目的探討土槿乙酸誘導(dǎo)的人卵巢癌細胞系HO-8910細胞自噬蛋白的表達及PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化,以及自噬特異性抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)和自噬激動劑雷帕霉素(RAPA)對自噬相關(guān)蛋白的影響。方法不同濃度的土槿乙酸作用HO-8910細胞,采用臺盼藍染色檢測細胞的存活率,Western blot分析檢測自噬相關(guān)蛋白及PI3K/Akt通路相關(guān)蛋白的變化,分別用3-MA和RAPA處理HO-8910細胞后檢測自噬相關(guān)蛋白的變化。結(jié)果土槿乙酸能夠誘導(dǎo)卵巢癌細胞HO-8910自噬,增加LC3-Ⅱ和自噬調(diào)節(jié)因子Beclin-1的表達;3-MA可以抑制土槿乙酸誘導(dǎo)的HO-8910細胞自噬相關(guān)蛋白的表達,而RAPA促進了土槿乙酸誘導(dǎo)的HO-8910細胞自噬相關(guān)蛋白的表達,且土槿乙酸能抑制PI3K/Akt通路蛋白的表達。結(jié)論土槿乙酸可通過抑制PI3K/Akt通路誘導(dǎo)HO-8910細胞自噬。

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圖1 用不同濃度的土槿乙酸(0、2、4、8 mol/L)作用HO-8910細胞2 4 h后Western blot法檢測LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Beclin-1的表達

應(yīng)用Westernblot方法檢測自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1等的表達情況。用不同濃度的土槿乙酸分別處理HO-8910細胞不同時間后,用Westernblot法檢測LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1。結(jié)果顯示,隨著土槿乙酸藥物濃度的增加或時間的延....

圖2 Western blot法檢測不同組HO-8910細胞培養(yǎng)24 h后LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Beclin-1的表達。

圖1用不同濃度的土槿乙酸(0、2、4、8mol/L)作用HO-8910細胞24h后Westernblot法檢測LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Beclin-1的表達圖3用不同濃度的土槿乙酸(0、2、4、8mol/L)作用HO-8910細胞24h后Westernblot....

圖3 用不同濃度的土槿乙酸(0、2、4、8 mol/L)作用HO-8910細胞2 4 h后Western blot法檢測Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR的表達

圖2Westernblot法檢測不同組HO-8910細胞培養(yǎng)24h后LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Beclin-1的表達。3討論

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