【摘要】：鹿茸,是梅花鹿或馬鹿的雄鹿未骨化而帶茸毛的幼角,含磷脂、糖脂、脂肪酸、蛋白質(zhì)等成分,具有免疫調(diào)節(jié)、防癌、抗骨質(zhì)疏松、抗炎等多種藥理活性。近些年來(lái),因天然多肽類成分在皮膚抗衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用變得廣泛,使天然多肽越來(lái)越受到關(guān)注。因此,本課題以提取鹿茸中生物活性多肽為切入點(diǎn),以不同組份多肽的抗氧化活性、促細(xì)胞增殖及促膠原蛋白分泌為篩選條件,獲得能夠促進(jìn)小鼠成纖維細(xì)胞(NIH/3T3)增殖和膠原蛋白分泌的鹿茸多肽,并進(jìn)行機(jī)制研究,旨在提高鹿茸多肽的提取率,體現(xiàn)鹿茸的藥用價(jià)值,對(duì)鹿茸進(jìn)一步開發(fā)利用具有指導(dǎo)性意義。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1、以鹿茸為原料,采用超聲提取法對(duì)鹿茸多肽提取進(jìn)行單因素考察及響應(yīng)面優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),最終獲得鹿茸多肽的最佳提取工藝為:超聲時(shí)長(zhǎng)46min,pH值5.8,料液比15倍,乙醇濃度46%。2、將通過Sephadex G-25除鹽后的鹿茸多肽通過膜分離技術(shù)得到1-3kDa、3-5kDa、5-10kDa三段鹿茸多肽,利用MALDI-TOF-MS確定其分子量。3、分別通過抗氧化、NIH/3T3增殖及膠原蛋白分泌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)鹿茸多肽的活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與空白組比較,1-3kDa的鹿茸多肽的抗氧化能力最好,3-5kDa的鹿茸多肽的促NIH/3T3細(xì)胞的增殖效果最好,5-10kDa的鹿茸多肽的促膠原蛋白分泌的效果最好。4、對(duì)1-10kDa的鹿茸多肽進(jìn)行NIH/3T3增殖能力和膠原蛋白分泌的影響及機(jī)制研究。與對(duì)照組相比,1-10kDa的鹿茸多肽能夠促進(jìn)NIH/3T3細(xì)胞的增殖,促進(jìn)膠原蛋白的分泌及細(xì)胞劃痕的愈合;Western blotting法和免疫熒光法檢測(cè)NIH/3T3細(xì)胞的p-ERK1/2和TGF-β_1表達(dá)均增加,說(shuō)明其機(jī)理可能是通過激活ERK1/2的磷酸化和TGF-β_1的表達(dá)實(shí)現(xiàn)。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R284;R285
【圖文】：

圖 1.1 料液比對(duì)鹿茸多肽提取的影響1 Effect of material-liquid ratio on extraction of pilose antl鹿茸多肽含量的影響 確定料液比條件為 1：12，固定 pH 值為 5、超聲時(shí)不同的乙醇濃度對(duì)多肽含量的影響。將該不同條。由圖 1.2 可知，鹿茸多肽含量隨著乙醇濃度的增，在乙醇濃度為 60%時(shí)達(dá)到最高，故采用乙醇濃2。

圖 1.1 料液比對(duì)鹿茸多肽提取的影響 of material-liquid ratio on extraction of pilose antler p肽含量的影響比條件為 1：12，固定 pH 值為 5、超聲時(shí)長(zhǎng)乙醇濃度對(duì)多肽含量的影響。將該不同條件.2 可知，鹿茸多肽含量隨著乙醇濃度的增加濃度為 60%時(shí)達(dá)到最高，故采用乙醇濃度為

圖 1.3 pH 值對(duì)鹿茸多肽提取的影響Fig.1.3 Effect of pH on the extraction of pilose antler poly對(duì)鹿茸多肽含量的影響驗(yàn)分別確定料液比條件為 1:12，乙醇濃度為 60%察不同的超聲時(shí)長(zhǎng)對(duì)多肽含量的影響。將該不同條定。由圖 1.4 可知，在 10-40 min 時(shí)，多肽含量隨 min 時(shí)又開始緩慢下降，故選用超聲時(shí)長(zhǎng) 40 min 進(jìn)

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本文編號(hào)：2807809