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初步探討rhVEGI-192對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的放射增敏作用及其機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2017-10-19 03:36

  本文關(guān)鍵詞:初步探討rhVEGI-192對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的放射增敏作用及其機(jī)制


  更多相關(guān)文章: 重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子 H22細(xì)胞 放射增敏


【摘要】:目的:通過比較4組不同方法對(duì)昆明鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制程度,探討rh VEGI-192對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤有無放射增敏作用,并對(duì)其放射增敏機(jī)制進(jìn)行初步研究。方法:建立肝癌H22昆明鼠移植瘤模型,待移植瘤最大徑達(dá)到約5mm時(shí),隨機(jī)分為四組,即:空白對(duì)照組,rh VEGI-192組,10Gy組,rh VEGI-192+10Gy組,觀察rh VEGI-192有無放射增敏作用。通過培養(yǎng)包含VEGI-192質(zhì)粒的大腸桿菌,經(jīng)鎳柱過濾、純化等步驟獲得rh VEGI-192,經(jīng)腹腔注射連續(xù)給藥14天,空白對(duì)照組給予等量的PBS溶液。自給藥日起,隔日測(cè)量移植瘤體積和小鼠體重,計(jì)算增敏系數(shù)(SER)。取小鼠脾臟進(jìn)行HE染色,通過觀察生發(fā)中心,分析免疫應(yīng)答情況。取腫瘤組織進(jìn)行免疫熒光染色分析,分析腫瘤微血管情況。并對(duì)移植瘤組織進(jìn)行Western blot分析,檢測(cè)HIF-1a、VEGF、VEGI等的表達(dá)情況。結(jié)果:rh VEGI-192對(duì)肝癌H22移植瘤具有放射增敏作用,增敏系數(shù)(SER)為1.33。與rh VEGI-192組及10Gy組相比,rh VEGI-192+10Gy組對(duì)小鼠移植瘤的生長(zhǎng)抑制更明顯,其中rh VEGI-192顯著抑制血管生成的時(shí)間窗為第5-9天(P=0.048,0.0002,0.025)。另外,腫瘤組織免疫熒光染色分析可見,血管內(nèi)皮細(xì)胞CD31表達(dá)減少,其中在給藥的第5-9天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0129,0.0361,0.0445)。脾臟HE染色顯示,rh VEGI-192能明顯促進(jìn)脾臟生發(fā)中心的形成,增強(qiáng)免疫應(yīng)答反應(yīng)。Western blot結(jié)果顯示,HIF-1a蛋白表達(dá)明顯下調(diào),VEGF表達(dá)下調(diào),而VEGI表達(dá)上調(diào)。結(jié)論:rh VEGI-192具有放射增敏作用,顯著抑制血管生成的時(shí)間窗是第5-9天,其通過改善乏氧、抑制VEGF表達(dá)增強(qiáng)肝癌H22移植瘤的放射敏感性,同時(shí)也能增強(qiáng)免疫應(yīng)答。
【關(guān)鍵詞】:重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子 H22細(xì)胞 放射增敏
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R735.7
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • ABSTRACT4-9
  • 第1章 前言9-12
  • 第2章 材料與方法12-26
  • 2.1 材料12-17
  • 2.1.1 主要儀器和設(shè)備12
  • 2.1.2 主要試劑12-13
  • 2.1.3 實(shí)驗(yàn)藥物13
  • 2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和細(xì)胞系13-14
  • 2.1.5 主要溶液的配制14-17
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法17-26
  • 2.2.1 移植瘤模型的建立及分組17
  • 2.2.2 藥物及給藥方法17-19
  • 2.2.3 照射條件及照射方法19-20
  • 2.2.4 測(cè)量方法及標(biāo)本處理20
  • 2.2.5 評(píng)估指標(biāo)20
  • 2.2.6 HE染色20-22
  • 2.2.7 免疫熒光染色22-23
  • 2.2.8 western blot23-25
  • 2.2.9 統(tǒng)計(jì)分析25-26
  • 第3章 結(jié)果與分析26-34
  • 3.1 純化獲得rhVEGI-19226
  • 3.2 移植瘤生長(zhǎng)延遲時(shí)間和增敏系數(shù)26-27
  • 3.3 移植瘤生長(zhǎng)曲線27-29
  • 3.4 小鼠體重變化曲線29
  • 3.5 HE染色結(jié)果29-30
  • 3.6 免疫熒光結(jié)果30-32
  • 3.7 western blot檢測(cè)結(jié)果32-34
  • 第4章 討論34-38
  • 第5章 結(jié)論與展望38-39
  • 致謝39-40
  • 參考文獻(xiàn)40-43
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
  • 綜述44-52
  • 參考文獻(xiàn)50-52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 彭芳;王謹(jǐn);鄒毅;包勇;黃文林;陳光明;羅顯榮;陳明;;重組內(nèi)皮抑素對(duì)腫瘤血管結(jié)構(gòu)和乏氧改善作用的實(shí)驗(yàn)觀察[J];中華放射腫瘤學(xué)雜志;2011年01期

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本文編號(hào):1058830

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