發(fā)布時間：2020-09-27 19:08

　　 目的探討陽和湯對木瓜蛋白酶誘導的兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型滑膜組織炎癥因子的影響,以進一步明確陽和湯治療骨性關(guān)節(jié)炎的作用機制。方法將42只4-6月齡健康新西蘭兔按照隨機數(shù)字表法,隨機分成空白對照組(9只)和模型組(33只)�？瞻讓φ战M不造模,其余動物造模,采用關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射4%木瓜蛋白酶溶液制備膝骨關(guān)節(jié)炎模型。2周后從空白對照組和模型組各自隨機選取3只進行模型鑒定。將造模成功的新西蘭大白兔隨機分為模型組,陽和湯低劑量組,陽和湯中劑量組,陽和湯高劑量組和陽性對照組,每組各6只。造模成功后開始干預(yù)治療,分別給予陽和湯組低、中、高劑量組的每只兔分別給予3 g/kg·d、6 g/kg·d、12 g/kg·d陽和湯灌胃,陽性對照組的每只兔給予24mg/kg·d西樂葆灌胃�？瞻讓φ战M與模型組分別給予等量生理鹽水灌胃。每日一次,連續(xù)灌胃治療2周。治療2周后,觀察兔膝關(guān)節(jié)腫脹度,測量膝關(guān)節(jié)周徑及局部皮溫,麻醉后取材,膝關(guān)節(jié)大體觀察,取兔膝關(guān)節(jié)滑膜,常規(guī)固定包埋及切片,對切片進行蘇木素-伊紅染色。Lequesne評分評估動物行為學,酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清、關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量,光鏡觀察各組滑膜組織病理;免疫組化與圖像定量分析IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS蛋白表達。結(jié)果1.膝關(guān)節(jié)皮溫、關(guān)節(jié)周徑結(jié)果:與空白組比較,模型組膝關(guān)節(jié)皮溫升高(P0.05),關(guān)節(jié)周徑明顯增大(P0.05);與模型組比較,各治療組膝關(guān)節(jié)皮溫降低(P0.05),關(guān)節(jié)周徑減小(P0.05);與陽性對照組比較,陽和湯中劑量組局部皮溫較低(P0.05),關(guān)節(jié)周徑較小(P0.05)。2.Lequesne評分結(jié)果:造模結(jié)束后,與空白對照組比較,模型組評分升高(P0.05);與模型組比較,陽和湯中劑量組和陽性對照組Lequesne評分均降低(P0.05);與陽性對照組比較,陽和湯評分較低,但二者無明顯差異(P0.05)。3.ELISA檢測結(jié)果:與空白對照組比較,模型組血清、關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量增加(P0.05);與模型組比較,陽和湯中劑量組和陽性對照組血清、關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量降低(P0.05)。4.HE染色結(jié)果:與空白組相比,模型組可見內(nèi)層滑膜細胞增生顯著,細胞排列紊亂,可見較多淋巴細胞浸潤和少量的中性粒細胞,血管增生,充血,纖維組織增生;治療后與模型組比較,各治療組滑膜增生層數(shù)、淋巴細胞中性粒細胞浸潤以及血管增生情況有所改善,其中,陽和湯中劑量組和陽性對照組增生明顯減少,炎性細胞減少。5.免疫組化結(jié)果:與空白對照組比較,模型組滑膜IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS免疫組化表達增加,IOD值升高(P0.05);與模型組比較,陽和湯中劑量組和陽性對照組滑膜IL-1β、TNF-α、COX-2、iNOS免疫組化表達減少,IOD值降低(P0.05)。結(jié)論本實驗研究發(fā)現(xiàn)陽和湯方能減輕兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)腫脹,皮溫升高等癥狀,改善兔膝關(guān)節(jié)功能,并通過抑制COX-2炎癥途徑和iNOS炎癥途徑,減少IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、iNOS的表達,減輕兔膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜炎癥狀,延緩膝骨關(guān)節(jié)炎的進展。
【學位單位】：福建中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
Abstract
引言
實驗材料
    1 實驗動物
    2 實驗主要儀器及耗材
    3 實驗主要試劑
    4 實驗藥物及配制
實驗方法
    1 骨關(guān)節(jié)炎模型的建立及模型鑒定
    2 藥物干預(yù)
    3 一般情況觀察與局部皮溫、關(guān)節(jié)周徑的測量
    4 動物行為學評分
    5 取材
    6 ELISA檢測關(guān)節(jié)液、血清中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO濃度
    7 滑膜組織形態(tài)學觀察
    8 滑膜組織免疫組化檢測IL-1β、TNF-α、COX-2、i NOS蛋白表達
    9 統(tǒng)計分析
實驗結(jié)果
    1 動物基本情況
    2 各組膝關(guān)節(jié)皮溫、關(guān)節(jié)周徑及Lequesne評分
    3 各組關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量
    4 各組血清中IL-1β、TNF-α、COX-2、PGE2、NO含量
    5 滑膜組織形態(tài)學觀察
    6 免疫組織化學檢測各組滑膜IL-1β、TNF-α、COX-2、i NOS表達及IOD值比較
討論
    1 現(xiàn)代醫(yī)學對膝骨關(guān)節(jié)炎的認識
    2 中醫(yī)學對本病的認識
    3 陽和湯治療KOA的理論依據(jù)
    4 膝骨關(guān)節(jié)炎模型的建立與評價
    5 指標的選擇
    6 陽和湯對KOA動物模型作用機制探討
結(jié)論
不足與展望
參考文獻
附錄
文獻綜述
    參考文獻
致謝
作者簡歷

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本文編號：2828254