黃龍四苓湯為臨床上治療高血壓及其并發(fā)癥的一個經(jīng)驗方,由大黃、龍膽、豬苓、茯苓、澤瀉、白術(shù)等六味中藥配伍而成。本論文的主要目的是對方中君藥大黃、臣藥龍膽兩味藥材的有效部位進行提取、純化工藝的優(yōu)選,以及對二者配伍后的各有效成分的溶出量的變化進行研究。主要研究內(nèi)容概述如下:1.大黃提取純化工藝的研究:以高效液相色譜法測定大黃中五種蒽醌類成分(蘆薈大黃素、大黃酸、大黃酚、大黃素、大黃素甲醚)的含量為指標,通過對4種提取方法(冷浸法、溫浸法、超聲法、加熱回流提取法)的考察,確定最佳提取方法為加熱回流提取法;采用L_9(3~4)正交試驗,以高效液相色譜法測定大黃中五種蒽醌類成分的含量為指標,對大黃蒽醌類成分提取量的主要影響因素提取次數(shù)、提取時間、乙醇濃度及用量進行考察,確定最佳提取工藝為:70%乙醇12倍量,提取3次,每次1小時;采用大孔吸附樹脂柱層析法純化大黃粗提物,以大黃五種蒽醌類成分為指標,考察9種類型大孔吸附樹脂的吸附與解吸附性能,篩選確定純化大黃提取物有效部位的最佳樹脂型號為D101型,進一步采用單因素試驗結(jié)合L_9(3~4)正交試驗方法,對該樹脂的吸附特性和柱層析工藝參數(shù)進行優(yōu)化,得出最佳純化工藝條件為:柱徑比為3:1,上樣藥液質(zhì)量濃度(生藥材)0.1g/mL,以4BV/h流速上樣54mL,用7BV量60%乙醇進行解吸附,以2BV/h的流速洗脫,大黃粗提物經(jīng)D101型大孔吸附樹脂純化后,總蒽醌提取物含量達47.89%。2.龍膽提取純化工藝的研究:以高效液相色譜法測定龍膽中龍膽苦苷的提取量為指標,通過對4種提取方法(冷浸法、溫浸法、超聲法、加熱回流提取法)的考察,確定最佳提取方法為加熱回流提取法;采用單因素試驗,對提取粒度、提取溶媒、提取溫度等因素條件進行考察,篩選最佳提取工藝參數(shù);進一步結(jié)合L_9(3~4)正交試驗的方法對龍膽提取工藝進行優(yōu)化,確定最佳提取工藝為:70%的乙醇10倍量,提取3次,每次1小時;采用大孔吸附樹脂柱層析法對龍膽粗提物進行純化,以龍膽苦苷的比吸附量及解吸率為指標,考察7種類型大孔吸附樹脂的吸附與解吸附性能,篩選確定純化龍膽有效部位提取物的最佳樹脂型號為SP700型,進而通過單因素試驗結(jié)合L_9(3~4)正交試驗的方法,對該樹脂的吸附特性和各影響因素進行優(yōu)化,得出龍膽提取物的最佳純化工藝條件為:柱徑比9:1,上樣藥液質(zhì)量濃度0.1g/mL,以4BV/h的流速上樣135mL,用6BV量30%的乙醇進行解吸附,以1BV/h的流速洗脫,龍膽粗提物經(jīng)SP700大孔吸附樹脂純化后,龍膽提取物中龍膽苦苷含量達49.84%。3.大黃-龍膽二者配伍提取對有效成分溶出量的影響:建立二極管陣列高效液相色譜法,同時測定大黃中蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚和龍膽中龍膽苦苷六種有效成分的含量:采用Agilent反相C_(18)色譜柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.02%磷酸水為流動相進行梯度洗脫,檢測波長:254nm,270nm;在大黃、龍膽各最佳提取工藝條件下,將大黃-龍膽配伍提取,采用HPLC法檢測大黃中五種蒽醌類成分和龍膽中龍膽苦苷成分提取溶出的情況,并進行統(tǒng)計分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)大黃-龍膽配伍提取對各自有效成分的溶出量均有一定的影響,各有效成分溶出量隨著配伍比例的改變而變化,并具有統(tǒng)計學顯著性差異。
【學位單位】：河南大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2017
【中圖分類】：R284
【部分圖文】：

圖 2-1 大黃素標準曲線,Tab2-1 The standard curve of Rheum emodin.2.4 精密度考察素對照品溶液 2mL，水浴揮干，加入 0.5%醋酸鎂甲醇溶液 10mL，待充分m 處測吸光度，經(jīng)計算，結(jié)果見表 2-2，RSD 為 0.82%，表明儀器精密度表 2-2 精密度試驗結(jié)果Tab2-2 Results of precision次數(shù) 吸光度(A) 平均值 RSD（%1 0.5230.529 0.822 0.5293 0.531

種方法提取大黃總蒽醌類成分的比較

種方法提取大黃中各蒽醌類成分的比較

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