目的探討高良姜素防治尿酸性腎損傷(UAN)的藥理作用及細(xì)胞機(jī)制。方法將60只小鼠隨機(jī)均分為對(duì)照組、模型組、別嘌醇組(40 mg·kg^-1)及高良姜素低、中、高劑量組(100、200、400 mg·kg^-1),除對(duì)照組外,其余各組均上午腹腔注射氧嗪酸鉀和灌胃酵母浸膏建立小鼠UAN模型,下午給予相應(yīng)藥物灌胃治療,每日1次,持續(xù)15 d。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)高良姜素對(duì)小鼠血清中尿酸(UA)、肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)水平的影響,黃嘌呤氧化酶(XOD)試劑盒檢測(cè)高良姜素對(duì)小鼠肝臟中XOD活力的影響。UA誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞制備炎癥模型,CCK8法檢測(cè)高良姜素對(duì)NRK-52E細(xì)胞活力影響,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)高良姜素對(duì)細(xì)胞上清中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)水平的影響,Western-blot法檢測(cè)高良姜素對(duì)細(xì)胞核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3(NLRP3)炎性小體蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果高良姜素能顯著降低UAN模型小鼠血清UA、Cr、BUN水平和肝臟XOD活力(P<0.05或P<...

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圖1高良姜素對(duì)UAN模型小鼠血清UA和肝臟XOD的影響

XOD是體內(nèi)合成UA的限速酶,起著調(diào)控UA生成的作用[10]。與對(duì)照組相比,模型組UA、XOD值顯著升高(P<0.01),表明小鼠高尿酸模型造模成功。與模型組相比,別嘌醇組、高良姜素各劑量組UA、XOD值均顯著降低(P<0.01),表明高良姜素可以有效降低肝臟XOD活力和血清UA....

圖2高良姜素對(duì)UAN模型小鼠Cr和BUN水平的影響

血清Cr和BUN是評(píng)估腎臟損傷的敏感指標(biāo),可以有效反應(yīng)腎功能受損情況[11]。與對(duì)照組相比,模型組Cr、BUN水平顯著升高(P<0.01),表明持續(xù)高尿酸可致小鼠腎功能損傷。與模型組相比,別嘌醇組、高良姜素各劑量組BUN極顯著降低(P<0.01),別嘌醇組Cr顯著降低(P<0.0....

圖3不同濃度高良姜素對(duì)NRK-52E細(xì)胞活力的影響

考察0～40μg·mL-1高良姜素對(duì)細(xì)胞存活率的影響。結(jié)果如圖3所示,0～20μg·mL-1的高良姜素,不論是否存在UA共同作用,均對(duì)NRK-52E細(xì)胞活性無明顯抑制作用(P>0.05)。當(dāng)濃度增至40μg·mL-1,不存在UA時(shí),NRK-52E細(xì)胞存活率為88.45%;U....

圖4高良姜素對(duì)UA誘導(dǎo)的NRK-52E細(xì)胞IL-1β、IL-18釋放的影響

使用ELISA試劑盒,檢測(cè)UA誘導(dǎo)的NRK-52E細(xì)胞炎癥因子IL-1β、IL-18的釋放情況。結(jié)果如圖4所示:當(dāng)UA誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞12h以后,與對(duì)照組相比,模型組IL-1β、IL-18釋放量均顯著上升(P<0.01),表明NRK-52E細(xì)胞炎癥模型制備成功。高良姜素(....

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