發(fā)布時間：2020-08-27 08:57

【摘要】：研究目的:對麥冬類中藥的名稱、產(chǎn)地、基原進行本草考證。闡明麥冬藥用的歷史沿革及品種;研究不同來源的湖北麥冬、川麥冬、福建麥冬多糖的結(jié)構特征,并比較體外抗糖尿病作用及其降糖機理,為臨床合理應用提供實驗依據(jù)。實驗方法:通過考證歷代本草著作,并結(jié)合資源調(diào)查及現(xiàn)代文獻比較分析古今中藥麥冬的基原、產(chǎn)地及藥用的異同。在相同實驗條件下,對不同來源的湖北麥冬、川麥冬、福建麥冬多糖進行提取、分離與純化。采用蒽酮-硫酸法測定總多糖含量;氣相色譜法分析單糖組成;凝膠滲透色譜法測定多糖分子量;甲基化、高碘酸氧化-Smith降解法分析糖殘基的取代位置及鏈接順序;FT-IR、NMR進一步確證多糖的基本結(jié)構與構型。最后運用HepG2細胞和3T3-L1細胞胰島素抵抗模型考察3種多糖LSP、LMP、OJP對細胞葡萄糖消耗的影響,并通過RT-PCR及免疫蛋白印記法探討改善胰島素抵抗的作用機理。實驗結(jié)果:本草考證結(jié)果表明,麥冬的別名雖多,但并未流傳成常用名,藥材名只有“麥門冬”和“麥冬”。根據(jù)主要產(chǎn)地、原植物形態(tài)和藥用情況分析,可以斷定麥冬主要產(chǎn)于我國浙江建德、福建泉州、四川綿陽、湖北襄陽及周邊地區(qū),來源為百合科沿階草屬(Ophiopogon)和山麥冬屬(Liriope)植物的塊根,古今用藥基本一致。湖北麥冬、川麥冬和福建麥冬多糖的提取率分別為53.2±0.78%、55.2±1.86%和54.7±0.76%,均高于之前的報道�？偺呛糠謩e為92.7±3.5%(LSP)、90.1±4.7%(LMP)、91.1±5.1%(OJP)。LSP、LMP、OJP的平均分子量分別為4742 Da、4138 Da、4925 Da,分散度分別為1.14(LSP)、1.20(LMP)、1.12(OJP)。3種多糖均由葡萄糖、果糖兩種單糖組成,多糖中果糖與葡萄糖的摩爾比例分別為28:1(LSP)、29:1(OJP)、24:1(LMP),以果糖為主。高碘酸氧化-Smith降解反應推測出氧化的主產(chǎn)物為丙三醇,該結(jié)果證明單糖3、4位羥基沒有被取代,說明多糖的糖苷鍵主要由1,2,6位羥基形成。甲基化分析表明3種多糖的糖殘基為Fru-(2→、→2)-Fru-(6→、→6)-Glc-(1→、→1,2)-Fru-(6→,比例分別為4.99:18.16:1.0:5.28(LSP)、6.84:15.75:1.0:5.80(OJP)、8.26:12.29:1.0:3.87(LMP),且在→1,2)-Fru-(6→果糖單元的1位羥基有一個β-Fructose支鏈。紅外光譜在3400 cm~(-1)附近均有一個很強的寬單峰,說明糖鏈中有大量羥基存在。~1H-NMR和~(13)C-NMR分別證實葡萄糖為α-D-構型,果糖為β-D-構型。三種多糖均能夠增加HepG2和3T3-L1胰島素抵抗細胞的糖消耗量,與模型組比較有顯著性差異,不同多糖的降糖活性差異不顯著。多糖組細胞InsR、PI3K、AKT、PPARγ的mRNA及蛋白表達量較模型組增加,且InsR、PPARγ較模型組差異顯著,而PTP1B的表達量較模型組顯著下降,說明3種多糖均能通過改善胰島素抵抗促進葡萄糖吸收。結(jié)論:川麥冬、杭麥冬、福建麥冬和湖北麥冬的來源與產(chǎn)地古今用藥基本一致,均作中藥麥冬使用。三種多糖均由葡萄糖和果糖組成,單糖比例及相對分子量存在較小的差異,糖鏈基本連接方式一致,但比例不同;均具有體外降糖活性,且三者沒有顯著性差異。本論文成果為不同來源麥冬的品質(zhì)評價和作為治療糖尿病的潛在性藥物提供了依據(jù)。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R281;R285
【圖文】：

192-2 A. LSP, B. LMP, C. OJPFig. 2-2 HPGPC profiles of polysaccharides A. LSP, B. LMP, C. OJP3.2 含糖量的測定濃度-吸光度標準曲線如圖 1-3 所示，線性范圍為 3.4~17 μg/mL。得到線性回

293-4 HPGPC-ELSD . a. LSP b. LMPc. OJP 1. 4.Fig. 3-4 HPGPC-ELSD chromatograms of hydrolyzates from LSP (a),LMP (b) and OJP (c). 1. Fructose, 4. Glucose從圖 3-4 中可以看出在該色譜條件下，單糖得以很好的分離，3 種多糖的水產(chǎn)物均為葡萄糖和果糖，且果糖含量遠大于葡萄糖。但 ELSD 對果糖及葡萄糖響應度不一致，即使相同濃度的兩種單糖，峰面積也相差很大，故該方法難以確定量。3.2.3 GC 法分析結(jié)果糖類無紫外吸收官能團，也不具有揮發(fā)性，故需要對水解后的多糖進行衍后再進行氣相分析。單糖標準品及水解后的多糖衍生物氣相色譜圖如圖3-5所示

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

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本文編號：2805895