發(fā)布時間：2017-10-15 01:40

  本文關鍵詞：C1QBP在腎癌發(fā)展進程中的作用

  更多相關文章： C1QBP 腎癌 增殖 趨化運動 侵襲 黏附

【摘要】：目的:腎癌在泌尿系統(tǒng)腫瘤中很常見,在我國有很高的發(fā)病率,是一種嚴重威脅人類健康的疾病。而腫瘤的發(fā)展與腫瘤細胞的增殖、趨化、侵襲以及黏附能力均有重要關系。腎癌靶向治療尚有許多未知領域需要進一步探索。因此,目前亟需進一步探討腎癌的發(fā)展機制并探索新的生物靶點。以往的研究顯示C1QBP在多種惡性腫瘤中的表達增多,同時也有報道顯示C1QBP在宮頸癌中低表達,說明C1QBP在腫瘤中的表達及對腫瘤生物學行為的調節(jié)有組織特異性,但目前有關C1QBP在腎癌中的研究尚未見報道。因此,本研究將檢測C1QBP在腎癌中的表達情況,探討C1QBP在腎癌發(fā)展中對腎癌細胞增殖、趨化、侵襲以及黏附能力的影響,初步明確C1QBP在腎癌發(fā)展中的作用。方法:采用Western Blotting、Realtime PCR、免疫組化的方法比較C1QBP在腎癌及癌旁組織中的表達水平;統(tǒng)計學分析C1QBP表達與臨床病理參數(shù)之間的相關性。應用Realtime PCR的方法檢測C1QBP在正常腎上皮細胞和腎癌細胞系中的表達水平。應用慢病毒載體介導的RNA干擾技術構建C1QBP穩(wěn)定降表達的人腎癌786-0細胞系,用Western Blotting和Realtime PCR的方法驗證C1QBP表達水平。通過CCK8實驗、趨化運動實驗、Matrigel侵襲實驗和細胞黏附實驗分別檢測C1QBP降表達對人腎癌786-0細胞系的增殖能力、EGF誘導的趨化運動能力、侵襲能力和EGF誘導的黏附能力的影響。通過基因芯片檢測,分析C1QBP降表達對人腎癌786-0細胞系基因表達的影響,Realtime PCR驗證差異基因表達。通過Western Blotting檢測分析C1QBP調控腎癌黏附功能的分子機制。SCID小鼠體內實驗研究C1QBP降表達對人腎癌786-0細胞系生長和轉移的影響,并通過免疫組化檢測C1QBP降表達對增殖相關抗原PCNA表達水平的影響。結果:1.腎癌組織中C1QBP的RNA及蛋白表達量低于癌旁組織,且C1QBP表達與患者臨床組織學分期和術后生存率顯著相關。2.C1QBP在腎癌細胞中的表達低于腎上皮細胞,且隨著腎癌細胞惡性程度的增加C1QBP表達逐漸降低。3.應用慢病毒介導的RNA干擾技術成功建立C1QBP穩(wěn)定降表達的腎癌786-0細胞系,Western Blotting和Realtime PCR驗證C1QBP蛋白和基因表達均明顯下降。4.C1QBP降表達的腎癌786-0細胞系與對照組相比增殖能力、EGF誘導的趨化運動能力、細胞侵襲能力和EGF誘導的黏附能力均明顯增強。5.通過基因芯片分析,C1QBP敲除會影響細胞黏附相關基因的表達,通過Realtime PCR進一步檢測了8個與黏附相關的基因,其中L1CAM在786-0-shC1QBP細胞中的表達顯著增加。6.C1QBP敲除后腎癌細胞中β-catenin表達增高,GSK3蛋白磷酸化水平也增高。7.C1QBP降表達促進種植瘤生長和轉移,并且種植瘤中PCNA表達明顯高于對照組。結論:1.與癌旁組織相比,C1QBP在腎癌組織標本中表達較低,且與腫瘤病人的組織學分期和術后生存率相關,此外隨著腫瘤細胞惡性程度增高C1QBP表達水平降低。2.通過降低C1QBP的表達,可以促進腎癌細胞的增殖、趨化、侵襲能力。3.C1QBP降表達可以增強腎癌細胞的黏附能力,可能是通過激活Wnt通路相關蛋白,上調LICAM發(fā)揮生物學作用。4.C1QBP降表達可以促進腎癌細胞在免疫缺陷小鼠體內的增殖能力和轉移能力,表明C1QBP是調節(jié)腎癌發(fā)展的一個非常關鍵的因子。C1QBP不但可以成為腎癌診斷和預后的新的標記物,更有望為腎癌的治療提供新的分子靶點。
【關鍵詞】：C1QBP 腎癌 增殖 趨化運動 侵襲 黏附
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-18
• 研究現(xiàn)狀、成果11-16
• 研究目的、方法16-18
• 對象和方法18-41
• 結果41-52
• 討論52-56
• 結論56-57
• 參考文獻57-63
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明63-64
• 綜述 C1QBP在感染炎癥和癌癥中的作用64-79
• 綜述參考文獻73-79
• 致謝79-80
• 個人簡歷80

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本文編號：1034361