本文關(guān)鍵詞：電針聯(lián)合BMSCs移植治療對(duì)腦出血大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及機(jī)理研究

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【摘要】：目的：觀察電針(electro-acupuncture,Ea)聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治療對(duì)腦出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力,血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙酰膽堿酯酶(AchE)含量和海馬突觸素(SYP)、神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(GAP-43)、突觸后致密物-95(PSD-95)蛋白表達(dá)的影響,探討干預(yù)措施的效果及其可能的機(jī)制。方法：(1)將BMSCs復(fù)蘇、擴(kuò)增和誘導(dǎo),收集細(xì)胞備用。(2)選用成年SD大鼠進(jìn)行Morris水迷宮訓(xùn)練4天,每天4次,第5天進(jìn)行測(cè)試,篩選逃避潛伏期少于40秒的大鼠隨機(jī)分為BMSCs組、Ea組、Ea-BMSCs組、NS組、FO組和Normal組。(3)前4組采用膠原酶及肝素注入尾狀核制備大鼠ICH模型,在術(shù)后第3天時(shí)分別通過移植BMSCs、電針刺激、移植BMSCs聯(lián)合電針刺激和注射生理鹽水進(jìn)行治療,每組根據(jù)干預(yù)措施后喂養(yǎng)天數(shù)再分為1d、3d、5d、7d、14d五個(gè)亞組；電針刺激選取大椎穴和百會(huì)穴,每天一次。假手術(shù)組僅進(jìn)針但不注入膠原酶和肝素,也不治療；正常組不施加干預(yù)措施。(4)在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行Morris水迷宮測(cè)試,然后取材。(5)檢測(cè)血清中AchE、SOD和MDA的含量,免疫組織化學(xué)檢測(cè)SYP、GAP-43和PSD-95的表達(dá)。結(jié)果：(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行造模前水迷宮測(cè)試,各組間無(wú)顯著性差異(P0.05)。在腦出血治療后水迷宮檢測(cè),逃避潛伏期、穿越平臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)象限時(shí)間和路程百分比等反映學(xué)習(xí)記憶能力的指標(biāo)隨時(shí)間延長(zhǎng)而好轉(zhuǎn),在1d時(shí)Ea組成績(jī)比其他組好(P0.05)；在3、5、7、14d時(shí),NS組成績(jī)比其他治療組差(3d時(shí)BMSCs組除外)(P0.05),Ea-BMSCs組成績(jī)比Ea組和BMSCs組好(P0.05)。(2)腦出血各組AchE在1d時(shí)開始下降,14d時(shí)達(dá)最低值。NS組AchE含量在5、7、14d時(shí)比其他治療組高(P0.05)；Ea-BMSCs組AchE含量,在5d時(shí)比Ea組高(P0.05),在7、14d時(shí)比Ea組和BMSCs組低(P0.05)。(3)腦出血各組血清SOD在1d時(shí)開始下降,在3d時(shí)達(dá)最低后快速上升,持續(xù)到14d達(dá)峰值。在3d時(shí),Ea組SOD含量比其他治療組高(P0.05)。NS組SOD含量在5、7、14d時(shí)比其他治療組低(P0.05),Ea-BMSCs組SOD含量在7、14d時(shí)比Ea組和BMSCs組高(P0.05),BMSCs組SOD含量在5d時(shí)比Ea組低(P0.05)。(4)腦出血各組血清MDA含量在1d時(shí)開始上升,在3d時(shí)達(dá)峰值后下降,在14d時(shí)達(dá)最低值。在3d時(shí),Ea組MDA含量比其他治療組低(P0.05)。在5、7、14d時(shí),NS組MDA含量比其他治療組高(P0.05),Ea-BMSCs組MDA含量比Ea組和BMSCs組低(P0.05)。BMSCs組MDA含量在5d時(shí)比Ea組高(P0.05)。(5)腦出血各組SYP、PSD-95表達(dá)在1d時(shí)開始上升,Ea-BMSCs組和BMSCs組持續(xù)增高到14d達(dá)峰值,Ea組和NS組上升到7d時(shí)達(dá)峰值,隨后下降。腦出血各組GAP-43表達(dá)在1d時(shí)開始上升,7d時(shí)達(dá)峰值,隨后下降。(6)在5、7、14d時(shí),NS組SYP、GAP-43表達(dá)比其他治療組低(P0.05),Ea-BMSCs組SYP、GAP-43表達(dá)比Ea組和BMSCs組高(P0.05)。(7)在3、5d時(shí),Ea組PSD-95表達(dá)比其他治療組高(P0.05)。NS組PSD-95表達(dá)在5、7、14d時(shí)比其他治療組低(P0.05)。Ea-BMSCs組PSD-95的表達(dá)在7d、14d時(shí)比Ea組和BMSCs組高(P0.05)。(8)在腦出血治療14d時(shí),各治療組的SOD、SYP、 PSD-95、MDA、AchE、GAP-43、學(xué)習(xí)記憶能力與FO組和Normal組相比較仍有明顯差異(P0.05)。結(jié)論：(1)電針和BMSCs移植聯(lián)合應(yīng)用治療ICH大鼠,與單一電針治療或單一BMSCs移植治療比較,能顯著提高大鼠學(xué)習(xí)記憶能力,其機(jī)制可能與降低血清中AchE含量和上調(diào)海馬中SYP、PSD-95及GAP-43表達(dá)有關(guān)。(2)電針和BMSCs移植聯(lián)合應(yīng)用治療ICH大鼠,能顯著增加大鼠血清中SOD活力,減少M(fèi)DA的產(chǎn)生,從而減輕自由基對(duì)機(jī)體的損傷。
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R245

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1207174