人肺腺癌放射抗拒細(xì)胞株H1299R的建立及miR-183調(diào)控HIF-1α影響H1299R放射敏感性的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2017-10-12 09:31
本文關(guān)鍵詞:人肺腺癌放射抗拒細(xì)胞株H1299R的建立及miR-183調(diào)控HIF-1α影響H1299R放射敏感性的初步研究
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【摘要】:目的:在乏氧微環(huán)境中,腫瘤細(xì)胞可通過缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)高表達(dá)來維持其氧和代謝的穩(wěn)定,促進(jìn)自身生長和轉(zhuǎn)移,從而產(chǎn)生放療抵抗導(dǎo)致治療失敗。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)mi R-183可調(diào)控HIF-1α,但它們與放射敏感性之間的關(guān)系尚未闡明。本研究將在建立人肺腺癌細(xì)胞放射抗拒模型的基礎(chǔ)上,通過干預(yù)mi RNA-183的表達(dá),觀察細(xì)胞放射敏感性的變化,初步探討mi R-183與HIF-1α在放療抵抗中的關(guān)系。方法:分別通過常規(guī)分割法與亞致死劑量法誘導(dǎo)出人肺腺癌H1299放射抗拒細(xì)胞,克隆形成實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證放射抗拒性,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期與凋亡;慢病毒轉(zhuǎn)染H1299放射抗拒細(xì)胞,RT-PCR分別檢測(cè)mi R-183、HIF-1αm RNA表達(dá),CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。結(jié)果:常規(guī)分割法(2 Gy)照射15次后的H1299R-2 Gy細(xì)胞SF2、D0等放射敏感性參數(shù)較親本細(xì)胞倍數(shù)最多,細(xì)胞存活肩區(qū)最寬,放射抗拒性最強(qiáng),命名為H1299R細(xì)胞;CCK-8實(shí)驗(yàn)及流式實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,H1299R細(xì)胞與親本H1299細(xì)胞相比具有顯著的放射抗拒性(P0.05);RT-PCR檢測(cè)H1299R細(xì)胞中mi R-183與HIF-1αm RNA水平相對(duì)H1299細(xì)胞均呈高表達(dá)(P0.05);將下調(diào)mi R-183的慢病毒轉(zhuǎn)染H1299R細(xì)胞后,HIF-1αm RNA的水平也相對(duì)呈低表達(dá)(P0.05),增殖曲線表明下調(diào)mi R-183后H1299R細(xì)胞對(duì)X射線的敏感性與對(duì)照組相比無顯著差異(P0.05)。結(jié)論:常規(guī)分割照射法可以成功構(gòu)建人肺腺癌抗拒細(xì)胞株,抗拒株相對(duì)親本株對(duì)X射線具有更強(qiáng)的放射抵抗性;腫瘤細(xì)胞對(duì)X射線抗拒與HIF-1α的高表達(dá)有關(guān),且mi R-183可能通過調(diào)控HIF-1α的表達(dá)影響腫瘤細(xì)胞的放射敏感性。
【關(guān)鍵詞】:乏氧 miR-183 HIF-1α 放射抗拒細(xì)胞 放射敏感性
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R734.2
【目錄】:
- 中英縮略詞對(duì)照表4-5
- 中文摘要5-6
- 英文摘要6-8
- 前言8-10
- 材料與方法10-20
- 結(jié)果20-32
- 討論32-36
- 結(jié)論36-37
- 參考文獻(xiàn)37-43
- 綜述43-56
- 參考文獻(xiàn)49-56
- 致謝56-57
- 作者簡(jiǎn)介57
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 莊喜兵;喬田奎;許國雄;陳學(xué);袁素娟;張琪;邢娜;陳偉;;放射抗拒Lewis肺癌細(xì)胞系的建立[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2015年11期
2 郭亞;朱小東;曲頌;李齡;葛蓮英;黃詩婷;趙偉;蘇芳;李燁;;沉默STAT1基因增強(qiáng)放射抗拒鼻咽癌CNE-2R細(xì)胞放射敏感性[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2015年05期
,本文編號(hào):1017959
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