【摘要】：研究目的:對(duì)麥冬類中藥的名稱、產(chǎn)地、基原進(jìn)行本草考證。闡明麥冬藥用的歷史沿革及品種;研究不同來(lái)源的湖北麥冬、川麥冬、福建麥冬多糖的結(jié)構(gòu)特征,并比較體外抗糖尿病作用及其降糖機(jī)理,為臨床合理應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法:通過(guò)考證歷代本草著作,并結(jié)合資源調(diào)查及現(xiàn)代文獻(xiàn)比較分析古今中藥麥冬的基原、產(chǎn)地及藥用的異同。在相同實(shí)驗(yàn)條件下,對(duì)不同來(lái)源的湖北麥冬、川麥冬、福建麥冬多糖進(jìn)行提取、分離與純化。采用蒽酮-硫酸法測(cè)定總多糖含量;氣相色譜法分析單糖組成;凝膠滲透色譜法測(cè)定多糖分子量;甲基化、高碘酸氧化-Smith降解法分析糖殘基的取代位置及鏈接順序;FT-IR、NMR進(jìn)一步確證多糖的基本結(jié)構(gòu)與構(gòu)型。最后運(yùn)用HepG2細(xì)胞和3T3-L1細(xì)胞胰島素抵抗模型考察3種多糖LSP、LMP、OJP對(duì)細(xì)胞葡萄糖消耗的影響,并通過(guò)RT-PCR及免疫蛋白印記法探討改善胰島素抵抗的作用機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:本草考證結(jié)果表明,麥冬的別名雖多,但并未流傳成常用名,藥材名只有“麥門冬”和“麥冬”。根據(jù)主要產(chǎn)地、原植物形態(tài)和藥用情況分析,可以斷定麥冬主要產(chǎn)于我國(guó)浙江建德、福建泉州、四川綿陽(yáng)、湖北襄陽(yáng)及周邊地區(qū),來(lái)源為百合科沿階草屬(Ophiopogon)和山麥冬屬(Liriope)植物的塊根,古今用藥基本一致。湖北麥冬、川麥冬和福建麥冬多糖的提取率分別為53.2±0.78%、55.2±1.86%和54.7±0.76%,均高于之前的報(bào)道�？偺呛糠謩e為92.7±3.5%(LSP)、90.1±4.7%(LMP)、91.1±5.1%(OJP)。LSP、LMP、OJP的平均分子量分別為4742 Da、4138 Da、4925 Da,分散度分別為1.14(LSP)、1.20(LMP)、1.12(OJP)。3種多糖均由葡萄糖、果糖兩種單糖組成,多糖中果糖與葡萄糖的摩爾比例分別為28:1(LSP)、29:1(OJP)、24:1(LMP),以果糖為主。高碘酸氧化-Smith降解反應(yīng)推測(cè)出氧化的主產(chǎn)物為丙三醇,該結(jié)果證明單糖3、4位羥基沒(méi)有被取代,說(shuō)明多糖的糖苷鍵主要由1,2,6位羥基形成。甲基化分析表明3種多糖的糖殘基為Fru-(2→、→2)-Fru-(6→、→6)-Glc-(1→、→1,2)-Fru-(6→,比例分別為4.99:18.16:1.0:5.28(LSP)、6.84:15.75:1.0:5.80(OJP)、8.26:12.29:1.0:3.87(LMP),且在→1,2)-Fru-(6→果糖單元的1位羥基有一個(gè)β-Fructose支鏈。紅外光譜在3400 cm~(-1)附近均有一個(gè)很強(qiáng)的寬單峰,說(shuō)明糖鏈中有大量羥基存在。~1H-NMR和~(13)C-NMR分別證實(shí)葡萄糖為α-D-構(gòu)型,果糖為β-D-構(gòu)型。三種多糖均能夠增加HepG2和3T3-L1胰島素抵抗細(xì)胞的糖消耗量,與模型組比較有顯著性差異,不同多糖的降糖活性差異不顯著。多糖組細(xì)胞InsR、PI3K、AKT、PPARγ的mRNA及蛋白表達(dá)量較模型組增加,且InsR、PPARγ較模型組差異顯著,而PTP1B的表達(dá)量較模型組顯著下降,說(shuō)明3種多糖均能通過(guò)改善胰島素抵抗促進(jìn)葡萄糖吸收。結(jié)論:川麥冬、杭麥冬、福建麥冬和湖北麥冬的來(lái)源與產(chǎn)地古今用藥基本一致,均作中藥麥冬使用。三種多糖均由葡萄糖和果糖組成,單糖比例及相對(duì)分子量存在較小的差異,糖鏈基本連接方式一致,但比例不同;均具有體外降糖活性,且三者沒(méi)有顯著性差異。本論文成果為不同來(lái)源麥冬的品質(zhì)評(píng)價(jià)和作為治療糖尿病的潛在性藥物提供了依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R281;R285
【圖文】：

192-2 A. LSP, B. LMP, C. OJPFig. 2-2 HPGPC profiles of polysaccharides A. LSP, B. LMP, C. OJP3.2 含糖量的測(cè)定濃度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 1-3 所示，線性范圍為 3.4~17 μg/mL。得到線性回

293-4 HPGPC-ELSD . a. LSP b. LMPc. OJP 1. 4.Fig. 3-4 HPGPC-ELSD chromatograms of hydrolyzates from LSP (a),LMP (b) and OJP (c). 1. Fructose, 4. Glucose從圖 3-4 中可以看出在該色譜條件下，單糖得以很好的分離，3 種多糖的水產(chǎn)物均為葡萄糖和果糖，且果糖含量遠(yuǎn)大于葡萄糖。但 ELSD 對(duì)果糖及葡萄糖響應(yīng)度不一致，即使相同濃度的兩種單糖，峰面積也相差很大，故該方法難以確定量。3.2.3 GC 法分析結(jié)果糖類無(wú)紫外吸收官能團(tuán)，也不具有揮發(fā)性，故需要對(duì)水解后的多糖進(jìn)行衍后再進(jìn)行氣相分析。單糖標(biāo)準(zhǔn)品及水解后的多糖衍生物氣相色譜圖如圖3-5所示

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2805895