失眠是一種常見的睡眠障礙性疾病,對人們的生活造成了嚴重的影響,很多中藥治療失眠均有較好的療效,百合地黃湯源于《金匱要略》,是治療失眠的經(jīng)方,但其作用機制尚不明確,本課題在優(yōu)化百合地黃湯最佳提取工藝的基礎上,研究百合地黃湯治療失眠的作用機制,并篩選百合地黃湯治療失眠的最佳有效部位。本課題進行以下實驗:(1)采用正交設計,以乙醇濃度、溶劑倍量、浸泡時間、提取時間為考察因素,每個因素選取3個水平,以百合地黃湯中梓醇含量和浸膏得率為評價指標,采取綜合加權評分法對實驗結果進行分析。結果表明百合地黃湯的最佳提取工藝為12倍量50%乙醇浸泡90min,提取60min,梓醇含量和浸膏得率較高,且經(jīng)驗證實驗,工藝穩(wěn)定可行,可用于后續(xù)研究中。(2)采用腹腔注射PCPA建立大鼠失眠模型,將造模成功的大鼠隨機分為模型組、地西泮組、百合地黃湯低、中、高劑量組,另設空白組,連續(xù)給藥7d,采用曠場實驗測定行為學評分,翻正反射實驗評價百合地黃湯對大鼠睡眠時間的影響;建立大鼠腦部單胺類神經(jīng)遞質的HPLC-ECD測定方法,并采用該法檢測大鼠皮層、腦干和海馬中DA、5-HIAA、HVA和5-HT的含量。與空白組相比,模型組大鼠體重和曠場得分明顯降低(p0.05),中央格停留時間、修飾次數(shù)、糞便顆粒數(shù)及睡眠潛伏期等指標明顯升高(p0.05),模型組大鼠不同腦區(qū)中DA含量明顯升高,5-HT含量明顯降低(p0.05);與模型組相比,各治療組大鼠的中央格停留時間、修飾次數(shù)和糞便顆粒數(shù)明顯降低(p0.05),大鼠的睡眠潛伏期縮短,且百合地黃湯組大鼠的睡眠持續(xù)時間明顯延長(p0.05),百合地黃湯組大鼠皮層中DA含量明顯降低(p0.05),地西泮組和百合地黃湯低劑量組大鼠皮層、腦干和海馬中5-HT含量明顯升高(p0.05),百合地黃湯中、高劑量組大鼠腦干和海馬中5-HT含量升高(p0.05);空白組、模型組、地西泮組大鼠皮層中DA含量較高,可以檢出HVA,其余各組均未檢出。結果表明百合地黃湯可改善失眠模型的大鼠行為學和睡眠,對大鼠腦部單胺類神經(jīng)遞質的調節(jié)作用可能是其治療失眠的作用機制。(3)建立大鼠血清中氨基酸類神經(jīng)遞質的LC-MS/MS測定方法,并采用該法檢測大鼠血清中Glu和GABA的含量。與空白組相比,模型組大鼠血清中GABA、Glu含量無明顯變化,Glu和GABA的比值顯著升高(p0.01);與模型組相比較,地西泮組、百合地黃湯中劑量組和百合地黃湯高劑量組大鼠血清中Glu/GABA的比值明顯降低(p0.05)。結果表明百合地黃湯發(fā)揮治療失眠的作用與調節(jié)大鼠體內抑制性神經(jīng)遞質GABA和興奮性神經(jīng)遞質Glu的含量密切相關。(4)百合地黃湯提取物依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取,分離得不同萃取部位,以果蠅失眠模型篩選鎮(zhèn)靜催眠的最佳有效部位,并研究其對果蠅腦部DA、5-HIAA、HVA和5-HT含量的影響。與空白組相比,模型組果蠅的睡眠時間顯著縮短(p0.01),果蠅腦部DA含量明顯升高(p0.05),5-HIAA和5-HT的含量明顯降低(p0.05);與模型組相比,百合地黃湯全方組、石油醚部位低劑量組、二氯甲烷部位中劑量組、乙酸乙酯部位中劑量組、水飽和正丁醇部位低劑量組果蠅睡眠時間明顯延長(p0.05),各提取部位組果蠅腦部的DA和HVA含量降低,5-HT和5-HIAA含量升高,二氯甲烷部位對果蠅睡眠和果蠅腦部單胺類神經(jīng)遞質的調節(jié)作用最為明顯。本課題首次以果蠅為模式生物篩選百合地黃湯治療失眠的最佳有效部位,結果表明百合地黃湯治療失眠的最佳有效部位為二氯甲烷部位,各提取部位對果蠅腦部單胺類神經(jīng)遞質含量具有一定的調節(jié)作用。
【學位單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R284;R285.5
【部分圖文】：

１０卟、１２隊、１５（＿ｉＬ、１８｜ｉＬ，測定梓醇的峰面積，以色譜峰面積為縱坐標（Ｙ），對逡逑照品的質量（叩）為橫坐標（Ｘ）繪制標準曲線，其回歸方程為Ｙ＝６２１０６８．３１Ｘ－２０４９．６４，逡逑Ｒ２＝０．９９９９，梓醇在０．０３？０．１８丨ｉｇ范圍內具有良好的線性關系。標準曲線見

取不同濃度的混合對照品溶液，分別進樣５邋ｐＬ。以對照品的質量（Ｘ）為橫坐標、逡逑峰面積（Ｙ）為縱坐標進行回歸分析，各項線性關系均良好。結果見表９，標準曲線見逡逑圖４。逡逑表９線性關系考察結果逡逑Ｔａｂｌｅ邋９邋Ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋ｌｉｎｅａｒ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ逡逑成分邐線性范圍／ｎｇ邐線性方程邐Ｒ２值逡逑ＤＡ邐０．１５邋？４．８０邐Ｙ＝７５８５３８Ｘ－４６７２６邐０．９９９９逡逑５－ＨＩＡＡ邐０．０７５？２．４０邐Ｙ＝１６７４７４４．４８Ｘ－１１５８８７．８１邐０．９９９３逡逑ＨＶＡ邐０．２０邋？６．４０邐Ｙ＝５７４４３４Ｘ－１８０５６邐０．９９９８逡逑５－ＨＴ邐０．１２５邋？４．００邐Ｙ＝１５４９８５８．１７Ｘ－１５６９６０．３１邐０．９９９９逡逑４００００００１邐Ｙ＝７５８５３８Ｘ－４６７２６逡逑Ｒ２＝０．９９９９邐ｙ逡逑３００００００－逡逑＜２００００００－逡逑１００００００－邋＾逡逑，逡逑０邐２邐４邐６逡逑ｍ／ｎｇ逡逑Ａ逡逑４４逡逑

外加氨基酸的質量濃度為橫坐標（Ｘ），以外加氨基酸峰面積與內標物峰面積比值為縱逡逑坐標（Ｙ），進行回歸分析，ＧＡＢＡ、Ｇｌｕ的線性關系良好。結果見表１５，標準曲線見逡逑圖６。逡逑表１５線性關系考察結果逡逑Ｔａｂｌｅ邋１５邋Ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋ｌｉｎｅａｒ邋ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ逡逑成分邐線性范圍線性方程邐Ｒ２值逡逑ＧＡＢＡ邐２邋？８０００邐Ｙ＝０．０００１Ｘ＋０．０５１０邐０．９９５２逡逑Ｇｌｕ邐５邋？１６０００邐Ｙ＝０．０００１Ｘ＋０．０３８２邐０．９９８２逡逑５６逡逑

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 馬獻中;王保平;;加味百合地黃湯治療癔病療效觀察[J];新中醫(yī);2013年04期

2 陳玉星;;百合地黃湯加味治療絕經(jīng)前后諸癥46例臨床觀察[J];中醫(yī)臨床研究;2012年06期

3 宮鳳蘭,曲艷青,劉巖;百合地黃湯加味的臨床應用[J];內蒙古中醫(yī)藥;2003年S1期

4 金杰,陳海燕,趙鐸,鄭紹周;加味百合地黃湯治療抑郁性神經(jīng)癥35例[J];山西中醫(yī);2001年02期

5 郎村榮;劉榮和;劉啟能;;百合地黃湯加味對家兔腦電圖的影響[J];瀘州醫(yī)學院學報;1987年02期

6 陳連起;百合地黃湯的臨床應用[J];甘肅中醫(yī)學院學報;1988年02期

7 殷明貴;更年期神經(jīng)官能癥驗案[J];新中醫(yī);1988年03期

8 楊志勤;;百合地黃湯異治舉隅[J];成都中醫(yī)學院學報;1988年02期

9 胡義保;百合地黃湯加味治愈輕微腦功能失調綜合征[J];四川中醫(yī);1989年10期

10 任美華;;加味百合地黃湯治驗二則[J];湖南中醫(yī)雜志;1990年06期

相關會議論文 前4條

1 丁世幸;;百合地黃湯臨床應用舉隅[A];中華中醫(yī)藥學會中醫(yī)藥傳承創(chuàng)新與發(fā)展研討會專輯[C];2007年

2 郭秀芝;;淺談中藥鮮藥與臨床應用特點[A];中國自然資源學會天然藥物資源專業(yè)委員會成立大會暨第一次學術研討會會刊[C];1994年

3 孟慶法;孫政;;淺淡焦慮癥的中西藥及心理治療[A];第三屆全國中西醫(yī)結合神經(jīng)系統(tǒng)疾病學術會議論文集[C];2000年

4 沈海明;;桂枝湯加減治療更年期綜合征1例淺析[A];中華中醫(yī)藥學會全科醫(yī)學分會成立大會暨2016年學術年會論文集[C];2016年

相關重要報紙文章 前3條

1 鄭婷 廣東省揭陽市中醫(yī)院;盧永兵百合地黃湯治驗[N];中國中醫(yī)藥報;2017年

2 湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院 范金茹;怎樣學好中醫(yī)[N];中國中醫(yī)藥報;2011年

3 湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院教授 范金茹;學習中醫(yī)重在領悟[N];健康報;2015年

相關博士學位論文 前1條

1 薛劍;百合地黃湯對CUMS抑郁模型大鼠的作用及機理研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2018年

相關碩士學位論文 前10條

1 鄭竹宏;百合地黃湯治療失眠的作用機制研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2019年

2 周湘樂;百合地黃湯對抑郁模型大鼠血清IL-1β及海馬5-HT水平變化的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學;2018年

3 諸葛葉婷;加味百合地黃湯對干燥綜合征焦慮抑郁狀態(tài)患者P2X_7R炎性通路干預作用研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2018年

4 趙蕾;百合地黃湯干預陰虛型心理亞健康臨床代謝組學研究[D];山西大學;2017年

5 侯德俊;百合地黃湯合甘麥大棗湯治療肝腎陰虛型更年期綜合征的臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2010年

6 邢如意;經(jīng)方解郁文獻及臨床運用探討[D];山東中醫(yī)藥大學;2016年

7 楊玉帆;抑郁癥之文獻研究及中醫(yī)養(yǎng)生防治探討[D];廣州中醫(yī)藥大學;2009年

8 王兮;百合地黃湯對陰虛型心理亞健康人群的臨床干預研究[D];山西醫(yī)科大學;2014年

9 李岳芳;經(jīng)方解郁證治探討及柴胡桂枝湯解郁文獻研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2014年

10 張強;高天舒教授治療更年期綜合征經(jīng)驗[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2013年

本文編號：2820077