本文關(guān)鍵詞：FAM172A基因功能及其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制的初步研究

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【摘要】：結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)是常見的惡性腫瘤之一,全世界每年大約有140萬(wàn)新發(fā)病例,同時(shí)至少70萬(wàn)患者死亡。在我國(guó),大腸癌在惡性腫瘤中已排第4～6位,盡管目前結(jié)直腸癌相關(guān)手術(shù)、放化療方案的治療方法,已經(jīng)提高了早期患者的生存率,但大多數(shù)伴有轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌患者不適合傳統(tǒng)的治療方式,五年生存率10%。發(fā)病年齡趨向年輕化,嚴(yán)重影響國(guó)人健康水平。目前臨床常用的抗腫瘤化學(xué)治療藥物均有不同程度的毒副作用,它們?cè)跉[瘤細(xì)胞的同時(shí),也殺傷正常組織的細(xì)胞。同時(shí),腫瘤細(xì)胞的抗藥性在很大程度上加重了人類對(duì)新型抗腫瘤藥物需求的緊迫性。而由于基因的不穩(wěn)定性和腫瘤細(xì)胞的異型性,從基因或其他方面研究具體腫瘤,是一項(xiàng)異常艱巨的任務(wù)。因此,研制新的抗腫瘤藥物、改變藥物的抗腫瘤作用方式,這是擺在科研工作者面前的重要研究課題�？拱┑鞍�(anticancer protein)是隨著腫瘤研究的不斷進(jìn)展,基于免疫和分子生物學(xué)的發(fā)展被新近提出的一種治療策略,已成為腫瘤治療研究的一個(gè)新的熱點(diǎn)�？鼓[瘤蛋白特點(diǎn)為分子質(zhì)量小,極易穿透瘤細(xì)胞,具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性,可以通過(guò)提高免疫應(yīng)答、抑制腫瘤血管形成、直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡或阻滯腫瘤細(xì)胞周期等作用方式抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。通過(guò)前期實(shí)驗(yàn)研究我們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)人類功能未知的新基因,其對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞存在有絲分裂抑制作用,故將其命名為AC-01。經(jīng)過(guò)生物信息學(xué)分析,我們發(fā)現(xiàn)AC-01,即為FAM172A (family with sequence similarity 172, member A),定位于染色體5q15,其表達(dá)范圍廣泛,包括單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、人胚胎腎細(xì)胞、尿道上皮、肝細(xì)胞、大腸上皮細(xì)胞及多種腫瘤細(xì)胞。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),FAM172A能夠顯著抑制人大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞的增殖,那么,FAM172A有可能通過(guò)抑制人大腸癌細(xì)胞LoVo細(xì)胞的有絲分裂從而達(dá)到抑制其增值的作用。根據(jù)近年來(lái)有關(guān)抗癌蛋白的研究,我們推測(cè)FAM172A可能是一種抗癌蛋白,該基因是一個(gè)典型的抑癌基因,這就提示FAM172A蛋白將可能成為一種新的抗癌蛋白用于大腸癌的生物治療。因此,本課題計(jì)劃在前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,進(jìn)一步明確FAM172A抑制大腸癌生長(zhǎng)的核心作用,擬探討FAM172A基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制,主要明確其轉(zhuǎn)錄前水平的調(diào)節(jié)機(jī)制,即研究該基因的核心啟動(dòng)子以及調(diào)控其表達(dá)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,為FAM172A應(yīng)用于大腸癌的生物治療提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。目的：進(jìn)一步明確FAM172A對(duì)大腸癌細(xì)胞的抑制作用,并探討其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制。方法：1、生物學(xué)信息學(xué)分析利用NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)在線查找FAM172A的mKNA序列,用mRNA序列在人類基因組序列作BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/),尋找最匹配的基因組序列,確定基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),其中轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)處的第一個(gè)核苷酸定位為+1。使用UCSC Genome Browse (http://genome.ucsc.edu/)和Ensemble Genome Browse (http://asia.ensembl.org/index.html)預(yù)測(cè)FAM172A基因的啟動(dòng)子序列。2、全基因組DNA提取與質(zhì)粒構(gòu)建根據(jù)NCBI檢索出的FAM172AmRNA序列及預(yù)測(cè)的啟動(dòng)子序列,使用軟件Vector NTI Advance 11.5.1設(shè)計(jì)其特異性引物,擴(kuò)增其DNA(其中,擴(kuò)增FAM172A啟動(dòng)子序列時(shí),使用Genomic DNA Purification kit (Promega)試劑盒提取人全血中全基因組DNA,以此為模板),并分別連接至pcDNA3.1(-)和pGL4.10載體,構(gòu)建FAM172A蛋白基因及其啟動(dòng)子的重組質(zhì)粒。3、明確FAM172A蛋白抑制大腸癌細(xì)胞增殖及促進(jìn)凋亡分化的作用(1)從大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞內(nèi)提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后,成功擴(kuò)增FAM172A序列,連接至pET32a(+),成功構(gòu)建pET32a(+)-FAM172A重組載體,將構(gòu)建好的pET32a(+)-FAM172A轉(zhuǎn)化至大腸桿BL21(DE3), IPTG大量誘導(dǎo)表達(dá)并制備、純化多克隆抗體；培養(yǎng)大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞及SW480細(xì)胞,將提取的FAM172A重組蛋白按照不同的濃度(0、0.1、1.0、10和100ng/ml)與大腸癌細(xì)胞共培養(yǎng),分別培養(yǎng)12、24、36、48h后,收集大腸癌細(xì)胞后,使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期及細(xì)胞數(shù)量；使用XTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大腸癌細(xì)胞的增殖情況；(2)將構(gòu)建好的FAM172A重組質(zhì)粒及FAM172A干擾質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至大腸癌細(xì)胞中,培養(yǎng)48小時(shí)后,收集細(xì)胞,使用AnnexinV-7AAD試劑及流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況；4、 FAM172A蛋白基因啟動(dòng)子的克隆與初步分析提取提取人全血全基因組DNA,根據(jù)生物信息學(xué)預(yù)鋇FAM172A蛋白基因的啟動(dòng)子序列,設(shè)計(jì)其特異性引物,擴(kuò)增其DNA,并連接至pGL4.10載體,構(gòu)建FAM172A蛋白基因啟動(dòng)子的重組質(zhì)粒,將構(gòu)建好的FAM172A基因啟動(dòng)子的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,擴(kuò)增培養(yǎng),并中提重組質(zhì)粒,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染FAM172A重組質(zhì)粒和pGL4.10空載至大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞,利用Luciferase報(bào)告基因技術(shù)檢測(cè)重組質(zhì)粒的活性。5, FAM172A蛋白基因核心啟動(dòng)子的鑒定與分析通過(guò)不斷截短上述構(gòu)建啟動(dòng)子序列,設(shè)計(jì)各自特異性引物,擴(kuò)增其DNA,并連接至pGL4.10載體,構(gòu)建FAM172A蛋白基因各截短啟動(dòng)子的重組質(zhì)粒,將構(gòu)建好的FAM172A基因各截短啟動(dòng)子的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,擴(kuò)增培養(yǎng),并中提重組質(zhì)粒,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染FAM172A各截短重組質(zhì)粒和pGL4.10空載至大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞,利用Luciferase報(bào)告基因技術(shù)分別檢測(cè)各截短重組質(zhì)粒的活性,比較其活性,鑒定出核心啟動(dòng)子序列。6、關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子對(duì)FAM172A蛋白的轉(zhuǎn)錄活性的作用研究根據(jù)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)與FAM172A蛋白基因的核心啟動(dòng)子序列結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子,預(yù)測(cè)其序列,提取大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,設(shè)計(jì)轉(zhuǎn)錄因子的特異性引物,擴(kuò)增其cDNA,并連接至pcDNA3.1(-)載體,構(gòu)建轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)質(zhì)粒。瞬時(shí)共轉(zhuǎn)染核心啟動(dòng)子重組質(zhì)粒和轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)質(zhì)粒,通過(guò)設(shè)置分組,利用Luciferase報(bào)告基因技術(shù),檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子活性,再通過(guò)EMSA(電泳遷移率實(shí)驗(yàn))、ChIP(染色質(zhì)免疫沉淀)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)鑒定出能與核心啟動(dòng)子序列特異性結(jié)合的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)載體和轉(zhuǎn)錄因子的siRNA至大腸癌細(xì)胞系LoVo細(xì)胞,通過(guò)Real-time PCR和Western blotting觀察FAM172A基因的轉(zhuǎn)錄水平以及蛋白的表達(dá)水平,從而說(shuō)明轉(zhuǎn)錄因子對(duì)FAM172A蛋白轉(zhuǎn)錄水平的影響。7、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行系統(tǒng)分析,文章中所有的計(jì)量資料的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤來(lái)表示。計(jì)量資料的組間比較采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),多組的組間比較采用方差分析。P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本文所有實(shí)驗(yàn)均獨(dú)立進(jìn)行3次,取其平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：1、為了驗(yàn)證FAM172A能否影響到大腸癌細(xì)胞的細(xì)胞周期,我們將提取的FAM172A重組蛋白按照不同的蛋白濃度,與大腸癌細(xì)胞SW480共培養(yǎng),分別于12、24、36、48h收集細(xì)胞,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)大腸癌細(xì)胞的細(xì)胞周期情況。我們發(fā)現(xiàn)處于S期的大腸癌SW480細(xì)胞及所有大腸癌細(xì)胞的數(shù)量均有所減少,并且隨著FAM172A重組蛋白的濃度的增加,S期的大腸癌SW480細(xì)胞及所有大腸癌細(xì)胞的數(shù)量減少的就越多,呈劑量依賴性。另外,在FAM172A重組蛋白的最高濃度為0.1 μg/ml時(shí),處于S期的大腸癌SW480細(xì)胞減少至3.18%。這些結(jié)果說(shuō)明FAM172A能夠明顯抑制大腸癌細(xì)胞的增殖,尤其在FAM172A重組蛋白濃度高于0.1 μg/ml時(shí)。在XTT增殖實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,FAM172A能夠明顯抑制大腸癌細(xì)胞的增長(zhǎng)(p0.01),且抑制FAM172A表達(dá)后,大腸癌細(xì)胞增長(zhǎng)增多(p0.05),且增長(zhǎng)速度增加。這些結(jié)果表明FAM172A能夠明顯抑制大腸癌細(xì)胞的增殖。2、我們使用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)FAM172A對(duì)大腸癌細(xì)胞系SW480細(xì)胞凋亡的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),過(guò)表達(dá)FAM172A能夠使得大腸癌SW480細(xì)胞凋亡的數(shù)量增加(p0.01),而抑制FAM172A表達(dá)后,大腸癌SW480細(xì)胞凋亡的數(shù)量明顯減少(p0.01),這些結(jié)果說(shuō)明FAM172A能夠促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的凋亡。另外,我們還發(fā)現(xiàn),與FAM172A重組蛋白共培養(yǎng)后,分別在100倍和400倍顯微鏡下觀察,相對(duì)于對(duì)照組來(lái)說(shuō),發(fā)現(xiàn)FAM172A能夠誘導(dǎo)細(xì)胞分化。3、為了鑒定出FAM172A的啟動(dòng)子序列,我們搜索NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)和檢索UCSC genome Browser (http://genome.ucsc.edu/)，獲得FAM172A基因的mRNA序列,分析預(yù)測(cè)FAM172A基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),通過(guò)BLAST,我們預(yù)測(cè)出FAM172A的啟動(dòng)子序列為-740bp至+205bp,成功擴(kuò)增出FAM172A的啟動(dòng)子片段,將此預(yù)測(cè)的FAM172A的啟動(dòng)子片段連接至pGL4.10載體,限制性內(nèi)切酶的分別為Xhol和EcoR V,我們將構(gòu)建出的pGL4.10-FAM172A啟動(dòng)子重組質(zhì)粒命名為P1,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)及各截短啟動(dòng)子的模板。將其轉(zhuǎn)染至大腸癌LoVo細(xì)胞中,培養(yǎng)24小時(shí)后,我們采用Luciferase報(bào)告基因技術(shù)檢測(cè)JFAM172A啟動(dòng)子的活性,結(jié)果使用Firefly/Renilla比表示。我們發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組pGL4.10 Basic空載相比,P1具有40倍的啟動(dòng)子活性,這提示我們預(yù)測(cè)的啟動(dòng)子片段在大腸癌LoVo細(xì)胞中具有啟動(dòng)子活性。隨后我們不斷截短P1片段,分別構(gòu)建5個(gè)截短的啟動(dòng)子片段的重組質(zhì)粒,分別命名為P2、P3、P4、P5和P6,Luciferase報(bào)告基因技術(shù)檢測(cè)各截短啟動(dòng)子的活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在大腸癌細(xì)胞中,P6的啟動(dòng)子活性最高。通過(guò)不斷的截短預(yù)測(cè)的啟動(dòng)子序列,我們發(fā)現(xiàn)截短啟動(dòng)子片段P6,-112 bp至+48bp,具有核心啟動(dòng)子所必需的序列及結(jié)合位點(diǎn),且具有較高的啟動(dòng)子活性。4、接著,通過(guò)在線軟件TFSEARCH(http://www.cbrc.jp/research/db/TFSEARCh. html) and GeneCards (http://www.genecards.org/)預(yù)測(cè)可能與FAM172A核心啟動(dòng)子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子,我們發(fā)現(xiàn),STAT1,一個(gè)得分最高的主要常見的轉(zhuǎn)錄因子,結(jié)合位點(diǎn)位于FAM172A核心啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)。STAT1結(jié)合位點(diǎn)是-68bp和-58bp之間。5、為了驗(yàn)證STAT1能否與FAM172A啟動(dòng)子結(jié)合,我們做了染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)及凝膠電泳遷移滯后實(shí)驗(yàn)(EMSA)。在ChIP實(shí)驗(yàn)中,我們成功擴(kuò)增了FAM172A核心啟動(dòng)子序列,然后我們發(fā)現(xiàn)與IgG對(duì)照組相比,STAT1的結(jié)合位點(diǎn)位于FAM172A核心啟動(dòng)子序列中。這個(gè)實(shí)驗(yàn)說(shuō)明STAT1能夠特異性結(jié)合于FAM172A啟動(dòng)子序列。而在EMSA實(shí)驗(yàn)中,我們?cè)O(shè)計(jì)了一個(gè)能和STAT1結(jié)合位點(diǎn)序列相同的寡聚核苷酸,稱為探針,用于這個(gè)實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)從大腸癌LoVo細(xì)胞中的核提取物,能夠特異結(jié)合于帶標(biāo)簽的探針,這些探針都具有STAT1結(jié)合位點(diǎn)序列,然后我們使用未標(biāo)記的探針進(jìn)行了競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)標(biāo)記的探針超出未標(biāo)記的100倍,這也說(shuō)明STAT1能夠結(jié)合于FAM172A啟動(dòng)子序列,綜上所述,我們從體內(nèi)和體外分別證明了STAT1能夠特異性結(jié)合于FAM172A啟動(dòng)子序列。6、為了明確轉(zhuǎn)錄因子STAT1能否促進(jìn)FAM172A基因的表達(dá),我們進(jìn)行了western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR。我們將STAT1基因過(guò)表達(dá)及干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至大腸癌LoVo細(xì)胞中,發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)STAT1后FAM172A蛋白及mRNA水平均明顯提高,干擾STAT1表達(dá)后,FAM172A蛋白及mRNA水平則出現(xiàn)下調(diào)。這些說(shuō)明轉(zhuǎn)錄因子STAT1能夠促進(jìn)FAM172A的表達(dá)。結(jié)論：1、FAM172A能夠抑制大腸癌細(xì)胞的增殖,并能夠促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的凋亡；2、我們成功克隆并鑒定出FAM172A的啟動(dòng)子區(qū)域(-745bp至+205bp),具有明顯的啟動(dòng)子活性,確定了FAM172A核心啟動(dòng)子區(qū)域位于-112bp/+48bp；3、轉(zhuǎn)錄因子STAT1能夠特異性結(jié)合于FAM172A核心啟動(dòng)子區(qū)域,增強(qiáng)其啟動(dòng)子活性；4、轉(zhuǎn)錄因子STAT1能夠促進(jìn)FAM172A蛋白的表達(dá)；5、這些發(fā)現(xiàn)對(duì)全面認(rèn)識(shí)FAM172A基因的基本功能及了解其轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制有重大意義。
【關(guān)鍵詞】：FAM172A 啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄調(diào)控 STAT1
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 摘要3-9
• ABSTRACT9-18
• 前言18-21
• 第一章 明確FAM172A基因?qū)Υ竽c癌細(xì)胞的抑制作用21-35
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料21-22
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟22-31
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-34
• 1.4 討論34-35
• 第二章 FAM172A基因啟動(dòng)子的初步鑒定及其活性檢測(cè)35-48
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟36-42
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-46
• 2.4 討論46-48
• 第三章 FAM172A核心啟動(dòng)子區(qū)域的鑒定及其初步分析48-61
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料48
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟48-54
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果54-58
• 3.4 討論58-61
• 第四章 轉(zhuǎn)錄因子STAT1對(duì)FAM172A基因的調(diào)控61-70
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料61
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟61-67
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果67-69
• 4.4 討論69-70
• 第五章 全文小結(jié)70-71
• 參考文獻(xiàn)71-75
• 英文縮略詞75-77
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文77-78
• 致謝78-79

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2 耿焱;姜泊;張宏權(quán);賴卓勝;;四分子交聯(lián)體5在大腸癌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)并影響其黏附行為[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

3 文軍寶;聶飚;姜泊;;兩種大腸癌細(xì)胞小鼠肝轉(zhuǎn)移模型的建立及比較[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

4 宋今丹;孫寶棟;正紅梅;玉維琴;王蕓慶;;經(jīng)維甲酸誘導(dǎo)分化的大腸癌細(xì)胞的功能改變[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第七次會(huì)議論文摘要匯編[C];1999年

5 宋今丹;王明武;;大腸癌細(xì)胞膜相關(guān)抗原的光鏡與電鏡研究[A];海峽兩岸電子顯微學(xué)研討會(huì)論文專集[C];1992年

6 陳宏;張振書;張亞歷;周殿元;賴卓勝;;蛋白激酶C對(duì)大腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移特性調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究[A];2000全國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

7 陳宏;張振書;張亞歷;周殿元;賴卓勝;;蛋白激酶C對(duì)大腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移特性調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究　[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2000年

8 方謹(jǐn);王蕓慶;宋今丹;;紫杉醇免疫脂質(zhì)體的制備及其對(duì)人體大腸癌細(xì)胞的體外殺傷作用[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第七次會(huì)議論文摘要匯編[C];1999年

9 肖冰;李恕軍;姜泊;賴卓勝;王亞?wèn)|;張亞歷;張振書;;CD95抑制大腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

10 宋今丹;方瑾;王明武;紀(jì)曉輝;莫志成;黃東陽(yáng);時(shí)偉紅;王增蘊(yùn);王作書;陳立;李豐;王蕓慶;;腫瘤相關(guān)抗原LEA與CEA在大腸癌細(xì)胞表達(dá)的對(duì)比[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 華;日發(fā)現(xiàn)一樹皮能防腫瘤[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉志榮;再生基因1B(REG1B)對(duì)大腸癌細(xì)胞HCT116增殖、遷移及侵襲的生物學(xué)作用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 姜永勝;E3泛素連接酶Nrdp1通過(guò)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP7）信號(hào)通路抑制大腸癌細(xì)胞侵襲的研究[D];山東大學(xué);2015年

3 崔春暉;抗癌蛋白AC-01對(duì)大腸癌細(xì)胞的影響及其機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 曹建彪;糞便大腸癌細(xì)胞納米磁選系統(tǒng)的構(gòu)建及癌相關(guān)抗原檢測(cè)[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 李秀梅;磷脂酶Cγ1在大腸癌細(xì)胞遷移和細(xì)胞—基質(zhì)粘附中的作用及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 李琳娜;青蒿琥酯對(duì)中國(guó)人源性大腸癌細(xì)胞的選擇性抑制作用及相關(guān)分子機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

7 孫嫣;PI3K p85α表達(dá)缺失對(duì)大腸癌細(xì)胞的抗生存作用及其信號(hào)機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

8 代恩勇;Hedgehog通路阻斷對(duì)大腸癌細(xì)胞及干細(xì)胞影響的研究[D];吉林大學(xué);2012年

9 汪砥;瘦素與大腸癌細(xì)胞HCT-116增殖及凋亡的研究[D];中南大學(xué);2012年

10 劉中宏;Survivin shRNA載體的構(gòu)建及其對(duì)大腸癌細(xì)胞體內(nèi)外作用的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 璩輝;生長(zhǎng)抑制因子4對(duì)大腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)和侵襲的作用及其機(jī)制[D];蘇州大學(xué);2016年

2 張毓宸;片仔癀調(diào)控miR-494-3p增加大腸癌細(xì)胞5-氟尿嘧啶敏感性和抑制其轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 錢凱;FAM172A基因功能及其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

4 彭梅;基質(zhì)金屬蛋白酶9對(duì)大腸癌細(xì)胞釋可溶性腫瘤壞死因子受體1的作用[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

5 布威海麗且姆·阿巴拜科日;蜂膠黃酮Pinobanksin-3-acetate對(duì)大腸癌細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究[D];新疆大學(xué);2013年

6 樊婧;大腸癌細(xì)胞MLH1基因甲基化發(fā)生機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2011年

7 胡君;靶向HPSE的RNA干擾對(duì)人大腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2009年

8 張鈺明;大腸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的放射效應(yīng)與大腸癌細(xì)胞相互影響的研究[D];蘇州大學(xué);2015年

9 白鷺鷺;干擾hedgehog信號(hào)通路對(duì)大腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響[D];吉林大學(xué);2011年

10 周永柏;XAF1在胃腸道腫瘤中的表達(dá)及其在大腸癌細(xì)胞中作用的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

本文編號(hào)：1072215