目的觀察丹蛭降糖膠囊保護(hù)2型糖尿病模型大鼠心肌損傷的作用;完善TLR4-MyD88-NF-κB信號(hào)通路調(diào)節(jié)糖尿病心肌損傷的病理機(jī)制;揭示丹蛭降糖膠囊防治糖尿病心肌損傷的分子機(jī)制。方法在體動(dòng)物實(shí)驗(yàn),以高脂飼料聯(lián)合鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法復(fù)制2型糖尿病大鼠模型,丹蛭降糖膠囊分別按照270、540、1080 mg/kg三個(gè)劑量組連續(xù)干預(yù)8周,通過(guò)觀察丹蛭降糖膠囊對(duì)模型大鼠一般體征(體重、飲水量、攝食量)、血糖和血脂水平、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)、心肌組織病理形態(tài)學(xué)(HE和Masson染色)的影響,研究丹蛭降糖膠囊防治2型糖尿病及并發(fā)心肌損傷的藥物效應(yīng);借助Western blot、RT-qPCR、免疫組化等現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù),研究模型大鼠心肌組織TLR4-MyD88-NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白和基因表達(dá)及下游相關(guān)炎癥因子的變化規(guī)律,觀察模型大鼠心肌組織凋亡的變化,并研究丹蛭降糖膠囊的干預(yù)作用。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn),通過(guò)體外高糖誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞損傷模型,TLR4特異性阻斷劑TAK-242及丹蛭降糖膠囊含藥血清干預(yù)后,采用MTT及流式細(xì)胞術(shù)觀察高糖對(duì)心肌細(xì)胞活力及凋亡率...

【文章頁(yè)數(shù)】：105 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞表
前言
第一部分 丹蛭降糖膠囊防治糖尿病心肌病的藥效學(xué)研究
    1.材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 藥物
        1.3 試劑
        1.4 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 2型糖尿病模型大鼠的制備
        2.2 動(dòng)物分組和給藥
        2.3 大鼠一般體征觀察
        2.4 大鼠血糖水平監(jiān)測(cè)
        2.5 大鼠血脂檢測(cè)
        2.6 大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)檢測(cè)
        2.7 大鼠心臟重量指數(shù)檢測(cè)
        2.8 大鼠心肌組織病理學(xué)檢測(cè)
        2.9 Western blot 法檢測(cè)心肌組織 TLR4-MyD88-NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)
        2.10 RT-qPCR 法檢測(cè)心肌組織 TLR4-MyD88-NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)
        2.11 ELISA 法檢測(cè)大鼠血清 TNF-α、IL-1β、IL-6 的含量
        2.12 TUNEL法檢測(cè)大鼠心肌組織細(xì)胞凋亡
        2.13 統(tǒng)計(jì)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 丹蛭降糖膠囊對(duì)大鼠一般體征的影響
        3.2 丹蛭降糖膠囊對(duì)模型大鼠血糖的影響
        3.3 丹蛭降糖膠囊對(duì)模型大鼠血脂的影響
        3.4 丹蛭降糖膠囊對(duì)模型大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的影響
        3.5 丹蛭降糖膠囊對(duì)模型大鼠心臟重量指數(shù)的影響
        3.6 丹蛭降糖膠囊對(duì)模型大鼠心肌組織病理學(xué)的影響
        3.7 模型大鼠心肌組織 TLR4-MyD88-NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的變化及丹蛭降糖膠囊的干預(yù)作用
        3.8 模型大鼠心肌組織 TLR4-MyD88-NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)的變化及丹蛭降糖膠囊的干預(yù)作用
        3.9 模型大鼠血清炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量的變化及丹蛭降糖膠囊的干預(yù)作用
        3.10 模型大鼠心肌細(xì)胞凋亡的變化及丹蛭降糖膠囊的干預(yù)作用
    4.討論
        4.1 丹蛭降糖膠囊防治糖尿病心肌病的中醫(yī)理論分析
        4.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的選擇
        4.3 陽(yáng)性藥的選擇
        4.4 免疫炎癥反應(yīng)與糖尿病心肌病
        4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
第二部分 丹蛭降糖膠囊調(diào)節(jié) TLR4-MyD88-NF-κB 信號(hào)通路抗高糖誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
    1.材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、細(xì)胞與藥物
        1.2 試劑
        1.3 儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 丹蛭降糖膠囊含藥血清制備
        2.2 H9c2細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3 不同濃度葡萄糖對(duì)H9c2心肌細(xì)胞損傷的影響
        2.4 高糖誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞損傷模型的制備
        2.5 分組及干預(yù)
        2.6 流式細(xì)胞術(shù)(AnnexinV/PI 雙染法)檢測(cè) H9c2 心肌細(xì)胞凋亡率
        2.7 Western blot 檢測(cè)蛋白的表達(dá)
        2.8 RT-qPCR 檢測(cè) mRNA 的表達(dá)
        2.9 統(tǒng)計(jì)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 不同濃度葡萄糖對(duì)H9c2心肌細(xì)胞損傷的影響
        3.2 高糖誘導(dǎo) H9c2心肌細(xì)胞TLR4-MyD88-NF-κB信號(hào)通路蛋白表達(dá)的變化及丹蛭降糖膠囊的影響
        3.3 TLR4-MyD88-NF-κB信號(hào)通路調(diào)節(jié)高糖誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞凋亡作用及丹蛭降糖膠囊的干預(yù)效應(yīng)
        3.4 丹蛭降糖膠囊干預(yù)高糖誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制
    4.討論
        4.1 高血糖與心肌細(xì)胞凋亡
        4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
全文總結(jié)及展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文、主持課題及獲獎(jiǎng)情況等
致謝



本文編號(hào)：4028115