本文關(guān)鍵詞：去泛素化酶USP3促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的機(jī)制研究

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【摘要】：目的:探討ubiquitin specific protease 3(USP3)經(jīng)由murine double minute 2(MDM2),促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制,為USP3作為肝癌分子靶向治療的靶點(diǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1、免疫共沉淀技術(shù)檢測(cè)內(nèi)源性USP3與MDM2在肝癌細(xì)胞株Hep G2和正常肝細(xì)胞株HL-7702中以及外源性USP3與MDM2在肝癌細(xì)胞株Hep G2中的相互作用情況。2、Western blot技術(shù)檢測(cè)USP3去除MDM2分子上聚泛素化鏈的類型,以及USP3的兩種失活突變體H56A和C168S對(duì)MDM2的去泛素化是否有影響。3、Western blot技術(shù)檢測(cè)USP3是否能夠穩(wěn)定Hep G2細(xì)胞中MDM2的蛋白水平,以及USP3的兩種失活突變體H56A和C168S對(duì)USP3穩(wěn)定MDM2的能力是否有影響。4、Cell Counting Kit 8(CCK8)法檢測(cè)USP3及USP3的兩種失活突變體H56A和C168S對(duì)Hep G2細(xì)胞增殖的影響,以及加入MDM2抑制劑Nutlin-3后USP3及USP3的兩種失活突變H56A和C168S對(duì)Hep G2細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果:1、內(nèi)源性和外源性USP3與MDM2在Hep G2細(xì)胞中均具有相互作用,但是內(nèi)源性USP3與MDM2在HL-7702細(xì)胞中幾乎沒有相互作用。2、USP3能夠通過去除MDM2蛋白分子上K48連接的聚泛素化鏈從而穩(wěn)定MDM2蛋白,而USP3的兩種失活突變體H56A和C168S則不具有此活性。3、USP3能提高Hep G2細(xì)胞的增殖而USP3的兩種失活突變H56A和C168S不具有此活性,但是當(dāng)MDM2的抑制劑Nutlin-3存在時(shí)USP3也失去提高Hep G2細(xì)胞增殖的能力。結(jié)論:1、MDM2是USP3的直接靶蛋白。2、USP3介導(dǎo)MDM2分子上K48連接的聚泛素化鏈的去泛素化以穩(wěn)定MDM2蛋白。3、USP3通過MDM2促進(jìn)Hep G2細(xì)胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 USP3 MDM2 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-11
• 第一部分 MDM2作為USP3直接靶蛋白的驗(yàn)證11-31
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料11-15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-28
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-29
• 1.4 討論29-31
• 第二部分 USP3通過特異性切除MDM2分子上K48聚泛素鏈以穩(wěn)定MDM2蛋白31-40
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料31-32
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法32-36
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-38
• 2.4 討論38-40
• 第三部分 USP3通過MDM2蛋白促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖40-44
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料40-41
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法41-42
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-43
• 3.4 討論43-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-50
• 文獻(xiàn)綜述50-63
• 參考文獻(xiàn)57-63
• 中英文對(duì)照縮略語詞表63-65
• 攻讀碩士期間公開發(fā)表的論文65-66
• 致謝66-67

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2 孫宏偉;沈鋒;吳孟超;;瞬時(shí)受體勢(shì)C可能存在介導(dǎo)肝癌細(xì)胞增殖的作用[J];腫瘤;2006年04期

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6 康九紅,魏亞明,鄭榮梁;二乙基二硫代氨基甲酸鈉對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖、再分化與凋亡的作用(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2001年09期

7 胡輝,荊緒斌,蔡先彬;過氧化氫在乙醇抑制肝癌細(xì)胞增殖中的作用[J];臨床消化病雜志;2005年03期

8 史冬梅;馬天樂;涂水平;譚繼宏;喬敏敏;章永平;江石湖;;X-染色體相關(guān)凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1抑制肝癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華消化雜志;2006年10期

9 趙新;;兒茶素抑制肝癌細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡作用研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2012年10期

10 王迎春;劉炎芳;邢蘭花;楊旭;李小歡;;曲古抑菌素A對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖凋亡影響及其機(jī)制的探討[J];中華腫瘤防治雜志;2013年06期

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1 徐艷敏;錢程;;低濃度阿霉素促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

2 田晶;周士勝;陶凌;董玲;楊安鋼;;尼氟滅酸對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響[A];中國生理學(xué)會(huì)第21屆全國代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

3 秦敏;白文元;譚莉莉;;白藜蘆醇抑制人肝癌細(xì)胞增殖與促進(jìn)其凋亡的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

4 鐘寧;董明;程寶泉;張尚忠;李延青;;大蒜素和阿霉素對(duì)裸小鼠皮下移植肝癌細(xì)胞增殖、分化和凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

5 陶立平;陶佳南;陶富山;;寬帶中遠(yuǎn)紅外線輻射對(duì)肝癌細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原的研究[A];第八屆全國紅外加熱暨紅外醫(yī)學(xué)發(fā)展研討會(huì)論文及論文摘要集[C];2001年

6 劉珊林;;抗氧化干預(yù)對(duì)腫瘤生長和肝癌細(xì)胞增殖的抑制作用研究[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊(cè)）[C];1999年

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10 巴一;吳雄志;謝廣茹;陳丹;王偉;;守宮硫酸多糖對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖與分化的影響[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

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1 何德功;日發(fā)現(xiàn)致腸癌和肝癌細(xì)胞增殖的酶[N];中國勞動(dòng)保障報(bào);2004年

2 ;乙型肝炎病毒x蛋白對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

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1 楊思俊;癌基因RMP與抑癌基因PTEN的相互拮抗作用及其對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響[D];蘇州大學(xué);2015年

2 馬孝明;MY06在肝癌細(xì)胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

3 王貴明;SOX18基因?qū)Ω伟┘?xì)胞增殖、遷移及侵襲作用的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

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5 黃健;1,25-二羥維生素D3下調(diào)HDAC2抑制肝癌細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡的作用及機(jī)制研究[D];貴州醫(yī)科大學(xué);2016年

6 周彥明;曲格列酮抑制肝癌細(xì)胞增殖及其作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 崔越宏;17AAG對(duì)肝癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的抑制及其機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

8 魏雙;Ku80分子對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

9 孫慧燕;Hsa-miR-486-5p抑制肝癌細(xì)胞增殖及侵襲的作用及機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

10 路欣;HSD17B4促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖及其機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

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1 肖澤林;乙肝病毒X蛋白通過SPHK1促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖的作用及其分子機(jī)制的研究[D];南開大學(xué);2015年

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5 陳乾;雙色熒光示蹤肝癌模型的特性分析及miR-146b-5p影響肝癌細(xì)胞增殖、遷移能力的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2016年

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