本文關(guān)鍵詞：EZH2通過(guò)調(diào)控miR-125b促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移的初步探究

  更多相關(guān)文章： EZH2 miR-125b 乳腺癌 細(xì)胞增殖 細(xì)胞遷移

【摘要】：背景:乳腺癌是女性最常見(jiàn)的一種惡性腫瘤,嚴(yán)重影響著女性群體的身體健康。EZH2(Enhancer of zeste homolog 2)是果蠅zeste基因增強(qiáng)子的人類(lèi)同源物,PRC2(polycomb repressor complex 2,多梳阻遏蛋白2復(fù)合體)復(fù)合物具有內(nèi)在的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的活性,其中EZH2是PRC2的核心組分,近期表觀遺傳學(xué)研究表明EZH2常與乳腺癌的不良進(jìn)展相關(guān)。MiRNAs(MicroRNAs,微小RNA)是一類(lèi)可以在轉(zhuǎn)錄后水平沉默靶標(biāo)mRNA的非編碼RNA。MiRNAs的異常調(diào)節(jié)在包括乳腺癌的多種疾病發(fā)生發(fā)展的過(guò)程中都十分常見(jiàn)。目的:本研究旨在探討EZH2和miR-125b與乳腺癌之間的關(guān)聯(lián),并初步探究EZH2和miR-125b作用關(guān)系與對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖活性與遷移過(guò)程作用的影響。方法:1.使用免疫組化法和Western blot法分別驗(yàn)證乳腺癌組織、細(xì)胞與癌旁正常組織、細(xì)胞的EZH2表達(dá)水平差異。然后利用實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)了若干不同乳腺細(xì)胞系中miR-125b的mRNA表達(dá)水平趨勢(shì)。2.通過(guò)向不同的乳腺癌細(xì)胞系轉(zhuǎn)染可以靶向抑制EZH2的siRNA(siRNA-EZH2)后利用實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)miR-125b的相對(duì)表達(dá)量。再向非致瘤性乳腺上皮細(xì)胞系轉(zhuǎn)染EZH2質(zhì)粒使之過(guò)表達(dá)后利用實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)miR-125b的相對(duì)表達(dá)量。3.將siRNA-EZH2、miR-125b抑制劑等分組共轉(zhuǎn)染至MDA-MB-231細(xì)胞,使用MTT法檢測(cè)不同處理組細(xì)胞增殖情況變化,采用transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力變化。4.將EZH2質(zhì)粒、miR-125bmimics(增強(qiáng)內(nèi)源性miR-125b功能的模擬生物體內(nèi)源miR-125b)等分組共轉(zhuǎn)染至HMEC細(xì)胞,使用MTT法檢測(cè)不同處理組細(xì)胞增殖情況變化,transwell試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力變化。結(jié)果:1.乳腺癌細(xì)胞或組織中EZH2的表達(dá)水平明顯高于非致瘤性乳腺上皮細(xì)胞或組織而乳腺癌細(xì)胞系中miR-125b水平卻明顯低于非致瘤性乳腺上皮細(xì)胞。2.經(jīng)測(cè),轉(zhuǎn)染siRNA-EZH2的不同乳腺癌細(xì)胞系中miR-125b水平均有不同程度上升;轉(zhuǎn)染EZH2質(zhì)粒的非致瘤性乳腺上皮細(xì)胞系中miR-125b水平則明顯下降。3.在MDA-MB-231細(xì)胞系中,MTT檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染siRNA-EZH2后細(xì)胞增殖能力明顯下降,相應(yīng)的,transwell試驗(yàn)亦顯示細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力下降明顯;而共轉(zhuǎn)染siRNA-EZH2和miR-125b抑制劑組較僅轉(zhuǎn)染siRNA-EZH2組細(xì)胞增殖能力有顯著提高,細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力也提升顯著。4.在HMEC細(xì)胞系中,MTT檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染EZH2質(zhì)粒較對(duì)照組細(xì)胞增殖能力明顯升高;而共轉(zhuǎn)染EZH2質(zhì)粒和miR-125bmimics組較僅轉(zhuǎn)染EZH2質(zhì)粒組相比增殖能力受到明顯抑制。結(jié)論:研究結(jié)果表明,敲低EZH2所導(dǎo)致的細(xì)胞增殖活性與遷移能力的下降可能與其使miR-125b的表達(dá)增加密切相關(guān);過(guò)表達(dá)EZH2所導(dǎo)致的細(xì)胞增殖活性提升可能與其使miR-125b的表達(dá)下調(diào)密切相關(guān)。EZH2或可通過(guò)miR-125b靶向促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移,這將為乳腺癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制提供新的見(jiàn)解,或可為生物靶向治療的應(yīng)用提供新的研究方向。
【關(guān)鍵詞】：EZH2 miR-125b 乳腺癌 細(xì)胞增殖 細(xì)胞遷移
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 1. 引言12-16
• 2. 材料和方法16-31
• 3. 結(jié)果31-40
• 4. 討論40-46
• 5. 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 附錄53-54
• 致謝54-55
• 綜述55-72
• 參考文獻(xiàn)66-72

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本文編號(hào)：1065007