CD58在兒童B-ALL中的表達及其用于MRD檢測的可行性研究
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更多相關(guān)文章: CD58 微小殘留病 兒童 急性B淋巴細胞白血病
【摘要】:背景與目的急性淋巴細胞白血病是兒童時期常見的惡性血液系統(tǒng)疾病,其中急性B淋巴細胞白血病(B-ALL)發(fā)病率占到急性淋巴細胞白血病的85%。通過規(guī)律的聯(lián)合化療,兒童急性白血病的首次化療后完全緩解率已達90%以上,5年生存率可達80%,但是患者完全緩解后復(fù)發(fā)仍然是白血病治療過程中的最大障礙。白血病復(fù)發(fā)的根源在于體內(nèi)殘存有少量的白血病細胞。目前,臨床上監(jiān)測白血病微小殘留病(MRD)最常用的檢測方法是多參數(shù)流式細胞術(shù)(FCM),具有快速,準確,簡便等特點。FCM檢測MRD的關(guān)鍵點在于選擇適用的免疫標記物組成合適的組合,該組合能夠高度靈敏特異地鑒別正常細胞和白血病細胞。淋巴細胞功能相關(guān)抗原-3(CD58),屬于免疫球蛋白超家族,在體內(nèi)多種細胞上均有表達。已有報道稱CD58在成人B-ALL白血病細胞的表達率高于正常的B系前體細胞,因此可能作為MRD檢測的一種新的免疫標記物,但是目前CD58在兒童ALL中的表達特點尚沒有關(guān)注。本研究以兒童B-ALL患者為研究對象,分析CD58在兒童B-ALL中的表達特點,并探討其用于兒童B-ALL MRD檢測的可行性。資料和方法選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科血液病區(qū)收治的B-ALL初診患兒87例,所有病例都經(jīng)FAB分型和流式細胞術(shù)檢查明確診斷。選取CD58/CD10/CD19/CD45抗體組合,應(yīng)用四色流式細胞術(shù)(FCM)分別在初診時和化療第19天檢測B-ALL患兒白血病細胞表面CD58的表達強度。按照年齡、性別相匹配的原則,選取20例缺鐵性貧血患兒和5例經(jīng)誘導(dǎo)化療完全緩解后的T-ALL患兒骨髓標本作為對照組。在誘導(dǎo)化療第33天并且達到臨床完全緩解后,同時采用實時熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)(RQ-PCR)和流式細胞術(shù)對B-ALL患者進行微小殘留檢測。結(jié)果(1)87例B-ALL患兒骨髓白血病細胞膜表面CD58平均MFI為90.82±33.23,對照組中20例缺鐵性貧血兒童骨髓中正常B系前體細胞膜表面CD58平均MFI為13.52±6.27,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=10.33,P0.001);CD58在B-ALL患兒骨髓異常細胞的表達強度顯著高于正常骨髓B系前體細胞。(2)5例經(jīng)誘導(dǎo)化療后完全緩解的T-ALL患兒骨髓中B系前體細胞膜表面CD58平均MFI為15.34±4.19,與B-ALL患兒初診時CD58的表達強度比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.746,P0.01),但是和正常骨髓細胞中的B系前體細胞比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.611,P=0.506)。(3)隨機檢測38例B-ALL患兒在化療第19天時骨髓細胞CD58的表達強度,與他們在初診時的CD58表達強度相比較。結(jié)果顯示初診時的CD58 MFI為106.57±25.90,化療第19天的骨髓細胞CD58 MFI為100.48±22.31,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.801,P=0.428)。(4)根據(jù)白血病細胞和正常的B系前體細胞在CD58和CD10雙參數(shù)流式細胞圖上的分布特點,87例B-ALL患兒中有48例患兒可以適用CD58抗體組合檢測MRD,CD58抗體組合覆蓋率為55.1%。(5)選取CD58/CD10/CD19/CD45抗體組合采用流式細胞術(shù)對48例CD58高表達的B-ALL患兒(化療33天時)進行MRD檢測,陽性9例,陰性39例;采用RT-PCR法檢測MRD結(jié)果為陽性11例,陰性37例。其中46例(95.8%)檢測結(jié)果一致,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.50,P=0.500)。(6)B-ALL患兒中CD58高表達組MRD陽性11例,低表達組陽性19例,CD58低表達組MRD陽性率明顯高于高表達組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.340,P=0.012)。結(jié)論CD58在兒童B-ALL白血病細胞上廣泛表達,并且表達強度高于正常的B系前體細胞。CD58在異常白血病細胞表面表達穩(wěn)定,在一定時間內(nèi)可以作為兒童B-ALL MRD檢測的指標,提高MRD檢測的覆蓋率。
【關(guān)鍵詞】:CD58 微小殘留病 兒童 急性B淋巴細胞白血病
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R733.71
【目錄】:
- 中文摘要4-7
- Abstract7-11
- 中英文縮略語對照表11-12
- 前言12-16
- 材料和方法16-22
- 結(jié)果22-25
- 討論25-31
- 結(jié)論31-32
- 附圖32-34
- 參考文獻34-37
- 綜述部分 兒童急性淋巴細胞白血病的微小殘留病檢測37-51
- 參考文獻47-51
- 個人簡歷及攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章51-52
- 致謝52
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