發(fā)布時(shí)間：2017-10-15 07:45

  本文關(guān)鍵詞：胃癌中LGR5與Treg細(xì)胞的預(yù)后意義及其作用機(jī)制探索

  更多相關(guān)文章： 胃癌 LGR5 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β 預(yù)后

【摘要】：[目的] 多富含亮氨酸重復(fù)單位的G蛋白偶聯(lián)受體5(leucine rich repeat containing G protein coupled receptor5, LGR5)是近年來(lái)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物研究的熱點(diǎn)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)可分泌多種可溶性因子來(lái)調(diào)節(jié)免疫微環(huán)境,在腫瘤免疫逃避中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)的目的是研究胃癌組織中LGR5的表達(dá)和Treg細(xì)胞之間的聯(lián)系,并研究TGF-β蛋白對(duì)胃癌細(xì)胞中LGR5表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及其潛在機(jī)制。 [方法] 本研究采用2009年2月至2010年3月在我院確診的100例胃癌病人石蠟標(biāo)本及2013年5月至2014年5月在我院確診的69例胃癌病人石蠟標(biāo)本及新鮮組織標(biāo)本。通過(guò)免疫組化觀察胃癌組織中LGR5的表達(dá)及Treg細(xì)胞的數(shù)量,并分析與預(yù)后的關(guān)系。運(yùn)用流式微珠陣列(cytometric bead array,CBA)檢測(cè)胃癌組織中Thl/Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL-2, IL-4,IL-6, IL-10, TNF以及IFN-γ的表達(dá)；運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)胃癌組織中TGF-β的表達(dá)。通過(guò)在胃癌細(xì)胞培養(yǎng)基中加入TGF-β蛋白和TGF-β/ALK5/Smad2信號(hào)通路抑制劑SB431542,觀察胃癌細(xì)胞中LGR5及β-catenin的表達(dá)變化。 [結(jié)果] 免疫組化結(jié)果顯示,LGR5高表達(dá)組患者生存時(shí)間較LGR5低表達(dá)組明顯縮短(五年總生存率：53%vs.79%；P=0.0057)；同時(shí),高Treg細(xì)胞數(shù)組患者生存較低Treg細(xì)胞數(shù)組明顯縮短(五年總生存率：54%vs.76%；P=0.0167)。LGR5高表達(dá)組胃癌組織中Treg細(xì)胞數(shù)(X±SD：12.94±0.8673)相比于LGR5低表達(dá)組(X±SD：7.051±0.5915)明顯增高,兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.0001)。LGR5高低表達(dá)兩組間Thl/Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF以及IFN-Y表達(dá)并無(wú)明顯差異,而TGF-β1在LGR5高表達(dá)組胃癌組織中的表達(dá)量明顯高于LGR5低表達(dá)組(P0.0001)。在胃癌細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,加入外源性TGF-β1蛋白后,LGR5的表達(dá)上調(diào),同時(shí),β-catenin的表達(dá)也隨之上調(diào),而加入TGF-β/ALK5/Smad2信號(hào)通路的特異性拮抗劑SB431542之后,這種上調(diào)效應(yīng)減弱。 [結(jié)論] 胃癌組織中表達(dá)的LGR5強(qiáng)度可視為一個(gè)潛在的預(yù)后指標(biāo),并有望成為下一個(gè)胃癌治療的生物靶點(diǎn),且與Treg細(xì)胞呈一定相關(guān)性,后者可能通過(guò)分泌TGF-β蛋白上調(diào)胃癌細(xì)胞中TGF-β/ALK5/Smad2信號(hào)通路,進(jìn)而上調(diào)WNT信號(hào)通路,促進(jìn)其下游LGR5蛋白的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 LGR5 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 中英文縮略詞9-11
• 目次11-12
• 1 引言12-14
• 2 材料與方法14-24
• 2.1 標(biāo)本來(lái)源14-15
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器15-16
• 2.3 主要實(shí)驗(yàn)材料與試刻16-17
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法17-22
• 2.5 統(tǒng)計(jì)方法22-24
• 3 結(jié)果24-34
• 3.1 病人臨床特征24
• 3.2 胃癌組織中LGR5表達(dá)情況以及Treg細(xì)胞數(shù)與胃癌病人預(yù)后分析24-29
• 3.3 LGR5高表達(dá)組胃癌組織間Treg細(xì)胞數(shù)量高于LGR5低表達(dá)組29-31
• 3.4 LGR5高表達(dá)組胃癌組織中TGF-β表達(dá)量高于LGR5低表達(dá)組31-32
• 3.5 TGF-β1通過(guò)TGF-β/ALK5/Smad2信號(hào)通路與WNT信號(hào)通路的相互作用促進(jìn)LGR5的表達(dá)32-34
• 4 討論34-37
• 5 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-43
• 綜述43-57
• 參考文獻(xiàn)50-57
• 作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間所取得的科研成果57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 林月媛;鄭波;老貓;;峰會(huì)俱樂(lè)部 邂逅皇室禮遇[J];商務(wù)獎(jiǎng)勵(lì)旅行;2007年10期

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本文編號(hào)：1035937