發(fā)布時(shí)間：2017-10-14 11:09

  本文關(guān)鍵詞：缺氧誘導(dǎo)因子2（HIF-2α）在胰腺癌中調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的機(jī)制研究

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【摘要】：第一部分缺氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2α)在胰腺癌中的表達(dá)及臨床意義目的研究缺氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2α)在胰腺癌和癌旁非癌胰腺組織中的表達(dá),并進(jìn)一步探究HIF-2α在胰腺癌中的臨床意義。方法(1)用免疫組織化學(xué)法(immuno histo chemistry,IHC)檢測70例胰腺癌患者癌組織和癌旁非癌胰腺組織標(biāo)本中HIF-2α蛋白的表達(dá)。(2)分析70例胰腺癌組織中HIF-2α表達(dá)與臨床病理因素之間的相關(guān)性。(3)用IHC檢測70例胰腺癌中上皮鈣依賴粘附蛋白(E-cadherin)表達(dá)情況,并分析E-cadherin與HIF-2α表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果(1)HIF-2α主要表達(dá)于細(xì)胞胞質(zhì)及胞核,在胰腺癌組織中陽性率為67.1%(47/70),在相應(yīng)非癌胰腺組織中陽性率為11.4%(8/70)。HIF-2α在胰腺癌組織中的陽性率明顯高于非癌胰腺組織,兩者的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=45.549,P0.05),而且HIF-2α的表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)胰腺癌患者中胰腺癌組織的E-cadherin表達(dá)水平(21/70)明顯低于相應(yīng)癌旁正常胰腺組織(43/70),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.931,P0.05)。(3)胰腺癌組織中HIF-2α的表達(dá)與E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(Spearman,r=-0.394,P0.05)。結(jié)論HIF-2α蛋白在胰腺癌中高表達(dá),并且胰腺癌組織中HIF-2α蛋白的高表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。E-cadherin在胰腺癌組織中低表達(dá),且胰腺癌組織中HIF-2α的表達(dá)與E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性,提示在胰腺癌中HIF-2α可能通過調(diào)控E-cadherin的表達(dá)促進(jìn)EMT的發(fā)生,參與胰腺癌的侵襲及轉(zhuǎn)移。第二部分在胰腺癌細(xì)胞中HIF-2α調(diào)控EMT的作用及其調(diào)控機(jī)制研究目的觀察在胰腺癌細(xì)胞中HIF-2α對(duì)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition,emt)的作用,并進(jìn)一步探討可能的調(diào)控機(jī)制。方法(1)構(gòu)建針對(duì)HIF-2α基因的小干擾rna載體和過表達(dá)載體,通過慢病毒轉(zhuǎn)染人胰腺癌細(xì)胞,采用蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot)檢測靶向調(diào)控HIF-2α的效果。(2)在胰腺癌細(xì)胞中調(diào)控HIF-2α的表達(dá)后,通過侵襲實(shí)驗(yàn)(cell invasion assay)和劃痕實(shí)驗(yàn)(wound healing assay)觀察HIF-2α對(duì)胰腺癌細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響,并通過western blot檢測HIF-2α對(duì)emt相關(guān)蛋白的作用。(3)在胰腺癌細(xì)胞中調(diào)控HIF-2α后通過westernblot檢測emt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子twist1/2表達(dá)的變化。(4)通過染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,chip)方法研究twist1/2與emt特異性蛋白e-cadherin的作用與位點(diǎn)。(5)在胰腺癌組織中通過ihc檢測twist1/2和e-cadherin的表達(dá),分析其相關(guān)性。結(jié)果(1)上調(diào)HIF-2α表達(dá)后,胰腺癌細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng),下調(diào)HIF-2α表達(dá)后胰腺癌細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移能力下降。(2)在胰腺癌細(xì)胞中HIF-2α調(diào)控emt相關(guān)蛋白的表達(dá),即上調(diào)HIF-2α后,e-caherin表達(dá)下降(p0.01),mmp2和mmp9的表達(dá)上升(p0.01);下調(diào)HIF-2α后,e-caherin表達(dá)上升(p0.01),而mmp2和mmp9的表達(dá)下降(p0.01)。(3)在胰腺癌細(xì)胞中HIF-2α調(diào)控twist1/2的表達(dá),twist2可與e-cadherin的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合。結(jié)論在胰腺癌細(xì)胞中HIF-2α參與emt的發(fā)生發(fā)展,促進(jìn)胰腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。emt轉(zhuǎn)錄因子twist2可與e-cadherin的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合,HIF-2α可能是通過調(diào)控twist2結(jié)合e-cadherin,參與胰腺癌emt的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-15
• 參考文獻(xiàn)12-15
• 第一部分HIF-2α在胰腺癌中的表達(dá)及臨床意義15-26
• 材料15-16
• 方法16-18
• 結(jié)果18-22
• 討論22-24
• 結(jié)論24
• 參考文獻(xiàn)24-26
• 第二部分 在胰腺癌細(xì)胞中HIF-2α調(diào)控EMT的作用及其調(diào)控機(jī)制研究26-45
• 材料26-28
• 方法28-35
• 結(jié)果35-41
• 討論41-43
• 結(jié)論43
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 全文結(jié)論45-46
• 綜述46-56
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 全文縮略詞56-57
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文57-58
• 致謝58-59

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2 姜瑩;李曉燕;何慶南;譚愛斌;周頻;易著文;;白蛋白超載對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞EMT及激素耐藥相關(guān)因素的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2010年21期

3 林媛媛;婁遠(yuǎn)蕾;梁昌達(dá);謝淑佩;謝安;;人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞自然分化過程中EMT變化研究[J];實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2013年06期

4 周明利;盧先州;張樹友;;HIF-1α與EMT在腫瘤中的作用及意義研究進(jìn)展[J];中國普通外科雜志;2012年09期

5 李俊琴;李華;;脂肪酸合成酶在腫瘤EMT中作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2014年08期

6 史秀芬;孫麗華;;EMT相關(guān)不孕癥20例治療觀察[J];山東醫(yī)藥;2007年12期

7 陳靖;樊英;李佳;黃仲曦;姚開泰;;鼻咽癌EMT相關(guān)基因的篩選及生物信息學(xué)分析[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2010年04期

8 梁革;;EMT相關(guān)分子與卵巢癌的研究進(jìn)展[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2012年24期

9 姚嬋;來茂德;;上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)及其分子機(jī)制[J];國際遺傳學(xué)雜志;2006年04期

10 夏慶華;蔣偉;;丙戊酸逆轉(zhuǎn)EMT抑制前列腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移[J];泌尿外科雜志(電子版);2012年01期

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1 徐向明;林建江;;EMT和腫瘤進(jìn)展[A];2011年浙江省肛腸外科學(xué)術(shù)大會(huì)暨結(jié)直腸肛門疾病診治新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年

2 任陳;申洪;;上皮——間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)與腫瘤的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 沈源明;周建松;王培;李陽;葉楓;王芬芬;萬小云;程曉東;呂衛(wèi)國;謝幸;;MiR-375調(diào)控EMT參與宮頸癌泰素繼發(fā)耐藥[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會(huì)議婦科腫瘤會(huì)場（婦科腫瘤學(xué)組、婦科病理學(xué)組）論文匯編[C];2012年

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1 記者 馬曉芳;揭秘華為架構(gòu)變動(dòng)：與EMT并行 董事會(huì)走向臺(tái)前[N];第一財(cái)經(jīng)日報(bào);2011年

2 ;愛立信力助愛沙尼亞EMT推出商用HSDPA[N];人民郵電;2006年

3 記者 馬曉芳;董事會(huì)取代EMT 華為向公眾公司邁進(jìn)[N];第一財(cái)經(jīng)日報(bào);2011年

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1 許金紅;姜黃素-3對(duì)高轉(zhuǎn)移非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞EMT的作用及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 劉茜;胃癌中AURKA通過組蛋白修飾調(diào)節(jié)EMT進(jìn)程的機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

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4 翟小龍;子宮內(nèi)膜異位癥的中西醫(yī)研究近況及琥珀散治療EMT的臨床分析[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2001年

5 戴育蘭;補(bǔ)腎調(diào)周化瘀法治療EMT的臨床研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2006年

6 徐思云;人多聚免疫球蛋白受體pIgR介導(dǎo)EMT的作用研究及機(jī)制初探[D];中國海洋大學(xué);2008年

7 周鑫;烯醇化酶ENO1影響非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞EMT的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

8 張翠;上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）與胃癌耐藥和轉(zhuǎn)移關(guān)系的初步研究[D];延安大學(xué);2012年

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10 姜?jiǎng)?寬頻EMT的電路和信號(hào)處理研究[D];天津大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：1030698