本文關(guān)鍵詞：胡椒堿聯(lián)合順鉑對肺腺癌A549細(xì)胞生長及MMP-2、VEGF表達(dá)的研究

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【摘要】：目的:觀察不同濃度胡椒堿、順鉑單獨(dú)或者兩藥聯(lián)用對肺腺癌A549細(xì)胞生長和凋亡的效應(yīng)及MMP-2和VEGF表達(dá)狀況的變化,并探討可能的協(xié)同效應(yīng)和作用機(jī)制,從而為胡椒堿與順鉑的聯(lián)合方案在肺癌治療方面的應(yīng)用提供一種新的線索和策略。方法:1.MTT法檢測不同濃度的胡椒堿(12.5、25、50、100ug/ml)、順鉑(0.5、1、2、4ug/ml)及聯(lián)合用藥(50ug/ml胡椒堿和2ug/ml順鉑)對A549細(xì)胞24h、48h、72h的生長抑制的效應(yīng)。2.流式細(xì)胞術(shù)分析胡椒堿(50ug/ml)、順鉑(2ug/ml)及二者聯(lián)用(50ug/ml胡椒堿和2ug/ml順鉑)對A549細(xì)胞48h的凋亡率的影響。3.RT-PCR測定A549細(xì)胞經(jīng)胡椒堿(50ug/ml)、順鉑(2ug/ml)、兩藥聯(lián)用(50ug/ml胡椒堿和2ug/ml順鉑)分別處理48h的MMP-2 m RNA和VEGF m RNA的表達(dá)狀況的變化。結(jié)果:1.胡椒堿(12.5、25、50、100ug/ml)、順鉑(0.5、1、2、4ug/ml)都具有抑制A549細(xì)胞生長的效應(yīng),并且隨處理時(shí)間的延長和藥物濃度的增大,其抑制效應(yīng)呈增強(qiáng)趨勢,與對照組的差異顯著(P0.05);聯(lián)合組(50ug/ml胡椒堿和2ug/ml順鉑)的抑制效應(yīng)較為明顯,比單用胡椒堿(50ug/ml)、順鉑(2ug/ml)的效應(yīng)顯著,表現(xiàn)協(xié)同的抑瘤作用(P0.05),其中聯(lián)合組處理72h呈現(xiàn)極其顯著的抑制效應(yīng)。2.胡椒堿(50ug/ml)、順鉑(2ug/ml)和二者聯(lián)合作用A549細(xì)胞48h,凋亡率分別是(10.67±0.97)%、(16.56±0.56)%、(55.52±1.33)%,均顯著高于對照組的(0.33±0.55)%(P0.05);聯(lián)合組較單用胡椒堿、順鉑的凋亡率均表現(xiàn)較為明顯的提高(P0.05)。3.胡椒堿(50ug/ml)與順鉑(2ug/ml)分別處理A549細(xì)胞48h,MMP-2 m RNA和VEGF m RNA的表達(dá)量都較對照組減少(P0.05);而聯(lián)合用藥比單藥組的MMP-2 m RNA和VEGF m RNA的表達(dá)下調(diào)更加明顯(P0.05)。結(jié)論:1.胡椒堿、順鉑都具有抑制A549細(xì)胞生長的效應(yīng),與時(shí)間和濃度均存在一定地依賴關(guān)系,而且兩藥的聯(lián)合效應(yīng)比單用效應(yīng)顯著。2.胡椒堿、順鉑都具有誘發(fā)A549細(xì)胞凋亡的效應(yīng),并且兩藥聯(lián)用的凋亡率顯著較單藥提高。3.胡椒堿、順鉑都具有控制A549細(xì)胞MMP-2 m RNA和VEGF m RNA表達(dá)降低的效應(yīng),而且兩藥聯(lián)用的水平下調(diào)最為明顯,進(jìn)而可能阻止肺癌轉(zhuǎn)移和血管發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：胡椒堿 順鉑 A549細(xì)胞 MMP-2 VEGF
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 中英文縮寫表7-11
• 第一章 前言11-15
• 1.1 研究背景11-14
• 1.2 研究目的及意義14-15
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 2.1 細(xì)胞株15
• 2.2 藥物15
• 2.3 試劑15
• 2.4 儀器15-17
• 第三章 實(shí)驗(yàn)方法17-21
• 3.1 試劑配制17
• 3.2 實(shí)驗(yàn)分組17
• 3.3 細(xì)胞培養(yǎng)17
• 3.4 MTT法測定細(xì)胞活力17-18
• 3.5 流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡18-19
• 3.6 RT-PCR測定MMP-2 mRNA和VEGF mRNA的表達(dá)19-20
• 3.7 數(shù)據(jù)分析20-21
• 第四章 結(jié)果21-25
• 4.1 胡椒堿對A549細(xì)胞生長的影響21
• 4.2 順鉑對A549細(xì)胞生長的影響21-22
• 4.3 胡椒堿聯(lián)合順鉑對A549細(xì)胞生長的影響22
• 4.4 胡椒堿聯(lián)合順鉑對A549細(xì)胞凋亡的影響22-23
• 4.5 胡椒堿聯(lián)合順鉑對A549細(xì)胞MMP-2 mRNA和VEGF mRNA表達(dá)的影響23-25
• 第五章 討論25-32
• 5.1 胡椒堿、順鉑及兩藥聯(lián)合抑制A549細(xì)胞的生長效應(yīng)25-27
• 5.2 胡椒堿聯(lián)合順鉑誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡效應(yīng)27-28
• 5.3 胡椒堿聯(lián)合順鉑下調(diào)A549細(xì)胞的MMP-2 mRNA和VEGF mRNA的表達(dá)效應(yīng)28-32
• 第六章 結(jié)論32-33
• 第七章 研究的局限性及展望33-35
• 7.1 局限性33
• 7.2 展望33-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-46
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 在學(xué)期間的研究成果46-47
• 致謝47

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