本文關(guān)鍵詞：耳針對結(jié)直腸擴張所致大鼠內(nèi)臟痛的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學(xué)》 2014年

腦內(nèi)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在焦慮調(diào)節(jié)內(nèi)臟高敏感中的作用

趙宏宇  

【摘要】：研究背景 內(nèi)臟高敏感是腸易激綜合征(irritable bowel syndrome, IBS)主要病理生理特征,腦腸軸功能紊亂在IBS內(nèi)臟高敏感的發(fā)生中起了重要的作用。近年來,研究發(fā)現(xiàn)半數(shù)以上的IBS患者可伴有一些精神疾病(如焦慮、抑郁等),這些精神疾病在一定程度上加重IBS患者的內(nèi)臟敏感性,其中焦慮對內(nèi)臟高敏感的作用尤為突出。但焦慮影響IBS內(nèi)臟高敏感的中樞機制仍未明確。 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)是神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)的一員,其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的過度表達(dá)對焦慮的產(chǎn)生發(fā)揮了重要的促進(jìn)作用。幾項動物實驗研究表明杏仁體和海馬區(qū)BDNF表達(dá)增高可導(dǎo)致焦慮水平的增加。研究發(fā)現(xiàn),焦慮的IBS患者腹痛時海馬的活動性增強,且IBS患者腸黏膜BDNF增高并參與內(nèi)臟高敏感的發(fā)生。因此我們推測腦組織海馬區(qū)BDNF可能參與了焦慮對內(nèi)臟高敏感的調(diào)節(jié)作用。研究表明,血清中BDNF的水平可以反映腦組織內(nèi)BDNF的變化,因此我們分析在IBS模型中,血清中BDNF的變化是否與海馬區(qū)BDNF的變化一致。 目的 本研究以母嬰分離(maternal separation, MS)建立IBS腦腸軸功能紊亂的模型,模擬IBS焦慮伴內(nèi)臟高敏感的特征；觀察腦組織海馬區(qū)BDNF表達(dá)的變化,分析其與焦慮和內(nèi)臟高敏感的關(guān)系,探討B(tài)DNF在焦慮調(diào)節(jié)內(nèi)臟高敏感中的作用。 方法 利用新生的SD雄鼠建立母嬰分離模型,對照組為出生后未做任何處理的雄性SD大鼠。 1焦慮水平的評估：在出生后第70天,利用曠場實驗評估兩組大鼠的焦慮水平； 2內(nèi)臟高敏感的評估：曠場實驗后,對大鼠行結(jié)直腸擴張實驗(colorectal distension, CRD),利用腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex, AWR)評分評估其腸道敏感性； 3海馬區(qū)BDNF蛋白的表達(dá)水平 3.1所有大鼠斷頭處死后,分離出海馬組織,利用酶聯(lián)免疫吸附方法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)檢測海馬區(qū)BDNF表達(dá)水平； 3.2利用免疫組化方法分析海馬各區(qū)BDNF表達(dá)變化； 4海馬區(qū)BDNF在mRNA水平上的變化：利用實時定量PCR(RT-PCR)分析海馬區(qū)BDNF變化水平； 5收集MS組和對照組大鼠的血清,利用ELISA的方法,比較兩組之間是否有差異及與海馬區(qū)BDNF的變化是否一致。 6分析MS組大鼠焦慮水平、內(nèi)臟高敏感程度、海馬區(qū)BDNF表達(dá)兩兩之間的相關(guān)性。 7統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS18.0軟件,數(shù)據(jù)用x±s表示。曠場實驗、海馬區(qū)BDNF蛋白和mRNA水平的表達(dá)、血清中BDNF的表達(dá)：兩組間比較應(yīng)用獨立樣本t檢驗；不同CRD壓力下AWR評分：兩組間比較應(yīng)用重復(fù)測量數(shù)據(jù)方差分析；兩變量的相關(guān)分析：采用Pearson相關(guān)性分析；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 1在曠場實驗中,MS組大鼠在中央?yún)^(qū)停留時間和穿越中央?yún)^(qū)的次數(shù)均明顯少于對照組(P＜0.05),提示其焦慮水平增加； 2CRD實驗中,在直腸擴張20、40、60、80mmHg時中,MS組大鼠AWR評分均高于對照組,提示其內(nèi)臟敏感性增加； 3MS組大鼠海馬區(qū)BDNF蛋白表達(dá)水平高于對照組(P0.05),且主要是海馬CA1、CA3區(qū)BDNF蛋白表達(dá)水平升高； 4MS組大鼠海馬區(qū)BDNF表達(dá)在mRNA水平上也明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)； 5MS組大鼠血清中BDNF的含量與對照組血清中BDNF的含量無明顯差異(P0.05),且與海馬區(qū)BDNF的表達(dá)無明顯的相關(guān)性； 6MS組大鼠焦慮與內(nèi)臟高敏感程度呈正相關(guān),且焦慮與海馬區(qū)BDNF蛋白水平及BDNF蛋白水平與內(nèi)臟高敏感程度分別呈正相關(guān)。 結(jié)論 1MS模型中大鼠焦慮水平和內(nèi)臟敏感性均增加,且焦慮加重內(nèi)臟高敏感的發(fā)生。 2在MS模型模擬的IBS中,腦組織海馬區(qū)BDNF表達(dá)水平增高,且參與調(diào)節(jié)焦慮對內(nèi)臟高敏感的促進(jìn)作用。 3在MS模型模擬的IBS中,血清中BDNF的表達(dá)無明顯變化,且不能代表海馬區(qū)BDNF的變化。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R574.4
【目錄】：

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