本文關(guān)鍵詞：耳甲區(qū)電針調(diào)節(jié)ZDF大鼠血漿褪黑素緩解神經(jīng)痛及降糖效應(yīng)的研究

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【摘要】：褪黑素(Melatonin,MLT)又稱為褪黑激素,在哺乳動(dòng)物中,一般認(rèn)為主要由松果體分泌,其分泌具有晝夜節(jié)律特點(diǎn)。從褪黑素被發(fā)現(xiàn)到現(xiàn)在已有近100年的時(shí)間。隨著研究的深入,人們對(duì)它作用的認(rèn)識(shí)愈加廣泛,除了與晝夜、季節(jié)、光照、生理周期、甚至生命周期相關(guān)的一些生理反應(yīng)與生理功能外,褪黑素還在緩解疼痛、調(diào)節(jié)血糖、減肥、抗抑郁等方面被深入地探究,且研究者對(duì)褪黑素的研究熱情經(jīng)久不衰。 相對(duì)于人類對(duì)于褪黑素近百年的研究,中國(guó)的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)理論可以被追溯至兩千年前,而針刺療法則更加久遠(yuǎn)。在中醫(yī)理論形成后,針刺的作用機(jī)制被概括為“調(diào)和陰陽”,而究竟如何“調(diào)和”,傳統(tǒng)理論并未給出一個(gè)令人信服的答案,而“陰、陽”二字的由來確是因?yàn)楣湃藢?duì)光的觀察,繼而推演到對(duì)自然界晝夜、季節(jié)的更替闡釋并聯(lián)系到人自身的生理、病理。褪黑素作為一種跟光調(diào)節(jié)密切聯(lián)系的生物信號(hào)載體,并可以產(chǎn)生廣泛作用的激素,成為聯(lián)系自然光照變化節(jié)律與人體生物節(jié)律的一個(gè)紐帶。針刺的一些適應(yīng)病癥也恰與褪黑素缺乏類的病癥相重合,這不由的讓我們大膽聯(lián)想,調(diào)節(jié)褪黑素分泌可能是產(chǎn)生針刺復(fù)合效應(yīng)的機(jī)制之一。 我們前期的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),耳甲區(qū)存在迷走神經(jīng)耳支傳入纖維的分布,恰當(dāng)?shù)碾姶碳つ軌虍a(chǎn)生迷走神經(jīng)刺激的效果(VNS),繼而產(chǎn)生鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)血糖、抗癲癇、抗抑郁、抗炎、降血壓等功效,并觀察到刺激耳甲區(qū)所產(chǎn)生的中樞神經(jīng)核團(tuán)的放電及神經(jīng)遞質(zhì)和相關(guān)蛋白的改變。另外,文獻(xiàn)記載了研究者對(duì)針刺療法和外源褪黑素協(xié)同作用的研究,認(rèn)為外源褪黑素與針刺效應(yīng)有相互促進(jìn)的作用。我們的預(yù)實(shí)驗(yàn)重復(fù)了耳甲區(qū)電刺激對(duì)于病理模型大鼠鎮(zhèn)痛、降糖及抗抑郁效應(yīng)的觀察,發(fā)現(xiàn)耳甲區(qū)電刺激后,病理模型大鼠血漿褪黑素濃度的提高。這些線索讓我們聯(lián)想到,耳迷走神經(jīng)電刺激可以緩解病理疼痛模型大鼠的痛閾,降低糖尿病大鼠模型的血糖并促進(jìn)其胰島素分泌,緩解慢性應(yīng)激大鼠模型的抑郁癥狀,這些情形可能有褪黑素的參與,并且耳迷走神經(jīng)電刺激促進(jìn)了褪黑素的分泌,提高了血漿褪黑素的濃度,從而產(chǎn)生或者加強(qiáng)了上述效應(yīng)。 本實(shí)驗(yàn)中,我們選用了Zucker Diabetes Fat (ZDF)大鼠作為模型。這種模型大鼠具有(fa/fa)肥胖基因,并有遺傳性,在特殊飼料誘導(dǎo)下逐漸自發(fā)高血糖、高血脂、胰島素抵抗等2型糖尿病(T2DM)的典型癥狀,肥胖,并發(fā)感覺神經(jīng)痛等T2DM并發(fā)癥,在國(guó)際上廣泛用于T2DM及其并發(fā)癥以及肥胖、代謝類疾病的研究,比傳統(tǒng)胰島β細(xì)胞損毀或部分損毀配合高脂飼料誘導(dǎo)的T2DM模型有著無可比擬的優(yōu)勢(shì)。這種模型在我們耳-迷走反射針刺效應(yīng)系列研究中的應(yīng)用尚屬首次,耳迷走神經(jīng)調(diào)節(jié)褪黑素分泌來產(chǎn)生針刺效應(yīng)也是一個(gè)較新的研究思路。 實(shí)驗(yàn)流程： 1耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠體重、攝食的影響 1.1動(dòng)物分組 實(shí)驗(yàn)采用雄性6-8周齡Zucker Diabetes Fat (ZDF)大鼠及Zucker Lean(ZL)。ZL大鼠予以普通顆粒大鼠維持飼料喂養(yǎng),ZDF大鼠予以Purina#5008(粗蛋白23.5%、粗脂肪6.5%)顆粒料飼養(yǎng)以誘導(dǎo)T2DM。所有大鼠自由飲水,維持8：00-20：00光照、20：00-8：00黑暗交替的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)獨(dú)立動(dòng)物房中適應(yīng)性飼養(yǎng)3天,實(shí)驗(yàn)室溫度22±1℃,濕度50±5%,每籠4-6只。 分組情況如下： 1.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1.2.1體重與內(nèi)臟脂肪比 1)體重 同周齡ZL大鼠與ZDF大鼠在實(shí)驗(yàn)前相比較,ZL大鼠平均比ZDF大鼠體重輕9%左右(P0.05)。經(jīng)過30天電針干預(yù)后,ZL大鼠和ZDF大鼠分別與各自的空白對(duì)照組相比,耳甲區(qū)電針組(EA-ACR)體重增長(zhǎng)較低,MLT腹腔注射組.(MTL-ZDF)與N-ZDF組相比較也較輕(P0.05),而耳緣電刺激組(EA-AE)與其空白對(duì)照組(Naive, N)相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。從趨勢(shì)上來看,ZL與ZDF對(duì)照組在體重增長(zhǎng)率上(κ=(y-b)/x)有差異(P0.05),N-ZDF體重增長(zhǎng)較N-ZL組要快,N-ZDF與N-ZL末次體重測(cè)量有極顯著差異(P0.01)。 1.2.2攝食量 與N-ZL組相比,ZDF組30日均攝食量顯著較大(P0.01),而在ZL組的電針干預(yù)的兩組組(EA-AE, EA-ACR)其攝食量較低(P0.05),但這兩組間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；與N-ZDF組比較,MLT-ZDF組30日均攝食量較低(P0.05),而ZDF電針干預(yù)的兩組(EA-AE-ZDF, EA-ACR-ZDF)與N-ZDF之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05) 2耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠疼痛行為的影響 2.1動(dòng)物分組 2.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2.2.1機(jī)械痛閾 在手術(shù)前,各組比較均無顯著差異(P0.05)；手術(shù)及電針刺激30天后,與N-ZL組相比,ZDF大鼠各組機(jī)械刺激收爪時(shí)間顯著下降(P0.01),與N-ZDF相比,C-ZDF(?)且收抓時(shí)間更低(P0.05)；而ZDF耳甲區(qū)電刺激(EA-ACR-C-ZDF)與MLT干預(yù)組(MLT-C-ZDF)較N-ZD和C-ZDF組高(P0.05)。從各組變化趨勢(shì)上來看,N-ZL組前后變化無顯著差異(P0.05),N-ZDF組30天后較之前相比顯著降低(P0.01),ZDF的3個(gè)CCI手術(shù)組在術(shù)后機(jī)械刺激收爪時(shí)間顯著下降(P0.01),EA-ACR-C-ZDF與MLT-C-ZDF丙組干預(yù)后械刺激收爪時(shí)間有持續(xù)穩(wěn)定的回升,且高于N-ZDF組(P0.05),MLT-C-ZDF組與EA-ACR-C-ZDF組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 2.2.2熱痛閾 在手術(shù)前,各組比較均無顯著差異(P0.05)；手術(shù)及電針刺激30天后,與N-ZL組相比,ZDF大鼠各組機(jī)械刺激收爪時(shí)間下降(P0.05；C-ZDF P＜0.01) MLT-C-ZDF(?)且無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)：與N-ZDF相比,C-ZDF組收抓時(shí)間較低(P0.05),MTL-C-ZDF組較高(P0.05),EA-ACR-C-ZDF組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；與C-ZDF組相比,EA-ACR-C-ZDF組較高(P0.05),MTL-C-ZDF組顯著升高(P0.01)；MTL-C-ZDF組與EA-ACR-C-ZDF組比較,MTL-C-ZDF組較高(P0.05)。從各組變化趨勢(shì)上來看,N-ZL組前后變化無顯著差異(P0.05),Z-ZDF組30天后較之前相比降低(P0.05),ZDF的3個(gè)CCI手術(shù)組在術(shù)后機(jī)械刺激收爪時(shí)間下降(P0.05；C-ZDF, MLT-C-ZDF P0.01), EA-ACR-C-ZDF與MLT-C-ZDF兩組干預(yù)后械刺激收爪時(shí)間有所回升,MLT-C-ZDF組與C-ZDF組(P0.05)與EA-ACR-C-ZDF組(P0.01)相比回升較為顯著。 3耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠血漿相關(guān)生化指標(biāo)的影響 3.1動(dòng)物分組 3.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 3.2.1血糖 實(shí)驗(yàn)前同周齡的ZDF大鼠與ZL大鼠相比血糖水平已有差異,ZDF大鼠血糖顯著高于ZL大鼠血糖水平(P0.01)；與ZDF空白對(duì)照組相比(N-ZDF), ZDF其余三個(gè)干預(yù)組的血糖均有下降(P0.05),且EA-ACR-ZDF組與MLT-ZDF組的血糖下降尤為顯著(P0.01)；ZL各組間血糖比較未見明顯差異(P0.05)；從前后變化趨勢(shì)上來看,ZL大鼠血糖較為平穩(wěn),ZDF大鼠血糖實(shí)驗(yàn)前后比較均顯著增高(P0.01),MLT-ZDF組在第2周時(shí)表現(xiàn)了較好的血糖控制作用(P0.05),但在第4周時(shí)血糖有所回升,而EA-ACR-ZDF與EA-AE-ZDF組在第3周和第4周時(shí)表現(xiàn)了較好的血糖控制作用(P0.05)。 3.2.2褪黑素 實(shí)驗(yàn)后各組大鼠血漿褪黑素水平與N-ZL組比較,ZDF各組均有顯著差異,ZDF組中N.EA-AE、M、X褪黑素水平顯著較低(P0.01),EA-ACR、EA-ACR-C、M-C褪黑素較低(P0.05)；ZL組中EA-ACR褪黑素較N組高(P0.05),EA-AE組無顯著差異。ZDF組中,與N-ZDF組比較,EA-ACR、EA-ACR-C、M-C組褪黑素水平升高(P0.05),C組褪黑素水平下降(P0.05)。ZDF組中,EA-ACR與EA-AE、M組比較褪黑素水平較高(P＜0.05); EA-ACR-C、M-C組較C組顯著較高(P0.01)。ZL組中,N與EA-AE組無顯著差異(P0.05)；ZDF組中,N、AE-EA、M組之間無顯著差異(P0.05),EA-ACR-C與M-C之間無顯著差異(P0.05)。 3.2.3糖化血紅蛋白(Glycosylated hemoglobin, Gh) 實(shí)驗(yàn)后各組間大鼠血漿糖化血紅蛋白水平,與N-ZL組比較,ZDF組中N、EA-AE、M組糖化血紅蛋白血漿濃度較高(P0.05),其中ZDF中N、EA-AE顯著較高(P0.01),ZL組中EA-AE、EA-ACR組無顯著差異,EA-ACR-ZDF組亦無顯著差異；EA-ACR-ZDF組與N-ZDF、EA-AE-ZDF比較顯著較低(P0.01),與M-ZDF比較較高(P0.05)。 3.2.4胰島素 實(shí)驗(yàn)后大鼠各組血漿胰島素水平變化,與N-ZL相比,EA-ACR-ZL組、N-ZDF組、EA-ZCR-ZDF組、M-ZDF組較高(P0.05),其中EA-ACR干預(yù)的兩組血漿胰島素水平顯著較高(P0.01)；ZL組中,EA-ACR干預(yù)組血漿胰島素水平較EA-AE組顯著增高(P0.01)；ZDF組中,EA-ACR干預(yù)組較其余各組均顯著增高(P0.01)；而N-ZL與EA-AE組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05), N-ZDF組、EA-AE組、M-ZDF組之間亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 3.2.5五羥色胺(5-HT) 實(shí)驗(yàn)后各組血漿5-HT水平,與N-ZL、N-ZDF、C-ZDF組相比,EA-ACR-C-ZDF組(P0.01)與M-C-ZDF組(P0.05)顯著升高；EA-ACR-C-ZDF與M-C-ZDF組相比較高(P＜0.05); N-ZL、N-ZDF、C-ZDF之間沒有顯著差異(P0.05)。 4電針刺激對(duì)ZDF大鼠中樞相關(guān)受體表達(dá)的影響 4.1動(dòng)物分組 同“3.1動(dòng)物分組”。 4.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 4.2.1免疫熒光 從圖11、12中可以觀察到,N-ZL、EA-ACR-ZL、EA-ACR-ZDF、M-ZDF組mt1受體與INSRβ受體在下丘腦部共同表達(dá)；EA-AE-ZL、EA-AE-ZDF組僅見mt1受體表達(dá)；N-ZDF組未見mt1受體與INSRP受體表達(dá)。N-ZL、 EA-ACR-C-ZDF、M-C-ZDF組mt1受體與5-HT1AR受體在脊髓腰膨大共同表達(dá)；N-ZDF組與C-ZDF組未見mt1受體與5-HT1AR受體表達(dá)。 4.2.1Western blot mt1在下丘腦部的表達(dá)水平,與N-ZL相比,N-ZDF組較低(P0.05),EA-ACR-ZL組,EA-AE-ZDF組,EA-ACR-ZDF組,M-ZDF組顯著升高；與Z-ZDF相比,EA-ACR-ZL組,EA-AE-ZDF組,EA-ACR-ZDF組,M-ZDF組升高(P0.05),其中EA-ACR-ZL組顯著提高(P0.01),ZL組中EA-ACR組比EA-AE組亦有顯著提高；而N-ZL組與EA-AE-ZL組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,ZDF干預(yù)組之間亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。mt1在脊髓腰膨大部的表達(dá)水平,與N-ZL相比EA-ACR-C-ZDF(P0.01)顯著提高, N-ZDF與C-ZDF表達(dá)降低(P0.05)；與N-ZDF相比,EA-ACR-C-ZDF顯著提高(P＜0.01), N-ZDF與C-ZDF表達(dá)降低(P0.05)；與M-C-ZDF相比,EA-ACR-C-ZDF亦有顯著提高(P0.01)。 INSRβ在下丘腦處的表達(dá)水平,與N-ZL和N-ZDF相比,EA-ACR-ZL, EA-ACR-ZDF, M-ZDF組顯著提高(P0.05),而EA-ACR與EA-AE組相比亦分別有顯著提高。 5-HT1AR在脊髓腰膨大部的表達(dá)水平,N-ZL水平與其他組相比有較高表達(dá)(P0.05)；與C-ZDF和N-ZDF組相比EA-ACR-C-ZDF和M-C-ZDF組較高(P0.05)。 5結(jié)論 本研究基于前期大量的臨床及基礎(chǔ)研究,從耳甲區(qū)-迷走神經(jīng)聯(lián)系學(xué)說入手,提出耳甲區(qū)電刺激促進(jìn)褪黑素分泌,繼而產(chǎn)生緩解慢性神經(jīng)痛、調(diào)節(jié)血糖、降低體重等褪黑素缺乏類相關(guān)疾病的假說,并采用了Zucker Diabetes Fat (ZDF)大鼠(fa/fa)基因突變模型,進(jìn)行了從行為學(xué)到生物化學(xué)到分子生物學(xué)不同層面的系統(tǒng)研究。 通過數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)整理分析可以發(fā)現(xiàn),耳甲區(qū)電針刺激(EA-ACR),可以有效控制ZDF肥胖大鼠模型的體重,抑制高血糖,提高血漿胰島素水平,降低了血漿糖化血紅蛋白水平,提高胰島素受體INSRP在下丘腦的表達(dá)；且緩解了ZDF慢性神經(jīng)痛模型大鼠的機(jī)械刺激疼痛和熱刺激疼痛,提高了血漿五羥色胺水平(5-HT),以及5-HT受體在脊髓腰膨大處的表達(dá)；上述效果以EA-ACR提高了血漿褪黑素濃度、調(diào)高了褪黑素受體(mt1)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)水平為基礎(chǔ),并可能通過EA-ACR興奮了副交感神經(jīng)神經(jīng)促進(jìn)褪黑素分泌來實(shí)現(xiàn),這可能是針刺復(fù)合效應(yīng)的共同機(jī)制之一�？梢哉雇�,許多褪黑素缺乏類疾病與癥狀,可以用EA-ACR的方法進(jìn)行干預(yù)和治療。
【關(guān)鍵詞】：耳甲區(qū) 電針 褪黑素 神經(jīng)痛 血糖 Ⅱ型糖尿病
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R245
【目錄】：

• 目錄4-8
• 摘要8-16
• 1 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠體重、攝食的影響9-11
• 1.1 動(dòng)物分組9-10
• 1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果10-11
• 1.2.1 體重與內(nèi)臟脂肪比10
• 1.2.2 攝食量10-11
• 2 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠疼痛行為的影響11-12
• 2.1 動(dòng)物分組11
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果11-12
• 2.2.1 機(jī)械痛閾11
• 2.2.2 熱痛閾11-12
• 3 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠血漿相關(guān)生化指標(biāo)的影響12-14
• 3.1 動(dòng)物分組12
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果12-14
• 3.2.1 血糖12-13
• 3.2.2 褪黑素13
• 3.2.3 糖化血紅蛋白(Glycosylated hemoglobin,Gh)13
• 3.2.4 胰島素13-14
• 3.2.5 五羥色胺(5-HT)14
• 4 電針刺激對(duì)ZDF大鼠中樞相關(guān)受體表達(dá)的影響14-15
• 4.1 動(dòng)物分組14
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果14-15
• 4.2.1 免疫熒光14
• 4.2.2 Western blot14-15
• 5 結(jié)論15-16
• ABSTRACT16-22
• 英文縮略詞22-23
• 文獻(xiàn)綜述23-73
• 綜述一、褪黑素與針刺適應(yīng)病癥的相關(guān)研究進(jìn)展23-61
• 1 概述23-49
• 1.1 在松果體中的合成24-25
• 1.2 在松果體的分泌25-27
• 1.2.1 分泌機(jī)制25
• 1.2.2 年齡因素25
• 1.2.3 節(jié)律特點(diǎn)25-27
• 1.2.4 調(diào)節(jié)機(jī)制27
• 1.3 代謝機(jī)制27-28
• 1.4 褪黑素受體(MTR)28-33
• 1.4.1 概述與源流28-29
• 1.4.2 命名與分類29
• 1.4.3 生物學(xué)特性29-30
• 1.4.4 MTR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)30
• 1.4.5 MTR的體內(nèi)分布30-33
• 1.5 生理和藥理作用33-49
• 1.5.1 對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)33-37
• 1.5.2 褪黑素對(duì)代謝系統(tǒng)的作用37-39
• 1.5.3 褪黑素對(duì)代謝疾病的作用39-42
• 1.5.4 褪黑素與抑郁癥的關(guān)系42-49
• 2 針刺與褪黑素相關(guān)性研究進(jìn)展49-53
• 2.1 針刺與褪黑素的協(xié)同作用49-51
• 2.1.1 針刺與褪黑素的協(xié)同降壓作用49-50
• 2.1.2 針刺與褪黑素對(duì)胃黏膜的協(xié)同保護(hù)作用50
• 2.1.3 針刺與褪黑素的協(xié)同免疫調(diào)節(jié)作用50-51
• 2.1.4 針刺與褪黑素的協(xié)同鎮(zhèn)痛作用51
• 2.2 針刺與褪黑素適應(yīng)癥的關(guān)聯(lián)51-53
• 2.2.1 失眠51-52
• 2.2.2 急性腦缺血再灌注損傷(CI-RI)52-53
• 2.2.3 癲癇53
• 3 述評(píng)53
• 4 參考文獻(xiàn)53-61
• 綜述二、Zucker Diabetes Fat(ZDF)大鼠相關(guān)應(yīng)用概況61-73
• 1. 種系起源61-62
• 2. 月巴胖模型特征62-64
• 2.1 進(jìn)食量(Food Intake)63
• 2.2 脂蛋白脂酶(Lipoprotein Lipase)63
• 2.3 分子生物學(xué)63-64
• 2.4 中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的影響64
• 2.5 細(xì)胞培養(yǎng)64
• 3. Zucker大鼠作為非依賴胰島素型糖尿病(NIDDM)模型64-66
• 3.1 高血糖及胰島素抵抗64-65
• 3.2 Ⅱ型糖尿病感覺神經(jīng)病變與神經(jīng)痛65-66
• 4. ZDF大鼠的褪黑素水平相關(guān)研究66-67
• 5. ZDF大鼠在針刺研究中的應(yīng)用67-68
• 6 參考文獻(xiàn)68-73
• 前言73-75
• 一、技術(shù)路線75-76
• 二、實(shí)驗(yàn)材料與方法76-93
• 第一部分 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠體重、攝食量及疼痛行為的影響76-84
• 實(shí)驗(yàn)一：耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠體重、攝食的影響76-80
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料76-77
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組76-77
• 1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)器材及試劑77
• 1.2 麻醉方法77-78
• 1.2.1 戊巴比妥鈉麻醉77-78
• 1.2.2 異氟烷麻醉78
• 1.3 干預(yù)方法78-79
• 1.3.1 電針刺激方法78-79
• 1.3.2 褪黑素注射79
• 1.4 測(cè)量方法79-80
• 1.4.1 體重、攝食測(cè)量79-80
• 1.4.2 內(nèi)臟脂肪測(cè)量80
• 1.5 統(tǒng)計(jì)方法80
• 實(shí)驗(yàn)二：耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠疼痛行為的影響80-84
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料80-82
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組80-81
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑81-82
• 2.2 麻醉方法82
• 2.3 坐骨神經(jīng)縊縮損傷術(shù)(CCI)82
• 2.4 干預(yù)方法82
• 2.5 測(cè)量方法82-83
• 2.5.1 機(jī)械刺激痛閾測(cè)量83
• 2.5.2 熱刺激痛閩測(cè)量83
• 2.6 統(tǒng)計(jì)方法83-84
• 第二部分 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠血漿相關(guān)生化指標(biāo)的影響84-89
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料84-85
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組84-85
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑85
• 2 檢測(cè)方法85-89
• 2.1 血糖檢測(cè)(葡萄糖氧化酶法)85-86
• 2.2 ELISA86-89
• 2.2.1 取血及血樣處理86
• 2.2.2 ELISA檢測(cè)86-89
• 3 統(tǒng)計(jì)方法89
• 第三部分 電針刺激對(duì)ZDF大鼠中樞相關(guān)受體表達(dá)的影響89-93
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料89-90
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組89
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)器材、藥品試劑89-90
• 2 檢測(cè)方法90-93
• 2.1 免疫組化檢測(cè)90-91
• 2.2 Western Blot檢測(cè)91-93
• 2.2.1 取材91
• 2.2.2 Western Blot程序91-93
• 3 統(tǒng)計(jì)方法93
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果93-119
• 1 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠體重、攝食的影響93-94
• 1.1 體重與內(nèi)臟脂肪比93-94
• 1.2 攝食量94
• 2 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠疼痛行為的影響94-95
• 2.1 機(jī)械痛閾94
• 2.2 熱痛閾94-95
• 3 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠血漿生化指標(biāo)的影響95-96
• 3.1 血糖95
• 3.2 褪黑素95-96
• 3.3 糖化血紅蛋白(Glycosylated hemoglobin,Gh)96
• 3.4 胰島素96
• 3.5 五羥色胺(5-HT)96
• 4 耳甲區(qū)電針對(duì)ZDF大鼠中樞mt_1受體、5-HTR1A、INSRβ表達(dá)的影響96-99
• 4.1 免疫熒光96-97
• 4.1.1 mt_1受體與INSRβ在下丘腦共同表達(dá)96-97
• 4.1.2 mt1受體與5-HT1AR在脊髓腰膨大共同表達(dá)97
• 4.2 Western Blot97-99
• 4.2.1 mt_1受體在下丘腦及脊髓腰膨大處的表達(dá)97
• 4.2.2 INSRβ在下丘腦處的表達(dá)97
• 4.2.3 5-HT1AR在脊髓腰膨大處的表達(dá)97-99
• 附表99-105
• 附圖105-119
• 四、討論119-133
• 1 耳甲區(qū)電針刺激對(duì)ZDF大鼠血漿褪黑素的調(diào)節(jié)119-121
• 2 耳甲區(qū)電針刺激對(duì)ZDF大鼠體重、攝食的影響121-123
• 3 耳甲區(qū)電針刺激對(duì)ZDF大鼠血糖、糖化血紅蛋白、胰島素的影響123-128
• 4 耳甲電針刺激對(duì)ZDF大鼠的鎮(zhèn)痛作用128-132
• 5 總結(jié)與展望132-133
• 五、創(chuàng)新點(diǎn)133-134
• 六、參考文獻(xiàn)134-141
• 致謝141-143
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷143-144
• 查新報(bào)告書144-147

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 余敏;肖曉秋;唐成林;劉祖麗;侯懿p，

本文編號(hào)：709458