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電針加艾灸對AD模型大鼠海馬細胞周期調(diào)節(jié)因子cyclinD1、p16INK4a的影響

發(fā)布時間:2017-10-09 11:17

  本文關(guān)鍵詞:電針加艾灸對AD模型大鼠海馬細胞周期調(diào)節(jié)因子cyclinD1、p16INK4a的影響


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【摘要】:目的 通過觀察電針加艾灸對阿爾茨海默。ˋD)模型大鼠學(xué)習記憶障礙及海馬細胞周期調(diào)節(jié)因子CyclinD1和p16INK4a相關(guān)指標的影響,從細胞周期的角度探討電針加艾灸改善AD模型大鼠學(xué)習記憶障礙和治療該病的作用機制,為臨床更有效防治阿爾茨海默病提供一定的實驗依據(jù)。 方法 清潔級Wistar大鼠,雄性90只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,進行Y型水迷宮篩選,剔除不合格者(即反應(yīng)過于敏捷和過于遲鈍的大鼠)。將合格的80只大鼠隨機分為4組,即正常組、假手術(shù)組、模型組、電針加艾灸組,每組20只。以大鼠雙側(cè)海馬分別注入Aβ1-42制備AD模型大鼠。造模完成后,電針加艾灸組大鼠針刺“百會”、“腎俞”穴,接韓氏疼痛治療儀(HANS-100A),選用連續(xù)波,頻率2Hz,留針15min,然后再于相同穴位上方2-3cm左右,采用直徑為6mm的定制艾條施以溫和灸,使穴位表皮溫度保持在43℃±1℃左右,每穴持續(xù)5min,每日1次,6日為1療程,療程間休息1日,共2個療程。治療結(jié)束后第二天即開始進行Morris水迷宮實驗測試電針加艾灸對AD模型大鼠學(xué)習和記憶能力的影響,免疫組化測定大鼠海馬區(qū)CyclinD1和p16INK4a蛋白含量的變化,免疫印跡法檢測大鼠海馬區(qū)CyclinD1和p16INK4a蛋白表達強弱。 結(jié)果 1.行為學(xué)實驗結(jié)果顯示:模型組大鼠的學(xué)習記憶能力較正常組明顯降低,與正常組、假手術(shù)組比較均有顯著性差異(P0.05);定位導(dǎo)航實驗和空間探索實驗結(jié)果來看,與模型組比較,,電針加艾灸組大鼠平均逃避潛伏期時間明顯縮短,經(jīng)過水下平臺次數(shù)和有效停留時間有所增加,有顯著性差異(P0.05)。 2.免疫組化檢測結(jié)果顯示:模型組大鼠海馬區(qū)CyclinD1蛋白陽性細胞數(shù)表達明顯增多,P16~(INK4a)蛋白的陽性細胞數(shù)表達明顯減少,與正常組比較有顯著差異(P0.05);經(jīng)電針加艾灸治療后,CyclinD1蛋白陽性細胞數(shù)相應(yīng)減少,P16~(INK4a)蛋白陽性細胞數(shù)相應(yīng)增加,較模型組,有顯著性差異(P0.05)。 3.免疫印跡檢測結(jié)果顯示:CyclinD1在模型組中的表達高于正常組和假手術(shù)組(P0.05),而在電針加艾灸組中其表達量明顯減弱,與模型組比較有顯著差異(P0.05);P16~(INK4a)在模型組的表達明顯低于正常組和假手術(shù)組(P0.05),電針加艾灸治療后表達量明顯增高,高于模型組(P0.05)。 結(jié)論 1.電針加艾灸能有效的改善AD模型大鼠的學(xué)習記憶功能。 2.電針加艾灸可調(diào)節(jié)細胞周期相關(guān)蛋白含量的變化,降低細胞周期正調(diào)控因子CyclinD1的表達,升高細胞周期負調(diào)控因子P16~(INK4a)的表達,從而達到抑制AD的病理改變的目的。 3.電針加艾灸防治AD的作用機制可能與其能夠阻止細胞周期的異常進程來減少細胞凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:電針加艾灸 阿爾茨海默病 CyclinD1 P16~(INK4a)
【學(xué)位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R245
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 縮略詞表10-11
  • 前言11-13
  • 1 材料與方法13-21
  • 1.1 主要實驗儀器及試劑13-14
  • 1.2 實驗動物、分組及處理14-15
  • 1.3 AD 大鼠模型制備15
  • 1.4 行為學(xué)檢測15-17
  • 1.5 標本采集及檢測方法17-20
  • 1.6 統(tǒng)計方法20-21
  • 2 結(jié)果與分析21-24
  • 2.1 Morris 水迷宮行為學(xué)檢測結(jié)果21
  • 2.2 免疫組化法檢測電針加艾灸對 AD 模型大鼠海馬區(qū) CyclinD1、p16~(INK4a)的影響21-22
  • 2.3 免疫印記法檢測電針加艾灸對 AD 模型大鼠海馬區(qū) cyclinD1、p16~(INK4a)的影響22-24
  • 討論24-36
  • 1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對 AD 的認識24-27
  • 1.1 AD 與細胞周期調(diào)控24-27
  • 2 AD 動物模型的選擇與評價27-30
  • 2.1 以衰老為基礎(chǔ)的 A D 動物模型27-28
  • 2.2 以膽堿能學(xué)說為基礎(chǔ)的 A D 動物模型28-29
  • 2.3 轉(zhuǎn) A PP 基因動物模型29
  • 2.4 鋁中毒模型29-30
  • 2.5 Aβ1 -42 海馬注射制作模型30
  • 3 電針加艾灸防治 AD 的中醫(yī)學(xué)理論探討30-36
  • 3.1 中醫(yī)學(xué)中老年性癡呆病的發(fā)病源流30-31
  • 3.2 病因病機31-33
  • 3.3 選穴依據(jù)33-34
  • 3.4 電針加艾灸防治 AD 的獨特優(yōu)勢34-36
  • 結(jié)語36-37
  • 參考文獻37-41
  • 附錄 綜述41-47
  • 參考文獻45-47
  • 附圖47-50
  • 致謝50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙寧俠,郭瑞林,任秦有,張周良,李斌;溫和灸對健康人甲皺微循環(huán)影響的研究[J];浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年01期

2 劉曉平;老年性癡呆辨治五法[J];光明中醫(yī);2005年06期

3 朱舟,王偉,楊渝珍;膠質(zhì)疤痕研究新進展[J];國外醫(yī)學(xué)(物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)學(xué)分冊);2004年03期

4 王偉;卜碧濤;謝敏杰;張e

本文編號:999877


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