小白菊內(nèi)酯介導(dǎo)TLR4-STAT3交叉對話調(diào)控肝纖維化進(jìn)程的研究
發(fā)布時間:2025-01-14 19:47
目的:研究小白菊內(nèi)酯(Parthenolide,PNL)通過介導(dǎo)TLR4-STAT3交叉對話改善肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cells,HSCs)活化導(dǎo)致肝纖維化的作用機(jī)制。方法:轉(zhuǎn)化生長因子-β(TransformingGrowth Factor-β,TGF-β)10ng/ml刺激HSCs或者脂多糖(Lippolysaccharide,LPS)1μg/ml刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞RAW264.7,1h 后給予 PNL(1.56μM、3.125μM、6.25μM、12.5μM、25μM);或給予 PNL(12.5μM、25μM),TLR4 抑制劑 CLI-095(1Oμg/ml),STAT3 抑制劑Guggulsterone(25μM),4h后提取細(xì)胞總蛋白和RNA,通過蛋白印跡和RT-PCR方法測定細(xì)胞中纖維化指標(biāo)α-平滑肌細(xì)胞肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型膠原蛋白(Collagen type Ⅰ,Collagen-Ⅰ)等,炎癥因子P2X7受體(P2X7r),半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Cysteine aspartic enzyme...
【文章頁數(shù)】:37 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
第二章 實驗方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗儀器
2.1.2 實驗試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.2 MTT實驗
2.2.3 提取總蛋白
2.2.4 Western Blotting實驗
2.2.5 RT-PCR實驗
2.2.6 免疫熒光實驗
2.3 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 實驗結(jié)果
3.1 PNL對細(xì)胞存活率及肝纖維化標(biāo)志物表達(dá)的影響
3.2 PNL對炎癥指標(biāo)表達(dá)的影響
3.3 PNL對凋亡指標(biāo)表達(dá)的影響
3.4 PNL對TLR4信號通路蛋白表達(dá)的影響
3.5 PNL對JAK2/STAT3信號通路蛋白表達(dá)的影響
3.6 PNL對PI3K/Akt/mTOR信號通路蛋白表達(dá)的影響
3.7 PNL對TLR4-STAT3交叉對話中多種蛋白表達(dá)的影響
3.8 PNL對兩種巨噬細(xì)胞存活率以及RAW264.7中TLR4-STAT3相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
謝辭
本文編號:4027098
【文章頁數(shù)】:37 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
第二章 實驗方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗儀器
2.1.2 實驗試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.2 MTT實驗
2.2.3 提取總蛋白
2.2.4 Western Blotting實驗
2.2.5 RT-PCR實驗
2.2.6 免疫熒光實驗
2.3 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 實驗結(jié)果
3.1 PNL對細(xì)胞存活率及肝纖維化標(biāo)志物表達(dá)的影響
3.2 PNL對炎癥指標(biāo)表達(dá)的影響
3.3 PNL對凋亡指標(biāo)表達(dá)的影響
3.4 PNL對TLR4信號通路蛋白表達(dá)的影響
3.5 PNL對JAK2/STAT3信號通路蛋白表達(dá)的影響
3.6 PNL對PI3K/Akt/mTOR信號通路蛋白表達(dá)的影響
3.7 PNL對TLR4-STAT3交叉對話中多種蛋白表達(dá)的影響
3.8 PNL對兩種巨噬細(xì)胞存活率以及RAW264.7中TLR4-STAT3相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
第四章 討論
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本文編號:4027098
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