)分泌治療方案的效果不理想。尋找新的治療靶點(diǎn)有助于提高臨床的檢測(cè)及時(shí)性和治療可靠性,本文通過(guò)檢測(cè)三陰性乳腺癌MDA-MB-231,Luminal A型乳腺癌細(xì)胞MCF-7及正常乳腺細(xì)胞MCF-12A中pp Gal NAc-Ts,α2,3唾液酸,MMPs的表達(dá)水平差異;并通過(guò)RNAi干擾pp Gal NAc-T1和T2后,檢測(cè)三陰性乳腺癌中末端α2,3唾液酸,MMP14蛋白表達(dá)的變化,初步探討pp Gal NAc-T1和-T2對(duì)TNBC糖基化及侵襲轉(zhuǎn)移的作用。并通過(guò)化療藥和si RNA聯(lián)合用藥探討O-聚糖末端唾液酸對(duì)TNBC藥物敏感性及凋亡的影響。方法(1)通過(guò)Real-time PCR、Lectin blots、Western blots分別檢測(cè)MDA-MB-231,MCF-7和MCF-12A中pp Gal NAc-Ts,MMPs及α2,3唾液酸鏈的表達(dá)差異。(2)RNAi干擾TNBC中高表達(dá)的pp Gal NAc-T1和-T2后,通過(guò)Real-time PCR、Lectin blot、Western blot及免疫沉淀檢測(cè)總蛋白及MMP14蛋白表面α2,3唾液酸鏈的變化,并通過(guò)Transwell檢測(cè)pp Gal NAc-T1和-T2對(duì)TNBC侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。(3)通過(guò)化療藥處理MB-231,MB-231/si-T1和MB-231/si-T2細(xì)胞,MTT及Hoechst33258檢測(cè)藥敏感性及凋亡能力的變化,并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞表面α2,3唾液酸的變化。(4)通過(guò)化療藥與si RNA聯(lián)合作用,Transwell檢測(cè)末端唾液酸糖鏈對(duì)乳腺癌侵襲能力的變化。結(jié)果(1)本研究檢測(cè)發(fā)現(xiàn)三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中高表達(dá)pp Gal NAc-T1,-T2,MMP14及α2,3唾液酸鏈且明顯高于MCF-7及MCF-12A細(xì)胞。(2)RNAi干擾pp Gal NAc-T1和-T2后,三陰性乳腺癌中總蛋白及MMP14表面α2,3唾液酸鏈明顯下調(diào)。抑制pp Gal NAc-T1和-T2表達(dá)后,MMP14和VEFG蛋白的表達(dá)降低,最終TNBC侵襲能力也隨之降低。(3)MB-231/si-T1和MB-231/si-T2對(duì)化療藥的藥物敏感性及凋亡能力明顯高于對(duì)照組。流式細(xì)胞術(shù)顯示α2,3唾液酸在處理組中明顯降低。(4)化療藥和si RNA聯(lián)合作用后,對(duì)三陰性乳腺細(xì)胞侵襲能力的抑制明顯上升。結(jié)論(1)三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231中高表達(dá)pp Gal NAc-T1,-T2,MMP14及α2,3唾液酸且可能與其惡性程度密切相關(guān)。(2)干擾pp Gal NAc-T1和-T2,抑制O-糖基化起始能抑制末端α2,3唾液酸鏈,同時(shí)造成MMP14鉸鏈區(qū)α2,3唾液酸的降低。α2,3唾液酸鏈可能與MMP14自降解及活化VEGF密切相關(guān),且MMP14表達(dá)降低最終影響TNBC侵襲轉(zhuǎn)移能力。(3)干擾糖基化起始而降低細(xì)胞表面致密性的末端α2,3唾液酸鏈,有助于化療藥與腫瘤細(xì)胞直接作用從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的藥物敏感性及凋亡能力。(4)化療藥DOC和si RNA-pp Gal NAc-T1和-T2聯(lián)合作用對(duì)抑制TNBC的侵襲能力具有顯著作用。
【關(guān)鍵詞】：三陰性乳腺癌 ppGalNAc-Ts α2 3唾液酸 MMP14 藥物敏感性
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-20
• 1.乳腺癌分型9-10
• 2.O-GALNAC糖基化和糖基轉(zhuǎn)移酶10-11
• 3.異常O-糖基化和腫瘤11-12
• 4.唾液酸與乳腺癌12-14
• 5.MMP14 與侵襲轉(zhuǎn)移14-15
• 6.異常糖基化與藥物敏感性15-16
• 參考文獻(xiàn)16-20
• 第一部分 siRNA-PPGALNAC-T1和-T2對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231中MMPS表達(dá)水平，O-糖鏈末端唾液酸化及侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響20-38
• 1.材料和方法21-23
• 2.方法23-27
• 3.結(jié)果27-34
• 4.討論34-36
• 參考文獻(xiàn)36-38
• 第二部分 化療藥吉西他濱和多西他賽對(duì)MDA-MB-231，，MB-231/si-T1 和MB-231/si-T2 細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移及藥物敏感性的影響38-50
• 1.材料和方法38-40
• 2.方法40-42
• 3.結(jié)果42-46
• 4.討論46-48
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 全文小結(jié)50-51
• 綜述51-58
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 攻讀學(xué)位期間本人出版或公開(kāi)發(fā)表的論著、論文58-59
• 受資助的基金項(xiàng)目59-60
• 附錄 中英文縮略詞表60-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王靜;彭燦;張延;;O-糖基化起始糖基轉(zhuǎn)移酶的活性與結(jié)構(gòu)研究[J];生命科學(xué);2011年07期

本文編號(hào)：1108601