本文關(guān)鍵詞：ORAI1與結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480生物學(xué)特性關(guān)系的研究

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【摘要】：目的：應(yīng)用RNA干擾技術(shù)沉默ORAI1基因的表達(dá),探討ORAI1對結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480增殖、轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制。方法：以重組慢病毒感染SW480細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)設(shè)對照組、空病毒組、干擾組,分別用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western- blot檢測三組細(xì)胞中ORAI1基因mRNA和蛋白的表達(dá)變化,MTT法、平板克隆、倍增時(shí)間檢測三組細(xì)胞的增殖情況；Transwell小室、粘附實(shí)驗(yàn)、血管形成及擬態(tài)分別檢測細(xì)胞侵襲、遷移能力,同、異種細(xì)胞間粘附及血管生成能力；流式細(xì)胞儀檢測其周期變化,激光共聚焦顯微鏡檢測三組細(xì)胞中鈣庫調(diào)節(jié)的鈣內(nèi)流SOCE的差異,Western-blot法檢測三組細(xì)胞中ERK1/2、p-ERK1/2、CyclinD1、MMP-2、VEGF和E-cadherin蛋白的表達(dá)結(jié)果：SW480轉(zhuǎn)染ORAI1干擾慢病毒72h后,可見明顯的熒光表達(dá)；較空病毒組和對照組,干擾組細(xì)胞ORAI1的表達(dá)明顯降低(P0.01),細(xì)胞生長減慢(P0.05),克隆形成能力減弱(P0.01),倍增時(shí)間延長(P0.01)；細(xì)胞侵襲和遷移能力減弱(P0.01)；同種細(xì)胞粘附能力增強(qiáng)(P0.05)；異種細(xì)胞粘附能力減弱(P0.05)；血管生成能力減弱(P0.01)；G1期細(xì)胞比例顯著增高(P0.05)；SOCE內(nèi)流峰值降低(P0.05)；p-ERK1/2、CyclinD1、MMP-2和VEGF的表達(dá)降低(P0.01)、E-cadherin表達(dá)增加(P0.01)。結(jié)論：ORAI1可以促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480的增殖和轉(zhuǎn)移,其機(jī)制可能與SOCE增加有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：ORAI1 SW480 SOCE 增殖 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-11
• 1 材料與方法11-20
• 2 結(jié)果20-28
• 3 討論28-32
• 全文總結(jié)32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 文獻(xiàn)綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 致謝44-45
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45

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本文編號：1016339