目的:研究小白菊內酯(Parthenolide,PNL)通過介導TLR4-STAT3交叉對話改善肝星狀細胞(Hepatic stellate cells,HSCs)活化導致肝纖維化的作用機制。方法:轉化生長因子-β(TransformingGrowth Factor-β,TGF-β)10ng/ml刺激HSCs或者脂多糖(Lippolysaccharide,LPS)1μg/ml刺激小鼠腹腔巨噬細胞RAW264.7,1h 后給予 PNL(1.56μM、3.125μM、6.25μM、12.5μM、25μM);或給予 PNL(12.5μM、25μM),TLR4 抑制劑 CLI-095(1Oμg/ml),STAT3 抑制劑Guggulsterone(25μM),4h后提取細胞總蛋白和RNA,通過蛋白印跡和RT-PCR方法測定細胞中纖維化指標α-平滑肌細胞肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型膠原蛋白(Collagen type Ⅰ,Collagen-Ⅰ)等,炎癥因子P2X7受體(P2X7r),半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Cysteine aspartic enzyme...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
第二章 實驗方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 MTT實驗
        2.2.3 提取總蛋白
        2.2.4 Western Blotting實驗
        2.2.5 RT-PCR實驗
        2.2.6 免疫熒光實驗
    2.3 統(tǒng)計學處理
第三章 實驗結果
    3.1 PNL對細胞存活率及肝纖維化標志物表達的影響
    3.2 PNL對炎癥指標表達的影響
    3.3 PNL對凋亡指標表達的影響
    3.4 PNL對TLR4信號通路蛋白表達的影響
    3.5 PNL對JAK2/STAT3信號通路蛋白表達的影響
    3.6 PNL對PI3K/Akt/mTOR信號通路蛋白表達的影響
    3.7 PNL對TLR4-STAT3交叉對話中多種蛋白表達的影響
    3.8 PNL對兩種巨噬細胞存活率以及RAW264.7中TLR4-STAT3相關蛋白表達的影響
第四章 討論
參考文獻
謝辭



本文編號：4027098