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蒲公英對人胃癌BGC823細胞及小鼠肝癌H22細胞的影響

發(fā)布時間:2017-10-25 18:02

  本文關(guān)鍵詞:蒲公英對人胃癌BGC823細胞及小鼠肝癌H22細胞的影響


  更多相關(guān)文章: 蒲公英 BGC823細胞 H22細胞 增殖 遷移 侵襲


【摘要】:目的:通過不同濃度蒲公英對荷瘤小鼠肝癌H22細胞和體外培養(yǎng)人胃癌BGC823細胞的增殖、遷移、侵襲作用及相關(guān)蛋白表達的影響,探討蒲公英的抗腫瘤作用及其分子機制。方法:免疫組化法檢測不同濃度蒲公英對H22荷瘤小鼠腫瘤組織中TGF-β1、 mTOR、MMP-2和MMP-9等蛋白因子表達的影響?寺⌒纬、MTS法檢測不同濃度蒲公英對BGC823細胞存活率及增殖變化;通過Transwell小室檢測不同濃度蒲公英對BGC823細胞遷移和侵襲作用的影響;實時定量PCR檢測不同濃度蒲公英對BGC823細胞MMP-2mRNA表達水平的影響。結(jié)果:1、在體實驗結(jié)果顯示,不同濃度蒲公英均可抑制H22荷瘤小鼠瘤組織的增殖,與對照組相比,有顯著性差異(P0.05)。免疫組化結(jié)果表明,蒲公英可下調(diào)瘤組織中TGF-β1、mTOR、MMP-2和MMP-9的表達。2、三個濃度蒲公英都可抑制胃癌BGC823細胞的增殖,并且隨著濃度的增加,細胞克隆數(shù)呈顯著下降趨勢(t=2.011、1.812、1.214,P0.05);2.5mg/ml蒲公英可抑制BGC823細胞增殖能力,隨著用藥后培養(yǎng)時間延長細胞增長水平逐漸下降;4.0 mg/ml蒲公英抑制BGC823細胞增殖的作用最強(P0.05)。3、Transwell小室檢測結(jié)果顯示,三個濃度蒲公英都可使BGC823細胞遷移數(shù)減少,且隨著濃度的增加這種作用逐漸增強,2.5 mg/ml和4.0mg/ml組與對照組相比,有顯著性差異(t=0.359、0.297,P0.05),這兩組之間沒有顯著差異(P0.05),表明在一定濃度范圍內(nèi),蒲公英濃度的變化對癌細胞的遷移變化影響不大。蒲公英對BGC823細胞侵襲作用的影響與遷移基本一致。4、RT-PCR結(jié)果顯示,不同濃度蒲公英均可下調(diào)BGC823細胞MMP2mRNA表達,隨蒲公英濃度的增加下調(diào)作用逐漸增強;在2.5 mg/ml和4.0mg/ml濃度時,MMP-2表達的下調(diào)作用有顯著差異(P0.05)。結(jié)論:1、蒲公英對H22荷瘤小鼠肝癌細胞生長具有抑制作用,中劑量組(0.25g/m1)藥物濃度對荷瘤小鼠癌組織生長有明顯的抑制作用。2、蒲公英下調(diào)TGF-β1和mTOR因子的表達,從而抑制信號傳導通路中下游相關(guān)因子的表達調(diào)控,抑制癌細胞的增殖。對于調(diào)控細胞轉(zhuǎn)移的主要分子MMP-2和MMP-9也有一定的下調(diào)作用,說明蒲公英通過抑制相關(guān)因子的表達變化來抑制腫瘤細胞的增殖和轉(zhuǎn)移。3、蒲公英對體外培養(yǎng)的BGC823細胞也有較明顯的抑制作用。這種作用可能通過下調(diào)BGC823細胞MMP-2的表達,發(fā)揮抑制腫瘤細胞遷移和侵襲的作用。
【關(guān)鍵詞】:蒲公英 BGC823細胞 H22細胞 增殖 遷移 侵襲
【學位授予單位】:蘭州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R73-3
【目錄】:
  • 中文摘要3-5
  • Abstract5-10
  • 第一章 前言10-17
  • 1.1 研究背景10-11
  • 1.1.1 癌癥現(xiàn)狀10
  • 1.1.2 胃癌的臨床治療10-11
  • 1.2 蒲公英簡介11-14
  • 1.2.1 蒲公英的主要成分11-12
  • 1.2.2 蒲公英的藥理作用12-14
  • 1.3 蒲公英對胃癌及肝癌的作用效果研究14-15
  • 1.3.1 抑制胃癌及肝癌的增殖14
  • 1.3.2 抑制胃癌及肝癌細胞的轉(zhuǎn)移14-15
  • 1.4 本論文研究內(nèi)容15-17
  • 第二章 材料17-19
  • 2.1 小鼠和細胞株來源17
  • 2.2 主要實驗設(shè)備及儀器17-18
  • 2.3 實驗試劑18
  • 2.4 實驗所用藥劑18-19
  • 第三章 實驗方法19-24
  • 3.1 蒲公英對H22肝癌荷瘤小鼠的影響19-20
  • 3.1.1 H22細胞的培養(yǎng)19
  • 3.1.2 H22細胞的接種及給藥19
  • 3.1.3 取材19
  • 3.1.4 免疫組化法檢測各組織TGF-β1、mTOR、MMP-2和MMP-9的變化19-20
  • 3.2 蒲公英對BGC823細胞的影響20-24
  • 3.2.1 蒲公英對BGC823細胞克隆的影響20-21
  • 3.2.2 蒲公英對BGC823細胞增殖的影響21
  • 3.2.3 蒲公英對BGC823細胞遷移的影響21-22
  • 3.2.4 蒲公英對BGC823細胞侵襲的影響22
  • 3.2.5 實時定量PCR檢測MMP-2基因表達22-23
  • 3.2.6 統(tǒng)計學方法23-24
  • 第四章 實驗結(jié)果24-35
  • 4.1 蒲公英對H22荷瘤小鼠體重、瘤體及相關(guān)蛋白表達的影響24-29
  • 4.1.1 不同藥物濃度在不同時間對小鼠體重和瘤體積大小的影響24-26
  • 4.1.2 不同藥物濃度對小鼠H22瘤組織TGF-β1和mTOR的表達影響26-28
  • 4.1.3 不同藥物濃度對小鼠H22瘤組織MMP-2和MMP-9表達的影響28-29
  • 4.2 蒲公英對胃癌BGC823細胞克隆、增殖、遷移及侵襲作用的影響29-35
  • 4.2.1 蒲公英對胃癌B6C823細胞克隆形成的影響29-30
  • 4.2.2 蒲公英對胃癌BGC823細胞增殖的影響30-31
  • 4.2.3 蒲公英對BGC823細胞遷移的影響31-32
  • 4.2.4 蒲公英對胃癌BGC823細胞侵襲力的影響32-33
  • 4.2.5 實時定量PCR檢測蒲公英對BGC823細胞MMP-2表達的影響33-35
  • 第五章 討論35-40
  • 5.1 蒲公英對肝癌H22荷瘤小鼠的影響35-36
  • 5.2 蒲公英對胃癌BGC823細胞克隆形成和增殖的影響36-38
  • 5.3 蒲公英對胃癌BGC823細胞遷移和侵襲的影響38
  • 5.4 實時定量PCR檢測MMP-2基因表達38-40
  • 第六章 結(jié)論40-41
  • 6.1 結(jié)論40
  • 6.2 展望40-41
  • 參考文獻41-46
  • 附圖46-53
  • 在學期間的研究成果53-54
  • 致謝54

【參考文獻】

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本文編號:1094848

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