目的以中藥白蘞為原料,提取白蘞多糖并采用膜分離技術(shù)將多糖按分子量分段,篩選白蘞多糖免疫活性分子量段并分離純化得到白蘞活性均一多糖,通過化學(xué)方法與光譜方法結(jié)合分析其結(jié)構(gòu)特征,確定免疫調(diào)節(jié)活性的多糖類型,為深入研究其機制和制劑創(chuàng)新奠定基礎(chǔ)。方法(1)采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化水煎煮法提取白蘞多糖的工藝,得到白蘞多糖后采用TCA法除去多糖中的蛋白質(zhì),脫蛋白后的總多糖(AJP)經(jīng)膜分離得到7個不同分子量段組分,濾膜的分子量截留值分別為150 kDa、100 kDa、50 kDa、20 kDa、10 kDa和6 kDa。(2)白蘞多糖免疫活性研究:將7個不同分子量段的多糖分別進行小鼠體外免疫活性研究,通過檢測白蘞活性多糖對小鼠脾細胞體外增殖影響,選擇3個體外免疫活性高的進行體內(nèi)免疫活性研究,通過白蘞多糖對免疫低下小鼠體重及免疫器官指數(shù)的影響、單核/巨噬細胞功能的影響、T和B淋巴細胞增殖反應(yīng)的影響和免疫低下小鼠血清中TNF-α、IL-1的影響結(jié)果進行免疫功能的研究。(3)篩選后的白蘞活性多糖分別經(jīng)DEAE Cellulose 52纖維素柱色譜分離。采用高效凝膠滲透色譜法(HPGPC-ELSD)測定多糖的...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1膜分離裝置

佳木斯分離蘞總多糖（AJP），用最少的雙蒸水加熱溶解.1項下的操作方法進行膜分離，當(dāng)料箱中的多糖多糖，然后進行反洗，直至苯酚硫酸法檢測不a）分子量多糖濃縮凍干，得白蘞多糖（>150k液繼續(xù)以同樣的方法進行膜分離，更換不同分kDa，10kDa，6kDa）。得7個不同分子....

圖2-2提取時間對白蘞多糖提取率的影響

圖2-2提取時間對白蘞多糖提取率的影響Fig.2-2Effectofextractiontimeontheextractionrate取溫度對白蘞多糖提取率的影響提取時間的增高而逐漸增加，當(dāng)提取溫度達80℃、90℃、100℃取率最高（見圖2-3）。圖....

圖2-3提取溫度對白蘞多糖提取率的影響

隨著提取時間的增高而逐漸增加，當(dāng)提取溫度達80℃、90℃、100℃時，即可達到多糖提取率最高（見圖2-3）。圖2-3提取溫度對白蘞多糖提取率的影響Fig.2-3Effectofextractiontemperatureontheextractionra....

圖2-4料液比對白蘞多糖提取率的影響

隨著料液比的增加對提高白蘞多糖的影響較大，液料比從1:16~1:24時，多糖提取率隨著溶液比例的增加而增高，當(dāng)液料比達到1:20時，即可達到多糖提取率最高（見圖2-4）。圖2-4料液比對白蘞多糖提取率的影響Fig.2-4Effectofsolid-liquidr....

本文編號：3997804