本文關(guān)鍵詞：眼針介導(dǎo)中樞5-HT、VIP遞質(zhì)途徑對(duì)肝郁脾虛型IBS大鼠結(jié)腸AQP8表達(dá)的影響

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【摘要】：目的： 觀察肝郁脾虛型IBS模型大鼠海馬、下丘腦、結(jié)腸組織5-HT、VIP、VIP-R與AQP8的表達(dá)變化，以及眼針干預(yù)對(duì)其影響。從中樞與外周兩方面探討肝郁脾虛型IBS病癥結(jié)合模型的病理生理學(xué)基礎(chǔ)，以及眼針干預(yù)的生物學(xué)效應(yīng)，為闡明肝郁脾虛型IBS的發(fā)生及眼針療法的干預(yù)機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法： 1. SPF級(jí)雄性Wistar大鼠40只，隨即選取28只采用“精神刺激+飲食失宜+勞倦”方法建立肝郁脾虛型IBS動(dòng)物模型。利用11±1℃冷水游泳至力竭（沉入水下10s不浮出）、禁食24h、禁水24h、45℃高溫烤箱15min、夾尾5min、電擊（30V，電擊5s，間歇5s，共進(jìn)行3min）六種刺激，每日隨機(jī)選取一種刺激結(jié)合自制鐵籠束縛1h，共進(jìn)行3輪即18d。觀察大鼠一般狀態(tài)、體重變化及體重增長(zhǎng)率等的變化對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，通過(guò)評(píng)價(jià)后選取造模成功的大鼠24只，按照隨機(jī)數(shù)字法分為正常組、模型組及眼針組，每組12只。眼針組造模后采用31號(hào)（直徑13mm）毫針，針刺大鼠眼眶眶緣上1mm處的下焦區(qū)、大腸區(qū)、肝區(qū)、脾區(qū)進(jìn)行干預(yù)7d。 2.采用ELISA法檢測(cè)血清和結(jié)腸組織中5-HT、SP和VIP含量。 3.采用RT-PCR法檢測(cè)結(jié)腸組織中VIP、VIP-R及AQP8的mRNA表達(dá)。 4.采用SABC免疫組化法檢測(cè)海馬、下丘腦及結(jié)腸中5-HT、VIP和VIP-R的表達(dá)并進(jìn)行分析。 結(jié)果： 1.眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠一般狀態(tài)及血清5-HT和SP含量的影響 1.1眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠一般狀態(tài)的影響 造模成功的大鼠，表現(xiàn)為精神萎靡、煩躁、皮毛干枯散亂無(wú)光澤、扎堆或蟄伏在角落、明顯消瘦、進(jìn)食減少，大便變軟或不成形，排便次數(shù)逐漸增多、便質(zhì)變稀，肛門部多有糞便附著等。肝郁日久，木郁乘土，形成“肝郁脾虛證”表現(xiàn)。經(jīng)7d針刺治療后，眼針組大鼠上述情志方面表現(xiàn)有所好轉(zhuǎn)，活動(dòng)次數(shù)、進(jìn)食量有所增加，排便次數(shù)明顯減少，便質(zhì)向正常好轉(zhuǎn)；模型組則無(wú)明顯變化。 與正常組相比，造模結(jié)束時(shí)（第18d）模型組及眼針組大鼠的體重增長(zhǎng)率顯著降低（P0.01），但二者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；在第25d時(shí)，與正常組相比，模型組大鼠的體重增長(zhǎng)率顯著降低（P0.01）；與模型組相比，眼針組大鼠的體重增長(zhǎng)率顯著增加（P0.01）。與第18d正常組相比，模型組和眼針組大鼠的糞便含水率顯著增加（P0.01），但二者之間無(wú)顯著無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；與第25d正常組相比，模型組和眼針組大鼠的糞便含水率顯著增加（P0.01），與第25d模型組相比，經(jīng)過(guò)眼針干預(yù)后糞便含水率顯著降低（P0.01）。 1.2眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠血清5-HT和SP含量的影響 與正常組血清相比，模型組和眼針組大鼠血清5-HT含量顯著增加（P0.01），與模型組血清相比，眼針組大鼠血清5-HT含量顯著降低（P0.01）；與正常組大鼠血清相比，模型組大鼠血清SP含量顯著增加（P0.01），與模型組大鼠血清相比，眼針組大鼠血清5-HT含量明顯降低（P0.05）。 2.眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠結(jié)腸組織5-HT、VIP、VIP-R及AQP8的影響 2.1眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠結(jié)腸組織5-HT含量及表達(dá)的影響 與正常組結(jié)腸相比，模型組與眼針組結(jié)腸組織5-HT含量顯著增加（P0.01），與模型組大鼠結(jié)腸組織相比，經(jīng)過(guò)眼針干預(yù)后其含量顯著減少了（P0.01）。與正常組相比，模型組大鼠結(jié)腸組織5-HT的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01），眼針組大鼠結(jié)腸組織5-HT的表達(dá)明顯上調(diào)（P0.05）；與模型組相比，眼針組大鼠結(jié)腸組織5-HT的表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01）。 2.2眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠血清、結(jié)腸組織VIP含量及表達(dá)的影響 與正常組大鼠血清相比，模型組大鼠血清VIP含量顯著增加（P0.01）；與模型組大鼠血清相比，眼針組大鼠血清VIP含量顯著降低（P0.01）。與正常組大鼠結(jié)腸相比，模型組與眼針組大鼠結(jié)腸組織VIP含量顯著增加（P0.01），與模型組大鼠結(jié)腸組織相比，經(jīng)過(guò)眼針干預(yù)后其表達(dá)顯著下調(diào)了（P0.01）。與正常組大鼠相比，模型組大鼠結(jié)腸組織VIP mRNA的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01），眼針組大鼠結(jié)腸組織VIP mRNA的表達(dá)上調(diào)不明顯（P0.05）；與模型組大鼠相比，眼針組大鼠結(jié)腸組織VIP mRNA的表達(dá)明顯下調(diào)了（P0.05）。與正常組相比，模型組結(jié)腸組織VIP的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01），與模型組相比，經(jīng)過(guò)眼針干預(yù)后其表達(dá)顯著下調(diào)了（P≤0.01）。 2.3眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠VIP-R表達(dá)的影響 與正常組大鼠相比，模型組大鼠結(jié)腸組織VIP-R mRNA的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01）；與模型組大鼠相比，眼針組大鼠結(jié)腸組織VIP-R mRNA的表達(dá)顯著下調(diào)了（P0.01）。與正常組大鼠相比，，模型組大鼠結(jié)腸組織VIP-R的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01），眼針組大鼠結(jié)腸組織VIP-R的表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01）；與模型組大鼠相比，眼針組大鼠結(jié)腸組織VIP-R的表達(dá)顯著下調(diào)了（P0.01）。 2.4眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠AQP8表達(dá)的影響 與正常組大鼠相比，模型組及眼針組大鼠結(jié)腸組織AQP8mRNA的表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01）；與模型組大鼠相比，眼針組大鼠結(jié)腸組織AQP8mRNA的表達(dá)顯著上調(diào)了（P0.01）。與正常組大鼠相比，模型組大鼠結(jié)腸組織AQP8的表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01），眼針組大鼠結(jié)腸組織AQP8的表達(dá)變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；與模型組相比，眼針組大鼠結(jié)腸組織AQP8的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01）。 3.眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠海馬CA3區(qū)及下丘腦5-HT、VIP及VIP-R表達(dá)的影響 3.1眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠海馬CA3區(qū)及下丘腦5-HT表達(dá)的影響 與正常組大鼠海馬CA3區(qū)相比，模型組大鼠海馬CA3區(qū)5-HT的表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01）；與模型組大鼠海馬CA3區(qū)相比，眼針組大鼠海馬CA3區(qū)5-HT的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01）。與正常組大鼠下丘腦相比，模型組大鼠下丘腦5-HT的表達(dá)有所減少但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），眼針組大鼠下丘腦5-HT的表達(dá)明顯上調(diào)（P0.05）；與模型組大鼠下丘腦相比，眼針組大鼠下丘腦5-HT的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01）。 3.2眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠海馬CA3區(qū)及下丘腦VIP表達(dá)的影響 與正常組大鼠海馬CA3區(qū)相比，模型組大鼠海馬CA3區(qū)VIP的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01），眼針組大鼠海馬CA3區(qū)VIP的表達(dá)變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；與模型組大鼠海馬CA3區(qū)相比，眼針組大鼠海馬CA3區(qū)VIP的表達(dá)明顯下調(diào)（P0.05）。與正常組大鼠下丘腦相比，模型組大鼠下丘腦VIP的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01），眼針組大鼠下丘腦VIP的表達(dá)無(wú)顯著性變化（P0.05）；與模型組下丘腦相比，眼針組大鼠下丘腦VIP的表達(dá)顯著下調(diào)（P0.01）。 3.3眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠海馬CA3區(qū)及下丘腦VIP-R表達(dá)的影響 與正常組大鼠海馬CA3區(qū)相比，模型組和眼針組大鼠海馬CA3區(qū)VIP-R的表達(dá)顯著上調(diào)（P0.01）；與模型組大鼠海馬CA3區(qū)相比，眼針組大鼠海馬CA3區(qū)VIP-R的表達(dá)變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。與正常組大鼠下丘腦相比，模型組大鼠下丘腦VIP-R的表達(dá)明顯上調(diào)（P0.05），眼針組大鼠VIP-R的表達(dá)變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；與模型組大鼠下丘腦相比，眼針組大鼠VIP-R的表達(dá)顯著下調(diào)了（P0.01）。 結(jié)論： 1.本研究采用“精神刺激+飲食失宜+勞倦”方法，成功建立了符合肝郁脾虛型IBS病證結(jié)合的動(dòng)物模型。 2.肝郁脾虛型IBS模型大鼠血清5-HT及SP含量顯著增加；眼針能夠改善肝郁脾虛型IBS模型大鼠的證候；降低血清5-HT及SP含量。 3.肝郁脾虛型IBS模型大鼠結(jié)腸組織5-HT、VIP及VIP-R的表達(dá)明顯上調(diào)，AQP8的表達(dá)下調(diào)；眼針干預(yù)將其逆轉(zhuǎn)。 4.眼針“疏肝健脾”的可能機(jī)制之一，是下調(diào)結(jié)腸組織5-HT、VIP及VIP-R的表達(dá)，上調(diào)AQP8的表達(dá)。 5.肝郁脾虛型IBS模型大鼠海馬及下丘腦5-HT表達(dá)下調(diào)，VIP及VIP-R表達(dá)上調(diào)；眼針干預(yù)能夠使其逆轉(zhuǎn)。 6.海馬及下丘腦可能是“肝郁脾虛”證候的中樞反應(yīng)區(qū)之一，5-HT及VIP遞質(zhì)系統(tǒng)參與了肝郁脾虛型IBS的形成。 7.眼針的“疏肝健脾”作用之一，是上調(diào)海馬及下丘腦5-HT表達(dá)，下調(diào)VIP及VIP-R的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：肝郁脾虛 眼針 水通道蛋白8 5-羥色胺 血管活性腸肽
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R245
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-9
• Abstract9-13
• 前言13-15
• 文獻(xiàn)綜述15-24
• 1 藥物造模法16-17
• 1.1 皮下注射CCl4法16
• 1.2 CCl4注射與高脂飼料喂養(yǎng)聯(lián)合法16
• 1.3 艾葉注射法16-17
• 2 情志刺激法17-19
• 2.1 激怒法17
• 2.2 束縛法17-18
• 2.3 塑料夾夾尾+隔日禁食（禁食時(shí)在鼠籠上方懸掛食物）法18
• 2.4 慢性束縛+飲食失節(jié)+孤養(yǎng)法18
• 2.5 慢性束縛應(yīng)激+過(guò)度疲勞+飲食失節(jié)法18-19
• 3. 復(fù)合法19-20
• 3.1 情致刺激+苦寒瀉下復(fù)合法19-20
• 3.2 束縛+番瀉葉復(fù)合法20
• 3.3 勞倦+飲食不節(jié)+激怒復(fù)合法20
• 3.4 慢性不可預(yù)知性應(yīng)激復(fù)合法20
• 4. 存在的問(wèn)題與展望20-22
• 參考文獻(xiàn)22-24
• 第一部分：肝郁脾虛型 IBS 大鼠模型的建立及眼針干預(yù)的影響24-41
• 1 材料與方法24-27
• 2 結(jié)果27-33
• 討論33-40
• 結(jié)論40-41
• 第二部分：眼針對(duì)肝郁脾虛型IBS模型大鼠結(jié)腸5-HT、VIP及AQP8表達(dá)的影響41-70
• 1 材料與方法41-48
• 2 結(jié)果48-65
• 討論65-69
• 結(jié)論69-70
• 第三部分：眼針對(duì)肝郁脾虛型 IBS 模型大鼠海馬及下丘腦 5-HT、VIP 表達(dá)的影響70-93
• 1 材料與方法70-72
• 2 結(jié)果72-87
• 討論87-92
• 結(jié)論92-93
• 參考文獻(xiàn)93-102
• 致謝102-103
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷103

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張國(guó)梁;豐廣寧;陶永;韓寧林;徐經(jīng)世;;消化復(fù)寧湯對(duì)肝郁脾虛大鼠胃泌素、胃動(dòng)素和胃腸運(yùn)動(dòng)功能的影響[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年03期

2 張錚錚;鄺衛(wèi)紅;張進(jìn)領(lǐng);陳惠軍;呂東勇;吳麗映;;痛瀉要方對(duì)慢性應(yīng)激大鼠腸功能及下丘腦和結(jié)腸VIP的影響[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年05期

3 于琦;金光亮;;三種復(fù)方對(duì)慢性應(yīng)激肝郁模型大鼠海馬5-HT_(1A)受體基因表達(dá)的影響[J];北京中醫(yī)藥;2008年01期

4 喬明琦,張惠云,陳雨振,韓秀珍,姚澤賢,劉長(zhǎng)華,宋承木;肝郁證動(dòng)物模型研究的理論思考[J];中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào);1997年05期

5 劉松林,梅國(guó)強(qiáng),趙映前,孫江橋,萬(wàn)曉剛,張茂林;功能性消化不良的中醫(yī)臨床辨證規(guī)律研究[J];中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào);2004年08期

6 岳利峰;陳家旭;霍素坤;梁媛;李晶晶;岳廣欣;奚勝艷;;逍遙散對(duì)肝郁脾虛證模型大鼠海馬CA1區(qū)和杏仁核BLA區(qū)GluR2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)變化的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2010年08期

7 鄭小偉;王穎;宋紅;;肝郁脾虛證胃潰瘍大鼠胃竇組織差異蛋白質(zhì)表達(dá)及柴黃胃潰寧的干預(yù)研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2011年12期

8 顧永華;彭錦;;中醫(yī)肝郁證研究概況[J];成都中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1987年03期

9 李兆申,董文珠,鄒多武,滿曉華,鄒曉平,尹寧,朱愛(ài)勇;腸易激綜合征腸黏膜SP、VIP、CGRP變化的研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年02期

10 詹麗杏,許國(guó)銘,李兆申,鄒多武,金震東,屠振興;腸易激綜合征患者活動(dòng)期和緩解期血漿5-HT、5-HIAA的變化[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年02期

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