本文關(guān)鍵詞：肝癌細(xì)胞MGMT表達(dá)水平與奧沙利鉑敏感性的相關(guān)性

  更多相關(guān)文章： 肝癌 MGMT OXA 化療敏感性

【摘要】：目的:探討肝癌細(xì)胞MGMT表達(dá)水平與OXA敏感性的相關(guān)性。方法:采用體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞株Bel-7402、SMMC-7721、HUH-7。用RT-PCR法檢測(cè)MGMT的mRNA表達(dá)水平;Western-Blot方法檢測(cè)MGMT蛋白的基礎(chǔ)表達(dá)水平;MTT法計(jì)算各肝癌細(xì)胞的IC50;對(duì)比肝癌細(xì)胞MTT,并通過甲基化特異性PCR,檢測(cè)所有細(xì)胞的MGMT甲基化的狀態(tài);Western-Blot方法檢測(cè)加OXA后r-H2Ax的表達(dá)來評(píng)價(jià)DNA損傷程度;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:各肝癌細(xì)胞系均可檢測(cè)到MGMT基因和蛋白的表達(dá),其中HUH-7 MGMT的mRNA以及蛋白水平最高;而Bel-7402的MGMT的mRNA以及蛋白水平最低,且三者的MGMT蛋白水平與mRNA水平呈正相關(guān)。根據(jù)MTT結(jié)果計(jì)算出HuH-7、SMMC-7721、Bel-7402對(duì)OXA的IC50分別為246.76μg/ml、48.43μg/ml以及31.35μg/ml,根據(jù)相關(guān)性分析得出MGMT的mRNA及蛋白表達(dá)水平與IC50呈正相關(guān),即MGMT表達(dá)水平越高,其IC50值越大。MGMT的甲基化結(jié)果顯示HuH-7的MGMT的甲基化表達(dá)水平最低,Bel-7402的MGMT的甲基化表達(dá)水平最高,根據(jù)相關(guān)性分析得出MGMT啟動(dòng)子甲基化水平與MGMT的mRNA與蛋白水平以及IC50呈負(fù)相關(guān)。加OXA12h后r-H2Ax均有不同程度表達(dá),其中Bel-7402的r-H2Ax升高最明顯而HuH-7升高最少。流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡,顯示加入OXA后Bel-7402早期凋亡率最高,而HuH-7的凋亡率最低。結(jié)論:肝癌細(xì)胞中MGMT的mRNA及蛋白表達(dá)水平越高,OXA對(duì)其殺傷力越弱;肝癌細(xì)胞中MGMT的mRNA及蛋白表達(dá)水平越低,OXA對(duì)其殺傷力越強(qiáng)。肝癌細(xì)胞中MGMT啟動(dòng)子甲基化水平越高,對(duì)OXA越敏感;肝癌細(xì)胞中MGMT啟動(dòng)子甲基化水平越低,對(duì)OXA越不敏感。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 MGMT OXA 化療敏感性
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 前言8-10
• 第二章 材料和方法10-25
• 1 材料10-19
• 4.MTT法檢測(cè)肝癌細(xì)胞的IC_(50)19-20
• 5.MGMT基因CPG島甲基化狀態(tài)檢測(cè)20-23
• 6.流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡23-24
• 7.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理24-25
• 第三章 結(jié)果25-31
• 3.1 肝癌細(xì)胞株中MGMT基因MRNA轉(zhuǎn)錄水平25
• 3.2 肝癌細(xì)胞株中MGMT蛋白表達(dá)水平25-26
• 3.3 肝癌細(xì)胞株對(duì)OXA的敏感性26-27
• 3.4 肝癌細(xì)胞株中MGMT啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)27-29
• 3.5 不同肝癌細(xì)胞經(jīng)OXA治療后γ-H2AX表達(dá)水平的差異29
• 3.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同肝癌細(xì)胞的凋亡29-31
• 第四章 討論31-33
• 第五章 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-36
• 綜述36-51
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文51-52
• 中英文縮略詞表52-53
• 致謝53-54

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